中性粒细胞吞噬功能测定 ppt课件

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搅拌混匀。
将凹玻片放在湿盒内,置于 37℃孵箱30~45min。
取一滴于载玻片上,制成薄涂片,自 然干燥。
实验结果
在油镜下可细胞核及被吞噬的细菌被染成紫色, 而中性粒细胞的胞浆被染成淡红色。
被 吞 入 细 菌
指标检测
1、吞噬百分率= 100个中性粒细胞中吞噬了细菌的细胞数 100
×100%
人吞噬百分率正常参考值:62%~76%
1、菌液:表皮葡萄球菌菌液(9亿/ml)
2、抗凝剂:3.8%枸缘酸钠或肝素(25U/ml)
3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、 瑞特-吉姆萨染料、pH=6.4 PB、酒精棉球、采 血针、显微镜、香柏油、洗镜油等。
实验流程
蒸馏水洗(平持玻片,在一端加 水,使染液“漂走”),待干,
镜检。
置于吉姆萨染液中, 5~10min后取出
实验原理
吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等 步骤,能吞噬和消化衰老、损伤及病原微生物 等异物,是机体固有免疫的重要组成部分。在 一定条件下,将白细胞悬液与细菌混合,保持 一段时间后,取样涂片染色镜检,可以测定中 性粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。该实 验可助诊断吞噬细胞功能障碍的疾病。
实验材料
置于pH=6.4 PB中, 3min后取出。
置于瑞氏液中,1min后取 出。
取凹玻片一张,在凹孔中加1 滴(0.4ml)3.8%枸缘酸钠或
者肝素(25U/ml)
酒精棉球消毒左手无名指后,用 采血针在消毒部位取血2~3滴
(约0.2ml),加入凹孔中混匀。
加表皮葡萄糖液1滴 (0.02~0.04ml),后用牙签轻轻
小吞噬细胞吞噬功能测定 ——细菌计数法
2014级麻醉学1班—— 学号:1410550160
Fra Baidu bibliotek 实验目的
熟悉中性粒细胞的生物学特性及其意义、观察 机体的非特异性免疫现象
掌握血液中的中性粒细胞体外吞噬异物能力的 测定方法及用途
小吞噬细胞
即是中性粒细胞; 来源于骨髓造血干细胞; 占白细胞总数的60%~70%; 生命周期短,不能分裂;
2、吞噬指数= 100个中性粒细胞吞噬的细菌总数 ×100% 100
人吞噬指数正常参考值:1.32~1.72
注意事项
1、中性粒细胞吞噬活性在37℃时最好,温度过 高或者过低均会使其吞噬能力减低;
2、个体差异、年龄、健康状况的不同,其吞噬 能力不同;
3、掌握好中性粒细胞与细菌的作用时间(中性 粒细胞对细菌吞噬非常迅速,5min左右吞噬率 达45%,10min左右接近80%,20min左右即达平 台)。
4、制片之前要混匀,涂片过薄、过厚都会影响 观察。
中性粒细胞生物学特性:
A、在抗化脓性细菌感染中起主要 防御作用
B、引起感染部位急性炎症反应 C、参与超敏反应(如Ⅲ型超敏反 应),引起机体免疫病理损伤。
细胞核呈多叶状,胞质内含多种颗 颗粒粒内:含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、
组蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞所特有,巨噬细胞没有这种酶, 为中性粒细胞在细胞化学法上的标志。
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