测定水产品中甲醛含量的分光光度法研究_杜永芳

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均值 标准偏差 相对标准偏差 7 0
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收稿日期： "$$/4$&4"" 基金项目：国家自然科学基金项目 （7?+ &$.%!&/$ ） 作者简介：杜永芳， 女， 硕士生 !-%# 年出生，
量。
!"% 实验步骤 !+.+! 标准曲线法
2!
中 国 食 品 学 报
!""# 年第 $ 期
%&’&%&% 样品处理 依据 ()#%*!+!""! 标准附录 用水蒸汽蒸馏法代替直接蒸馏法。按要求取不 !，
吸光度
间， 配制甲醛标准溶液数份， 加入乙酰丙酮后分别 在 沸 水 浴 中 显 色 &’(， 测 定 不 同 时 间 的 吸 光 度 （%) ， 如图 " 所示。 由图 " 可看出， 在 %- *+, 以 %# *+,） 前， 吸光度随时间的增加而增加， 但 在 %- *+, 时 显色已完全， 因此选择 %- *+, 作为本方法的显色 时间。 不同时间的显色液吸光度实验表明： 在 %- . 内显色是稳定的，其最大相对偏差 !/0 ，如表 % 所示。
注： 5G 显色液的含量， *F 7 HF ； 6G 吸光度值。
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回收率
向已知含有甲醛的样品中加入一
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讨。
定量甲醛标准溶液， 进行加标回收率的实验 。结 果 表 明 不 同 种 类 样 品 的 甲 醛 回 收 率 不 同 （见 表 ， 其中水发水产品的回收率高达 4-0 ， 鲜活鱼类 #） 甲醛的回收率 "2-0 ，干制水产品和虾类产品甲 醛的回收率较低， 约为 ’-0 。 不同水产品的回收率 差异较大， 这可能与样品基体干扰有关。因此， 采 用龙头鱼和蓝鳕为实验材料，用标准加入法进行 了研究，发现用标准加入法测得的甲醛的含量较 标准曲线法高 （见表 "） 。采用标准加入法进行检 测，其准确度和样品的适用范围有待于进一步探
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显色时间 7 *+,
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蒸馏时间
应用直接蒸馏法， 在 #-- *1 水
中加入一定量的甲醛， 蒸馏 "- *+, ， 其蒸馏液仅为 相应的回收率为 33$’30 。而采用水蒸汽 %’2 *1， 蒸馏法时，蒸馏量为 #-- *1 的蒸馏时间仅用 #" 相应的回收率为 43$-40 。 *+,，
D/,&% ?EFGHIJ/G0 FIK6JHG,HL- GM MGH-LNOKPQOK 6GNGH/0, FGNRJ/G0
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的研究
方法精密度、 检出限、 回收率及影响因素 按 89#""2&% 《 食品卫生检验方法 理化
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甲醛的标准曲线
向配制的一系列甲醛标
部分 总则》 的有关要求进行:#;。 同时选择几种水产 品中可能影响测定结果的物质，配置成一定的浓 度， 通过测定吸光度评价对检测结果的影响。
混匀， 贮存于 棕 色 乙酸 & ’3 和乙酰丙酮 $+. ’3， 瓶） 、 （采用碘量法标定） 。 / !1 2 ’3 甲醛标准溶液
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方法和原理 水产品中的甲醛在磷酸介质中经水蒸汽加热
蒸馏出来， 再经冷凝水冷却进行吸收， 蒸馏液与乙 酰丙酮反应生成黄色的二乙酰基二氢甲基吡啶
5.6 （<<3） ， 用分光光度计在特征吸收波长下比色定
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（% ）
吸光度
