硫酸盐还原菌修复铬_污染土壤研究_吴淑杭

农业环境科学学报２００７，２６（２）：４６７－４７１
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｏ－ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ
摘要：从含铬污水、活性污泥和铬污染土壤中分离出６株硫酸盐还原菌（ｓｕｌｐｈａｔｅ－ｒｅｄｕｃｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ，简称ＳＲＢ），并对它们进行了
还原Ｃｒ（Ⅵ）能力的验证试验，研究了利用其中２株菌（Ｗｎ－１和Ｗｓ－２）修复Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤的效果。

结果表明，分离获得的６株ＳＲＢ都具有还原Ｃｒ（Ⅵ）能力，综合分析３个不同初始Ｃｒ（Ⅵ）浓度的Ｃｒ（Ⅵ）转化率，Ｗｎ－１和Ｗｓ－２的还原Ｃｒ（Ⅵ）能力较强，其次为Ｗｓ－１和Ｗｎ－２，而Ｔｊ和Ｔｇ较弱，即从电镀厂污水处理厂污水和活性污泥中分离的菌株Ｃｒ（Ⅵ）还原能力较强，而从电镀厂附近土壤和基地铬污染土壤中分离的菌株Ｃｒ（Ⅵ）还原能力较差；初始Ｃｒ（Ⅵ）浓度过高会抑制硫酸盐还原菌的还原能力；菌株Ｗｎ－１和Ｗｓ－２都能很好地修复Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤，但它们的混合菌液修复效果更佳，１０ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率达７５．３％；菌株Ｗｎ－１和Ｗｓ－２经初步鉴定为脱硫弧菌。

关键词：铬（Ⅵ）污染；生物修复；硫酸盐还原菌；土壤中图分类号：Ｘ５３
文献标识码：Ａ
文章编号：１６７２－２０４３（２００７）０２－０４６７－０５
收稿日期：２００６－１０－１７
基金项目：上海市农委攻关项目（沪农科攻字（２００３）第１０－５号）作者简介：吴淑杭（１９７０—），男，副研究员，博士研究生，主要从事有机
废弃物资源化、污染控制微生物工程等领域的研究。

Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｕｓｈｕｈａｎｇ８８＠１６３．ｃｏｍ
由于在工业中大量使用铬及其化合物，使得受铬污染的土壤越来越多。

