医疗机构环境、物体表面清洁质量监测
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医疗机构环境、物体表面清洁质量监测
环境、物体表面清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
医疗机构环境监测
常规监测：
按照法律法规要求进行计划性监测
目标性监测：有既定目标的针对性监测。
对常规采样中各检测项目微生物总数超标部位进行复查。 医院感染暴发流行时针对在基本传播中有意义的媒介物进行监测。 其他（科研、评估控制措施的效果等）
小A老师的解答：
空白对照 阴性，排除 1 阴性对照 阴性，排除2 空白、阴性对照均阴性、排除3 结论：不合格
设立对照
监测中常用到的对照类型：
空白对照：对照组不施加任何措施。 阴性对照：除需要验证的变量，其他条件全部一样。
监测中设立对照的目的：
排除其他实验因素对结果产生的影响。 为寻找出现问题的环节提供线索。
情景—小A老师的监测结果有说服力吗？
小A老师
小B老师
6月1日 小A老师 沉降法 6月3日 空气监测结果 阳性 小B老师的困惑： 培养皿污染？ 操作中污染？ 培养过程中被污染？ 确实不合格？ 小A老师：... ... 结果：... ...
情景—小A老师的监测结果有说服力吗？师的困惑： 1、培养皿污染？ 2、操作中污染？ 3、培养过程中被污染？ 4、确实不合格？
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
标本送检与保存：
标本采集完成后，尽量及时送检 常温保存、送检时间不得超过 4h 若样品保存于0-4℃条件时，送检时间不得超过 24h
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
送检单内容：
标本号 （试管号） 送检日期 （时间） 送检人 送检科室（人物）
科室 、房间（地点） 送检标本名称 送检标本类型 （事件）
环境、物体表面清洁质量监测-直接接触培养法
琼脂平皿直接接触培养法
通过平皿表面与目标表面直接接触的方法收集微生物、通过微生物培养 结果，判断环境、物体表面清洁、消毒效果。
优点： 可以鉴定到菌种 操作简便、可立即送培养， 与拭子培养法相比，涉及环节较少
缺点 不适用于不规则表面；不适用于吸水的表面 对于污染浓度高的表面，由于单位面积细菌接种量大影响定量计数 消毒后表面，易受消毒剂残留影响
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
结果计算：
科室需要将细菌室提供的数据，除以采样面积大小。
细菌室提供数据 这两部分的乘积
小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示 。
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
判定标准：
洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非 洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、 烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落 总数≤5cfu/cm2
儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、 注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心 （室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊 及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2
环境、物表清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
结果解释（谨慎）
阳性拭子表示所采样表面存在微生物的高度污染 阴性拭子并不表示所采样表面不存在微生物的污染
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
采样时机：
常规监测，改建、新建后监测在 清洁、消毒后 怀疑与医院感染暴发有关时；清洁、消毒前，及时
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
物品准备：
定量试管
（已标号、无渗漏、有效期内）
化验单 酒精灯 火柴 无菌棉签（有效期、密封性） 无菌手套 油性铅笔 签字笔 采样人员执行手卫生
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
采样方法：
平面物表采样： 用 5cmx5cm 灭 菌 规 格 板 放 在 被 检 物
体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐 缓冲液（PBS）或生理盐水的棉拭子1 支，在规格板内横竖往返各涂抹5次， 并随之转动棉拭子，连续采样4个规格 板面积。
被采表面＜100cm2，取全部表面， 评估采样面积大小并记录
被采面积≥100cm2，取100cm2
不规则小型物表采样： 门把手等小型物体则采用棉拭子 直接涂抹物体表面采样。
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
采样时注意事项：
采样必须采取无菌操作，避免污染 医院未为每个科室提供规格板，请各监测人员采样时注意涂抹面积 对照：每批设空白对照与阴性对照
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
中和剂的选择：
含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需加入0．1％硫代硫酸钠 胍类消毒剂、季铵盐类消毒剂，加3％（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂； （当采样物体表面含有残留化学消毒剂时，采样溶液应含相应中和剂）
健之素片：有效成分 三氯异氰尿酸为主要有效成分（含氯消毒剂） 84消毒液：以次氯酸钠为主要有效成分（含氯消毒剂）
环境、物体表面清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
环境、物体表面清洁质量监测-感官法
感官法：
采用格式化的现场检查表格，培训考核人员，统一考核评判方法与标准 ，以视觉、嗅觉、擦拭方法检查环境是否干燥、无尘、无污垢、无碎屑 、无异味等。
优点：
环境清洁、消毒效果评价的金标准 可以鉴定到菌种 医院感染暴发事件的环境流行病学调查与干预过程中有重要价值
缺点：
周期长，不利于结果及时反馈给现场环境服务人员 涉及环节较多，不利于质量控制 微生物回收率较低；低污染浓度表面监测假阴性比较高
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
适用
感染暴发时的环境微生物学监测 高污染浓度表面的监测效果较好，低污染浓度表面采样假阴性高。
优点：成本低 缺点：主观性强，不能客观评价环境的实际安全程度 适用：常规考核方法，适用于所有环境
环境、物表表面清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
拭子培养法
应用拭子涂抹目标表面收集微生物，通过微生物培养结果，判断环境 、物体表面清洁、消毒效果。
环境、物体表面清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
医疗机构环境监测
常规监测：
按照法律法规要求进行计划性监测
目标性监测：有既定目标的针对性监测。
对常规采样中各检测项目微生物总数超标部位进行复查。 医院感染暴发流行时针对在基本传播中有意义的媒介物进行监测。 其他（科研、评估控制措施的效果等）
小A老师的解答：
空白对照 阴性，排除 1 阴性对照 阴性，排除2 空白、阴性对照均阴性、排除3 结论：不合格
设立对照
监测中常用到的对照类型：
空白对照：对照组不施加任何措施。 阴性对照：除需要验证的变量，其他条件全部一样。
监测中设立对照的目的：
排除其他实验因素对结果产生的影响。 为寻找出现问题的环节提供线索。
情景—小A老师的监测结果有说服力吗？
小A老师
小B老师
6月1日 小A老师 沉降法 6月3日 空气监测结果 阳性 小B老师的困惑： 培养皿污染？ 操作中污染？ 培养过程中被污染？ 确实不合格？ 小A老师：... ... 结果：... ...