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式 中 ： # —水 —— 产 品 中 甲 醛 含 量 ， -, 3 >,； —— 标 准 曲 线 上 查 得 的 甲 醛 质 量 浓 度 ， $—从 !, 3 ； —显色溶 —— 液 的 总 体 积 ， ； —样 —— 品 质 -. %" -. % —— 品 测 定 时 取 蒸 馏 液 的 体 积 ， 量， ,； ! !—样 -.； —— !""—蒸馏液总体积， -.。 %&’&! 标 准 加 入 法 分 取 # 份 相 同 量 的 待 测 样 品， 在样品中分别加入不同量的甲醛标准溶液 （其 中 % 份不加） 。设待测样品中甲醛的浓度为 $& ， 样 品处理同 %&’&%&%， 分别测得其吸光度值为 ?@ 、 ?%、
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结果
标准曲线法 甲醛的最大吸收波长 将甲醛标准溶液显
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色后用分光光度计进行扫描，记录其吸收光谱图 （如图 % 所示） ，显色液的最大吸收峰出现在
’%$ 0- 处。
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标准曲线绘制
分别吸取 # !, 3 -. 甲醛
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标 准 液 "、 !&"、 ’&"、 4&"、 5&"、 %"&"-. 置 于 %" -. 纳 氏比色管中， 加 水 至 %" -.， 加 入 % -. 乙 酰 丙 酮 溶液， 混合均匀， 置于沸水浴中加热 %" -/0 ， 取出， 用水冷却至室温。以空白为参比， 于波长 ’%$ 0处利用 % 6- 比色杯进行比色， 以吸光度对浓度绘 制标准曲线。
表!
图"
甲醛溶液显色时间与吸光度的关系
I+F$" J:95<+C, 6:<K::, EC9C@+,F <+*: 5,L 56AC@6:,E= CD DC@*59L:.=L: AC9B<+C,
显色液稳定性实验结果
Baidu Nhomakorabea
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时间
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准溶液中加入显色剂水浴显色，用分光光度计比 色，绘制标准曲线，其线形方程为 ) < ’&’$"’A + 如图 ! 所示。 说明该方法具有 "&!%52， B! < "&2222， 很好的线性关系。
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结果计算
每个样品应作 ! 个平行样，
以其算术平均值为测定结果，并表示至小数点后 （%） 计算。 ! 位。样品中甲醛的含量按公式 # < $ = %" = !"" % = !!
周德庆 !
青岛 "##$%!
（! 中国水产科学研究院黄海水产研究所
"
中国海洋大学生命科学与技术学部
青岛 "##$%! ）
摘要
用水蒸气蒸馏法代替了直接蒸馏法， 改进了水产品中甲醛含量检测的分光光度法， 并将该方法用于各类
后者 水产品中甲醛含量的测定。结果表明： 直接蒸馏法与水蒸气蒸馏法相比， 前者 &$ ’() 的回收率为 **+#*, ， 该法在对水发水产品、 鲜活水产品、 干制品及虾类甲醛含量的检测时， 发现其平均回 "& ’() 的回收率为 -*+$-,。 说明存在样品基体干扰问题， 必须采用 标 准 加 入 法 才 能 得 到 准 收率分别为 *-+#$, 、 %.+&$, 、 #/+#., 和 #$+%", ， 方法检出限为 $+$"# !1 2 ’3； 乙醛、 丙酮、 丁醛、 丙烯醛 确的定量结果。另外， 显色液在常温下可稳定 !$ 0 以上； 等结构类似的化学物质和金属离子的干扰少； 用标准加入法可以克服样品基体的部分干扰。总之， 改进后的分 光光度法能明显提高方法的准确性和特异性， 可满足水产品中甲醛含量的测定要求。 关键词 文章编号 水产品 甲醛 分光光度法 测定
’
#
甲醛含量 （ ・ 3 -, >, ）
图!