近年来有研究发现，不少细菌产生的特殊酶能还原重金属，从而降低重金属的毒
性。

比如Ｃｒ（Ⅵ）是可以采用Ｃｒ（Ⅵ）还原菌修复技术来处理的污染物。

如ＤｅｓｊａｒｄｉｎＶ．等对法国Ｒｈｏｎｅ－Ａｌｐｅｓ地区的被污染土壤中微生物的活性对铬化学状态的影响进行了研究，将可以降低Ｃｒ（Ⅵ）的链霉菌ｔｈｅｒ－
ｍｏｃａｒｂｏｘｙｄｕｓ菌株从被污染的土壤中分离出来进行
研究，发现该菌株可以将Ｃｒ（Ⅵ）固定，其固定形式与外生的接种体假单细胞荧光ＬＢ３００相类似，都是将
硫酸盐还原菌修复铬（Ⅵ）污染土壤研究
吴淑杭１，２，周德平１，吕卫光１，姜震方１，徐亚同２
（１．上海市农业科学院环境科学研究所，上海２０１１０６；２．华东师范大学环境科学系，上海２０００６３）
ＲｅｍｅｄｉａｔｉｏｎｏｆＨｅｘａｖａｌｅｎｔＣｈｒｏｍｉｕｍ－ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄＳｏｉｌｂｙＳｕｌｐｈａｔｅ－ＲｅｄｕｃｉｎｇＢａｃｔｅｒｉａ
ＷＵＳｈｕ－ｈａｎｇ１，２，ＺＨＯＵＤｅ－ｐｉｎｇ１，ＬＵＷｅｉ－ｇｕａｎｇ１，ＪＩＡＮＧＺｈｅｎ－ｆａｎｇ１，ＸＵＹａ－ｔｏｎｇ２
（１．ＥｎｖｉｒｏｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＳｈａｎｇｈａｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１１０６，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎｖｉ－ｒｏｎｍｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００６３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｗｅｒｅｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｄｅｏｘｉｄｉｚｅＣｒ（Ⅵ）ｕｓｉｎｇＳＲＢ（ｓｕｌｐｈａｔｅ－ｒｅｄｕｃｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ）ｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍｃｈｒｏｍｉｕｍ－ｐｏｌｌｕｔｅｄｗａｓｔｅｗａｔｅｒ，ｓｏｉｌａｎｄａｃｔｉｖａｔｅｄｓｌｕｄｇｅ．Ｔｈｅｒｅｐａｉｒｉｎｇｅｆｆｅｃｔｔｏｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ－ｓｏｉｌｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｕｓｉｎｇｔｗｏｓｔｒａｉｎｓ（Ｗｎ－１ａｎｄＷｓ－２）ａｍｏｎｇｔｈｅｓｉｘｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅｓｉｘｂａｃｔｅｒｉａｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅａｌｌｃａｐａｂｌｅｏｆｓｕｌｐｈａｔｅ－ｒｅｄｕｃｉｎｇ．ＷｈｅｎｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＣｒ（Ⅵ）
ｗａｓ５０ｍｇ・Ｌ－１，ｆｏｕｒｓｔｒａｉｎｓ（Ｗｎ－１，Ｗｓ－２，Ｗｓ－１ａｎｄＷｎ－２）ｅｘｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔｄｅｏｘｉｄｉｚａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙ．Ｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｒａｔｅｒｅａｃｈｅｄ１００％ａｆｔｅｒ３ｄａｙｓ；ｗｈｉｌｅａｔ１００ｍｇ・Ｌ－１ｏｆＣｒ（Ⅵ），Ｗｎ－１ｅｘｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔｄｅｏｘｉｄｉｚａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙ，ｗｉｔｈｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｒａｔｅ５７．３％３ｄａｙｓｌａｔｅｒ．Ｗｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒｅａｃｈｅｄ２００ｍｇ
・Ｌ－１ｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＷｎ－１ｗａｓｕｐｔｏ２３．１％，ｂｅｔｔｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆＷｓ－２ａｎｄＷｓ－１，ｂｅｉｎｇ１５．６％ａｎｄ１３．６％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｗｎ－１ａｎｄＷｓ－２ｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍｗａｓｔｅｗａｔｅｒａｎｄａｃｔｉｖａｔｅｄｓｌｕｄｇｅｏｆｅｌｅｃｔｒｏｐｌａｔｅｆａｃｔｏｒｙ＇ｓｗａｓｔｅｗａ－ｔｅｒｐｌａｎｔｓｐｏｓｓｅｓｓｅｄｔｈｅｂｅｓｔｄｅｏｘｉｄｉｚａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙ，ｓｕｐｅｒｉｏｒｔｏＷｓ－１ａｎｄＷｎ－２，ｗｈｉｌｅｔｈｅｗｅａｋｅｓｔｗｅｒｅＴｊａｎｄＴｇｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｓｏｉｌｏｆｅｌｅｃｔｒｏｐｌａｔｅｆａｃｔｏｒｙ．ＥｘｏｒｂｉｔａｎｔｐｒｉｍａｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＣｒ（Ⅵ）ｃｏｕｌｄｒｅｓｔｒａｉｎｔｈｅｄｅｏｘｉｄｉｚａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆＳＲＢ．Ｔｈｅｒｅｐａｉｒｉｎｇｅｆｆｅｃｔｔｏｃｏｎｔａｍ－ｉｎａｔｅｄｓｏｉｌｃａｎｂｅｉｍｐｒｏｖｅｄｕｐｔｏ７５．３％ａｆｔｅｒ１０ｄａｙｓｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｍｉｘｅｄＷｎ－１ａｎｄＷｓ－２，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＷｎ－１ａｎｄＷｓ－２ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｗｎ－１ａｎｄＷｓ－２ｗｅｒｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＤｅｓｕｌｐｈｏｖｉｂｒｉｏｓｐ．．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｅｘａｖａｌｅｎｔｃｈｒｏｍｉｕｍ－ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ；ｂｉｏ－ｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ；ｓｕｌｐｈａｔｅ－ｒｅｄｕｃｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ；ｓｏｉｌ
２００７年３月
铬沉降为类似于Ｙ－Ｃｒ００Ｈ结构的铬的羟基氧化物［１］。