情景—小A老师的监测结果有说服力吗？师的困惑： 1、培养皿污染？ 2、操作中污染？ 3、培养过程中被污染？ 4、确实不合格？
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
标本送检与保存：
标本采集完成后，尽量及时送检 常温保存、送检时间不得超过 4h 若样品保存于0-4℃条件时，送检时间不得超过 24h
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
送检单内容：
标本号 （试管号） 送检日期 （时间） 送检人 送检科室（人物）
科室 、房间（地点） 送检标本名称 送检标本类型 （事件）
环境、物体表面清洁质量监测-直接接触培养法
琼脂平皿直接接触培养法
通过平皿表面与目标表面直接接触的方法收集微生物、通过微生物培养 结果，判断环境、物体表面清洁、消毒效果。
优点： 可以鉴定到菌种 操作简便、可立即送培养， 与拭子培养法相比，涉及环节较少
缺点 不适用于不规则表面；不适用于吸水的表面 对于污染浓度高的表面，由于单位面积细菌接种量大影响定量计数 消毒后表面，易受消毒剂残留影响
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
结果计算：
科室需要将细菌室提供的数据，除以采样面积大小。
细菌室提供数据 这两部分的乘积
小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示 。
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
判定标准：
洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非 洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、 烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落 总数≤5cfu/cm2
儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、 注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心 （室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊 及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2
环境、物表清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
结果解释（谨慎）
阳性拭子表示所采样表面存在微生物的高度污染 阴性拭子并不表示所采样表面不存在微生物的污染
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
采样时机：
常规监测，改建、新建后监测在 清洁、消毒后 怀疑与医院感染暴发有关时；清洁、消毒前，及时
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
物品准备：
定量试管
（已标号、无渗漏、有效期内）
化验单 酒精灯 火柴 无菌棉签（有效期、密封性） 无菌手套 油性铅笔 签字笔 采样人员执行手卫生
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
采样方法：
平面物表采样： 用 5cmx5cm 灭 菌 规 格 板 放 在 被 检 物
体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐 缓冲液（PBS）或生理盐水的棉拭子1 支，在规格板内横竖往返各涂抹5次， 并随之转动棉拭子，连续采样4个规格 板面积。
被采表面＜100cm2，取全部表面， 评估采样面积大小并记录
被采面积≥100cm2，取100cm2
不规则小型物表采样： 门把手等小型物体则采用棉拭子 直接涂抹物体表面采样。
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
采样时注意事项：
采样必须采取无菌操作，避免污染 医院未为每个科室提供规格板，请各监测人员采样时注意涂抹面积 对照：每批设空白对照与阴性对照
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
中和剂的选择：
含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需加入0．1％硫代硫酸钠 胍类消毒剂、季铵盐类消毒剂，加3％（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂； （当采样物体表面含有残留化学消毒剂时，采样溶液应含相应中和剂）
健之素片：有效成分 三氯异氰尿酸为主要有效成分（含氯消毒剂） 84消毒液：以次氯酸钠为主要有效成分（含氯消毒剂）
环境、物体表面清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
环境、物体表面清洁质量监测-感官法
感官法：
采用格式化的现场检查表格，培训考核人员，统一考核评判方法与标准 ，以视觉、嗅觉、擦拭方法检查环境是否干燥、无尘、无污垢、无碎屑 、无异味等。
优点：
环境清洁、消毒效果评价的金标准 可以鉴定到菌种 医院感染暴发事件的环境流行病学调查与干预过程中有重要价值
缺点：
周期长，不利于结果及时反馈给现场环境服务人员 涉及环节较多，不利于质量控制 微生物回收率较低；低污染浓度表面监测假阴性比较高
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
适用
感染暴发时的环境微生物学监测 高污染浓度表面的监测效果较好，低污染浓度表面采样假阴性高。
优点：成本低 缺点：主观性强，不能客观评价环境的实际安全程度 适用：常规考核方法，适用于所有环境
环境、物表表面清洁质量监测
感官法 微生物培养法
拭子培养法 琼脂直接接触培养法
化学法
ATP生物荧光法 荧光标记法 荧光粉剂法
环境、物体表面清洁质量监测-拭子培养法
拭子培养法
应用拭子涂抹目标表面收集微生物，通过微生物培养结果，判断环境 、物体表面清洁、消毒效果。