分光光度法测定甲醛的标准曲线
D/,&! SJL0OLHO 6RHTK GM MGH-LNOKPQOK EQ FIK6JHGIPGJG-KJHQ
第!卷 第"期
测定水产品中甲醛含量的分光光度法研究
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显色时间及其稳定性
为确定最佳反应时
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样品测定
根据样品蒸馏液中甲醛浓度
图# 甲醛显色液的吸收光谱
的 高 低 ， 吸 取 蒸 馏 液 %7%" -.， 补 加 蒸 馏 水 至 以 下 按 %&’&%&! 操 作 进 行 ， 记录吸光度， 从 %" -.， 标准曲线中查出样品蒸馏液的甲醛浓度。
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甲醛又称蚁醛， 具有强烈的刺激性气味， 对人 体和动物具有较高的毒性， 对神经系统、 肺、 肝脏 均可产生损害。 世界卫生组织将甲醛确定为致癌、 致畸物质和公认的变态反应源 ， 我国也早已明令
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材料与方法
材料 本实验采用的水产品均购于青岛市水产品市
第&期 "$$/ 年 - 月
第/卷
中 国 食 品 学 报
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测定水产品中甲醛含量的分光光度法研究
" 杜永芳 !，
柳淑芳 !
" 马敬军 !，
水发水产品、 水产 场， 包括鲜活淡水 2 海水鱼虾类、 干制品等。
禁止在食品中添加甲醛。然而在我国水产品市场 上， 有些不法商贩为牟取暴利， 经常在水产品特别 是水发水产品中添加甲醛，直接危害到消费者的 食用安全，因此迫切需要建立甲醛测定方法的标 准， 全面实行对水产品市场质量安全的监督检验5"6。 测定水产品中甲醛含量的行业标准 （78/!%" 中规定了检测水产品中甲醛含量的方法为 4"$$"） 乙酰丙酮法5&6。 在实践中发现该方法处理样品时所 采用的直接蒸馏法对很多样品不适合。 因此， 在此 基础上进行了改进。首次采用了水蒸汽蒸馏法处 理样品，从而可以快速地将水产品中游离态和可 逆结合态的甲醛全部蒸馏出来，再用乙酰丙酮显 色后， 用分光光度计测定甲醛含量， 提高了检测样 品的准确度。
同水产样品， 用组织捣碎机捣碎， 混合均匀后称取
得 ?!、 ?$……。以 ? 对甲醛标准溶液加入量作图， 到一条直线， 将直线外推至与横坐标相交， 交点至 坐标原点的距离就是待测样品的浓度 $& 。
%" , 置于 !#" -. 圆底烧 瓶 中 ， 加 入 !" -. 蒸 馏
水，用玻璃棒搅拌混匀，浸泡 $" -/0 后加 %" -. 磷酸溶液 （% 1 2， ， 立即通入水蒸汽进行蒸馏。 ! "!） 接收管下口事先插入盛有 !" -. 蒸馏水且置于冰 浴中的蒸馏液接收装置中。蒸馏过程中应根据不 同样品的特性适当调整温度以防止泡沫外溢干扰 实验结果。准确收集蒸馏液至 !"" -.， 同时做空 白对照。
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精密度实验
分别采用 " 种甲醛含量明显
不同的牙鲆、水发鱼皮和水发银鱼样品进行重复 测定， 每种样品测定 ’ 次， 计算相对标准偏差。结 果表明： 当样品中甲醛含量 !! *F 7 HF 时， 相对标 准 偏 差 !%-0 ； 当 样 品 中 甲 醛 含 量 !)!- *F 7 HF 时， 相 对 标 准 偏 差 !!0 ； 当 样 品 中 甲 醛 含 量 "!相对标准偏差!"0 。显然， 甲醛的精密 *F 7 HF 时， 度与其含量相关， 甲醛含量越高， 其测定值的精密 度越高， 如表 / 所示。
!"# 仪器与试剂 水 !+"+! 仪器 9:4"#/ 紫外 2 可见分光光度计； 蒸汽蒸馏装置包括 ! $$$ ’3 圆底烧瓶、 "/$ ’3 圆 底烧瓶、蒸馏液接收装置、 ;<= 型 调 温 电 热 套 ， 组织捣碎机等。 "$$ ’3 容量瓶， !$ ’3 纳氏比色管， （! > - ， 、 乙酰丙酮溶 !+"+" 试剂 磷酸溶液 ! "!） 液 （称取乙酸铵 "/ 1 溶于 !$$ ’3 蒸馏水中， 加冰