韩怀芬等通过土壤与含铬的培养基一起培养，筛选出５种能还原Ｃｒ（Ⅵ）的菌种，经鉴定分别为产碱杆菌、土壤杆菌、芽孢杆菌、葡糖杆菌和假单胞菌，并用这些菌种处理铬污染土壤有很好的效果［２］。

瞿建国等从土壤中分离筛选出几株抗Ｃｒ（Ⅵ）的硫酸盐还原菌（ｓｕｌ－ｐｈａｔｅ－ｒｅｄｕｃｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ，缩写为ＳＲＢ），能在含８００ｍｇ・Ｌ－１Ｃｒ（Ⅵ）的培养基中生长，其中２－ｓ－８菌株在含７５ｍｇ・Ｌ－１Ｃｒ（Ⅵ）的培养基中生长３６ｈ后，培养液中的Ｃｒ（Ⅵ）已全部消失［３］。

通过比较已有的Ｃｒ（Ⅵ）还原菌，发现硫酸盐还原菌最具潜力［４］。

对于运用ＳＲＢ修复铬污染环境，目前把水溶液中的Ｃｒ（Ⅵ）还原为Ｃｒ（Ⅲ）的研究较多，而针对Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤，利用ＳＲＢ的生物还原作用将Ｃｒ（Ⅵ）还原成Ｃｒ（Ⅲ），以降低铬的植物有效性和生物毒性的生物修复技术研究报道较少［５、６］。

本研究针对上海某黄桃基地因曾施用皮革废料有机肥致使土壤轻度铬污染而造成黄桃铬含量微量超标（经有关部门检测，该基地生产的黄桃中Ｃｒ含量为０．６２ｍｇ・ｋｇ－１，而国家标准——
—农产品安全质量无公害水果安全要求（ＧＢ１８４０６．２—２００１）中要求总铬含量≤０．５ｍｇ・ｋｇ－１。

），进行了硫酸盐还原菌分离筛选及还原Ｃｒ（Ⅵ）效果验证，研究了利用ＳＲＢ转化污染土壤中Ｃｒ（Ⅵ）为Ｃｒ（Ⅲ）的效果，以降低土壤中铬的植物有效性和毒性，为土壤受轻度铬污染的黄桃生产基地安全生产提供一项有效措施。

１材料与方法
１．１试验材料
１．１．１菌株分离源
上海市某电镀厂污水（简称：Ｗｓ；总铬含量：１８１３．４ｍｇ・Ｌ－１）及其处理厂的活性污泥（简称：Ｗｎ；总铬含量：１４５８２．８ｍｇ・Ｌ－１）、某电镀厂附近土壤（简称：Ｔｇ；总铬含量：３４２．４ｍｇ・Ｌ－１）和上海某黄桃基地铬污染土壤（简称：Ｔｊ；总铬含量：１１０．７ｍｇ・Ｌ－１）。

１．１．２Ｃｒ（Ⅵ）样品
分析纯Ｋ２Ｃｒ２Ｏ７。

１．１．３土壤样品
上海市农业科学院试验场水稻土。

供试土样（０￣２０ｃｍ）风干后过２ｍｍ尼龙筛备用。

土壤基本性质如下：ｐＨ７．３０，有机质２６．３ｇ・ｋｇ－１，全氮２．２５ｇ・ｋｇ－１，全磷０．７５ｇ・ｋｇ－１，全钾１７．４ｇ・ｋｇ－１，铬（Ⅵ）５．１ｍｇ・ｋｇ－１。

１．１．４培养基
培养基１：蛋白胨１０．０ｇ・Ｌ－１，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ２．０ｇ・Ｌ－１，Ｎａ２ＳＯ３０．５ｇ・Ｌ－１，ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．５ｇ・Ｌ－１，柠檬酸铁０．５ｇ・Ｌ－１，乳酸钠０．５ｇ・Ｌ－１，１％巯基醋酸钠１０ｍＬ，１％抗坏血酸钠１０ｍＬ，加入蒸馏水１Ｌ，调节ｐＨ至７．５左右。

在１２１℃、０．１１ＭＰａ高压灭菌２０ｍｉｎ，冷却后备用。

巯基醋酸钠和抗坏血酸钠预先配成１％的溶液并经过高压灭菌，使用前按上述量加入［６］。

培养基２：ＮａＨ２ＰＯ４１．２ｇ・Ｌ－１，ＫＨ２ＰＯ４１．８ｇ・Ｌ－１，Ｎａ２ＳＯ４４．０ｇ・Ｌ－１，ＮＨ４Ｃｌ１．０ｇ・Ｌ－１，ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ０．０５ｇ・Ｌ－１，乳酸钠３．５ｍＬ，１∶１柠檬酸钠－ＦｅＣｌ２溶液（０．５ｇ・Ｌ－１）１．０ｍＬ，酵母浸膏１．０ｇ・Ｌ－１，蒸馏水１０００ｍＬ，调节ｐＨ至７．５。

经１２１℃、０．１１ＭＰａ高压灭菌２０ｍｉｎ，冷却后备用［７］。

１．２试验方法
１．２．１硫酸盐还原菌的富集、驯化和分离方法
菌种富集：对于土样和污泥，称２．０ｇ置于无菌试管中，再加入９．０ｍＬ０．８５％的生理盐水，制成１０－１的稀释液，吸取２．０ｍＬ这样的稀释液加入１３０ｍＬ血清瓶中，而对于污水则先吸取５．０ｍＬ原样，再用新鲜培养基１注满该血清瓶，并置于３０℃培养箱中培养至产出极浓的黑色沉淀（ＦｅＳ）。

在培养过程中对培养物中的菌体进行镜检，如果发现弧菌或杆菌已成优势种，则可认为该富集物已基本上是硫酸盐还原菌为主；如果不是，则将黑色富集物转接至新鲜培养基中，接种量为１０％，直至镜检发现弧菌或杆菌已成优势种［７］。

菌种驯化：将富集菌液，以１０％接种量接到装有培养基１的螺口试管中，同时加入一定浓度的Ｋ２Ｃｒ２Ｏ７在３０℃培养箱中驯化培养。

最初加入的Ｃｒ（Ⅵ）浓度为５０ｍｇ・Ｌ－１，以后依次以５０ｍｇ・Ｌ－１梯度递增，待试管中菌体明显长出后，取出一部分进行转接，直到最后的Ｃｒ（Ⅵ）浓度为２００ｍｇ・Ｌ－１［６、８］。

菌种分离与纯化：采用二重皿法。

将培养皿的上盖和内皿向同一方向撂起来，外盖在下。

灭菌后并列于无菌室内的桌上，把内皿提起架在外盖的边缘上，在内外盖的空隙里加入驯化菌液０．５ｍＬ，然后注入２０ｍＬ溶解且保温在４５℃左右的琼脂培养基１，固化后置于３０℃培养箱中培养至长出完整的黑色菌落［７］。

１．２．２菌株的初步鉴定
菌体染色及形态观察：采用培养基１接种待测菌株，将处于对数生长期的菌体进行革兰氏染色，在光学显微镜下观察菌株的革兰氏染色结果及细菌形态。

脱硫绿啶（Ｄｅｓｕｌｆｏｖｉｒｉｄｉｎ）的定性检查：脱硫绿啶属于亚硫酸盐还原酶中的一种，可以通过以下方法检
吴淑杭等：硫酸盐还原菌修复铬（Ⅵ）污染土壤研究４６８
第２６卷第２期农业环境科学学报
测：采用培养基２接种培养待测菌株，３０℃恒温培养３￣６ｄ，取４０ｍＬ菌液于４０００ｒ・ｍｉｎ－１离心３０ｍｉｎ，弃掉上清液，往沉淀的菌体滴几滴２ｍｏｌ・Ｌ－１ＮａＯＨ，然后用吸管将其移到滤纸片上，在３６５ｎｍ紫外灯光下进行观察。

若菌体能够发出红色荧光则说明体内含有脱硫绿啶，该菌株为ＳＲＢ，否则，脱硫绿啶阴性，该菌株不是ＳＲＢ［７］。

１．２．３硫酸盐还原菌还原铬（Ⅵ）能力验证试验
移取２．０ｍＬ己活化好的菌种接种至１３０ｍＬ血清瓶中，加入一定量Ｃｒ（Ⅵ）液（以液态分析纯Ｋ２Ｃｒ２Ｏ７加入），最后用培养基１注满，塞紧橡皮塞。

将培养液在３０℃、１００ｒ・ｍｉｎ－１摇床上振荡恒温培养。

间隔一定时间，吸取５．０ｍＬ该试液于１０ｍＬ离心管中，以４０００ｒ・ｍｉｎ－１转速离心１０ｍｉｎ，取上清液测定其剩余Ｃｒ（Ⅵ）的浓度；同时以不加菌的培养基作对照；每个处理重复３次。

１．２．４硫酸盐还原菌修复铬（Ⅵ）污染土壤试验
称取过２ｍｍ筛风干土１００ｇ，以溶液态加入分析纯Ｋ２Ｃｒ２Ｏ７，制成含１５０ｍｇ・ｋｇ－１Ｃｒ（Ⅵ）的污染土壤，分别加入１０ｍＬ培养基１（处理Ａ）、１０ｍＬＷｎ－１菌液（处理Ｂ）、１０ｍＬＷｓ－２菌液（处理Ｃ）、５ｍＬＷｎ－１菌液＋５ｍＬＷｓ－２（处理Ｄ），各处理重复３次；土样混和均匀后，加入蒸馏水使含水量为田间持水量的６０％，放在１００ｍＬ烧瓶中３０℃培养，分别在２、４、７、１０ｄ后测定土壤中剩余Ｃｒ（Ⅵ）含量，试验设３重复。

１．３测定方法
Ｃｒ（Ⅵ）：二苯碳酰二肼分光光度法（ＧＢ／Ｔ１５５５５．４—１９９５）；ｐＨ、有机质、全氮、全磷和全钾等参照“土壤农业化学分析方法”［９］。

２试验结果与讨论
２．１硫酸盐还原菌的筛选和初步鉴定
筛选出硫酸盐还原菌６株，依次编号为Ｗｎ－１、Ｗｎ－２、Ｗｓ－１、Ｗｓ－２、Ｔｊ和Ｔｇ。

菌株Ｗｓ－１和Ｗｓ－２从上海市某电镀厂污水中分离获得，而Ｗｎ－１和Ｗｎ－２从其污水处理厂的活性污泥中分离获得，Ｔｇ从电镀厂附近土壤中分离，Ｔｊ从上海某黄桃基地铬污染土壤中分离。

在还原Ｃｒ（Ⅵ）能力验证中，菌株Ｗｎ－１和Ｗｓ－２的还原能力较强，我们只对菌株Ｗｎ－１和Ｗｓ－２做了鉴定。

它们形状为弧形，不能产生抗热的芽孢，菌体内含有脱硫绿啶的亚硫酸盐还原酶，且具有直进性的运动，这与伯杰菌种鉴定手册中对脱硫弧菌属鉴定描述的特征相吻合，故Ｗｎ－１和Ｗｓ－２初步鉴定都应归入脱硫弧菌属，但具体为哪一种，尚需进一步鉴定。

２．２硫酸盐还原菌还原Ｃｒ（Ⅵ）的效果
从表１可知，６株ＳＲＢ菌都具有Ｃｒ（Ⅵ）还原能力，但它们的Ｃｒ（Ⅵ）还原能力不同。

初始Ｃｒ（Ⅵ）为５０ｍｇ・Ｌ－１时，Ｗｎ－１、Ｗｓ－２、Ｗｓ－１和Ｗｎ－２的还原能力较强，１ｄ后它们的Ｃｒ（Ⅵ）的转化率分别为１００％、１００％、９６．３％和８０．１％，３ｄ后它们的Ｃｒ（Ⅵ）的转化率都达１００％，它们与Ｔｇ、Ｔｊ和对照比较差异显著（Ｐ＜０．０５），与对照比较差异极显著（Ｐ＜０．０１），Ｔｇ、Ｔｊ和对照３ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率分别为４４．７％、４０．６％和１．９％。

初始Ｃｒ（Ⅵ）为１００ｍｇ・Ｌ－１时，Ｗｎ－１的还原能力最强，３ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率达５７．３％，与其他处理相比差异显著（Ｐ＜０．０５），其次为Ｗｓ－２和Ｗｓ－１，３ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率分别为４８．９％和４８．４％；其他菌株的还原能力从高至低依次为Ｗｎ－２、Ｔｊ、Ｔｇ。

初始Ｃｒ（Ⅵ）为２００ｍｇ・Ｌ－１时，１ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的Ｗｎ－１转化率最高，达２３．１％，其次为Ｗｓ－２和Ｗｓ－１，转化率分别为１５．６％和１３．６％；３ｄ后的Ｃｒ（Ⅵ）的转化率从高至低依次为Ｗｎ－１、Ｗｓ－２、Ｗｓ－１、Ｗｎ－２、Ｔｊ和Ｔｇ，Ｗｎ－１和Ｗｓ－２与Ｗｓ－１和Ｗｎ－２差异一般显著（Ｐ＜０．１０），与Ｔｊ和Ｔｇ差异显著（Ｐ＜０．０５）。

综合分析以上３个浓度的试验结果，Ｗｎ－１和Ｗｓ－２的还原Ｃｒ（Ⅵ）能力较强，其次为Ｗｓ－１和Ｗｎ－２，而Ｔｊ和Ｔｇ较弱；即从电镀厂污水处理厂污水和活性污泥中分离的菌株Ｃｒ（Ⅵ）还原能力较强，而从电镀厂附近土壤和基地铬污染土壤中分离的菌株的Ｃｒ（Ⅵ）还原能力较差。

同时，随着初始Ｃｒ（Ⅵ）浓度升高，ＳＲＢ的Ｃｒ（Ⅵ）转化率都逐渐下降，但不同菌株下降的幅度不同，说明初始Ｃｒ（Ⅵ）浓度过高会抑制ＳＲＢ的还原Ｃｒ（Ⅵ）能力，但不同菌株抗Ｃｒ（Ⅵ）能力不同。

２．３硫酸盐还原菌修复Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤效果
从表２可知，各处理都具修复Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤的能力，但各处理修复效果不同。

２ｄ后处理Ｄ（Ｗｎ－１＋Ｗｓ－２）的修复效果最好，Ｃｒ（Ⅵ）的转化率达４３．１％，与处理Ｂ（Ｗｎ－１）和Ｃ（Ｗｓ－２）差异一般显著（Ｐ＜０．１０），与处理Ａ（培养基）差异显著（Ｐ＜０．０５），处理Ｂ、处理Ｃ和处理Ａ的Ｃｒ（Ⅵ）转化率分别为３７．１％、３４．２％和１．５％。

７ｄ和１０ｄ后处理Ｄ与处理Ｂ和处理Ｃ的Ｃｒ（Ⅵ）的转化率差异显著（Ｐ＜０．０５），与处理Ａ（对照）差异极显著（Ｐ＜０．０１），１０ｄ后它们的Ｃｒ（Ⅵ）转化率分别为７５．３％、６４．８％、５９．６％和５．９％。

结果表明，菌株Ｗｎ－１和Ｗｓ－２都能很好地修复Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤，而它们
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的混合菌液修复效果更佳，这可能是由于这２株ＳＲＢ之间存在协同作用，提高了还原Ｃｒ（Ⅵ）的能力；说明
Ｗｎ－１、Ｗｓ－２及其混合菌能有效地把污染土壤中Ｃｒ（Ⅵ）转化为Ｃｒ（Ⅲ），以降低土壤中铬的植物有效性和
毒性，为土壤受轻度铬污染的黄桃生产基地安全生产提供一条有效途径。

同时由于土壤中存在具还原Ｃｒ
（Ⅵ）能力的土著微生物，加入培养基能激活它们的活
性，在本试验过程中，它的Ｃｒ（Ⅵ）的转化率逐渐上升，
也是微生物数量和活性逐渐提高的过程。

３结论
（１）筛选获得的６株ＳＲＢ都具有Ｃｒ（Ⅵ）还原能力，但它们的Ｃｒ（Ⅵ）还原能力差异显著。

分别编号为
Ｗｎ－１、Ｗｎ－２、Ｗｓ－１、Ｗｓ－２、Ｔｊ和Ｔｇ。

其中Ｗｎ－１和
Ｗｓ－２的还原能力较强，初始Ｃｒ（Ⅵ）为５０ｍｇ・Ｌ－１时，１
ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率达１００％，其次为Ｗｎ－２和Ｗｓ－１，３ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率也达１００％，而Ｔｇ和Ｔｊ较弱；即电镀厂污水处理厂的活性污泥来源的菌株还原Ｃｒ（Ⅵ）能力最强，其次为某电镀厂污水，而电镀厂附近土
壤和基地土壤的较差。

（２）随着初始Ｃｒ（Ⅵ）浓度升高，ＳＲＢ的Ｃｒ（Ⅵ）转化率都逐渐下降，说明初始Ｃｒ（Ⅵ）浓度过高会抑制它们的还原能力。

（３）菌株Ｗｎ－１、Ｗｓ－２及其混合菌液能有效地把污染土壤中Ｃｒ（Ⅵ）转化为Ｃｒ（Ⅲ），以降低土壤中铬的植物有效性和毒性，而混合菌液转化率效率最高，２ｄ
注：以上数据为３次平均值±标准差；竖排数值具有相同字母表示差异不显著（新复极差法，５％水平；相同初始浓度处理间比较），下同。

表１不同ＳＲＢ的Ｃｒ（Ⅵ）还原效果
Ｔａｂｌｅ１ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｒｅｄｕｃｉｎｇＣｒ（Ⅵ）ｔｏＣｒ（Ⅲ）ｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔＳＲＢ
表２硫酸盐还原菌修复Ｃｒ（Ⅵ）污染土壤效果
Ｔａｂｌｅ２Ｔｈｅｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｈｅｘａｖａｌｅｎｔｃｈｒｏｍｉｕｍ－ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｓｏｉｌｂｙＳＲＢ
吴淑杭等：硫酸盐还原菌修复铬（Ⅵ）污染土壤研究
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后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率为４３．１％，１０ｄ后Ｃｒ（Ⅵ）的转化率达７５．３％；这可能是由于这２株ＳＲＢ之间存在协同作用，提高了还原Ｃｒ（Ⅵ）的能力。

说明ＳＲＢ可为土壤受轻度铬污染的黄桃生产基地安全生产提供一条有效途径。

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