ADAM—15在WHOⅠ级脑膜瘤中的表达及其与侵袭性的相关研究

ADAM—15在WHOⅠ级脑膜瘤中的表达及其与侵袭性的相关研究目的：探究ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤中的表达情况，进一步分析其在

WHOⅠ级脑膜瘤侵袭性生长中的意义。方法：收集63例WHOⅠ级脑膜瘤标本

（33例有侵袭性，30例无侵袭性）为试验组，21例正常脑膜组织为对照组。通过免疫组织化SP法检测去整合素-金属蛋白酶15（A Disintegrin and Metalloproteinase 15，ADAM-15）在上述不同脑膜组织中的表达情况。结果：试验组ADAM-15的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（字2=17.296，P ＜0.001）。侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于非侵袭性组，差异有统计学意义（字2=8.376，P=0.004）。侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（字2=24.661，P＜0.001）。非侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（字2=6.801，P=0.009）。结论：ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤侵袭性生长中起一定作用。

脑膜瘤是颅内常见的良性肿瘤，约占原发于颅内肿瘤的30%[1]。脑膜瘤通常为良性肿瘤，但其具有广泛的临床特征和组织学分类，根据WHO中枢神经系统肿瘤的分类[2]，将脑膜瘤分为三个级别共15个亚型，良性脑膜瘤（WHOⅠ级）复发和侵袭性生长的风险低，非典型脑膜瘤（WHOⅡ级）更可能复发，而间变性（恶性）脑膜瘤（WHOⅢ级）复发的可能性最大和/或具有更强的侵袭性。良性脑膜瘤在组织病理学方面无明显差别，但有一部分良性脑膜瘤细胞表现出向周围组织浸润生长的侵袭性生物行为。脑膜瘤目前的治療手段仍以手术切除为主，虽然良性脑膜瘤理论上手术全切可以治愈，但是部分良性脑膜瘤因其对周围组织的浸润而无法行全切手术，部分脑膜瘤即使手术全切，术后也有一定的复发率。研究良性脑膜瘤侵袭性生长的相关因素，寻找有效的诊断及预测其侵袭性的生物学指标非常重要。去整合素-金属蛋白酶15（A Disintegrin and Metalloproteinase 15，ADAM-15）是一种Zn2+依赖的Ⅰ型多结构域跨膜内肽酶，属于ADAM家族20多个成员中重要的一员[3-4]，活化的ADAM-15参与细胞生长以及细胞外基质（ECM）中Ⅳ型胶原和明胶的蛋白水解[5-6]。ADAM-15参与了人类许多疾病的发展，尤其是在肿瘤的侵袭性生长中起非常重要的作用。本试验通过检测ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤中的表达情况，研讨ADAM-15在WHOⅠ级脑膜瘤侵袭性过程中的作用，为临床提供有价值的WHOⅠ级脑膜瘤侵袭性生长的预测因子，现将研究结果报道如下。1 资料与方法

1.1 一般资料收集佳木斯大学附属第一医院神经外科2012年12月-2016年12月经手术切除（术前均未行放、化疗及免疫治疗，肿瘤切除程度为辛普森Ⅰ～Ⅲ）且临床资料完整的63例经病理证实的WHOⅠ脑膜瘤病理组织标本（根据术中情况及术后病理结果，确定脑膜瘤对周围组织有无侵犯，侵袭性者33例，无侵袭性者30例）为试验组。收集佳木斯大学附属第一医院神经外科2017年1-9月收治的颅脑外伤患者受伤后3 h内行急诊手术，术中内减压废弃的正常脑膜组织21例为对照组。以上患者均需排除伴随重大全身性疾病和其他部位肿瘤者，且手术切除的所有标本均经病理明确诊断。患者均知情同意，该研究已经医院伦理学委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂生工生物工程（上海）股份有限公司的一抗，Anti-ADAM15 antibody，北京中杉金桥生物技术有限公司的二抗PV-8000-1。

1.2.2 免疫组化将标本连续切片、脱蜡、水化，将标本抗原热修复，灭活内源性过氧化物酶，然后滴入一抗，电热恒温干燥箱孵育4 h，经PBS缓冲液冲洗3次后再滴加二抗PV-8000-1，再次孵育30 min，上述步驟间隔均需用PBS缓冲液冲洗，DAB显色约10 min，苏木素复染、脱水、透明，最后封片。

1.3 结果判定由2位副主任级别及以上的病理医师独立审片，记录结果。ADAM-15的阳性表达是胞质出现棕黄色颗粒或团块，切片在高倍显微镜（×400）下观察。分别计算阳性细胞百分比和染色强度，两项结果的乘积作为评分标准。（1）阳性细胞比例：阴性记作0分，阳性细胞百分比≤10%记作1分，11%～50%计作2分，51%～75%记作3分，>75%记作4分；（2）细胞染色强度：无染色记作0分，淡黄色记作1分，棕黄色记作2分，棕褐色记作3分。两项相乘，积分≤3分为阴性（-），4～6分为弱阳性（+）；7～9分为中度阳性（++），10～12分为强阳性（+++）。

1.4 统计学处理运用SPSS 2

2.0 统计软件进行统计学分析，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

ADAM-15的阳性表达是胞质出现棕黄色颗粒或团块。（1）63例良性脑膜瘤病理标本中，39例出现了ADAM-15的阳性表达，阳性率为61.90%（39/63）。（2）33例侵袭性良性脑膜瘤中，26例出现了阳性表达，阳性率为78.79%（26/33），30例无侵袭性良性脑膜瘤中，13例出现了阳性表达，阳性率为43.33%（13/30）。（3）21例正常脑膜组织中，2例中出现ADAM-15弱阳性表达，阳性表达率为9.52%（2/21）。试验组ADAM-15的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（字2=17.296，P＜0.001），见表1。侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于非侵袭性组，差异有统计学意义（字2=8.376，P=0.004），见表2。侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（字2=24.661，P＜0.001）；非侵袭性组ADAM-15的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义（字2=6.801，P=0.009）。ADAM-15在侵袭性良性脑膜瘤、非侵袭性良性脑膜瘤、正常脑膜组织中的阳性表达率依次递增。

3 讨论

ADAM-15参与了人类许多疾病的发展，尤其是在肿瘤的侵袭性生长中起非常重要的作用。ADAM-15的mRNA和/或蛋白水平在多种恶性肿瘤中表达上调，包括乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌和前列腺癌，而且ADAM-15也参与了包括前列腺癌和乳腺癌在内的多种肿瘤的转移性进展[3，5，7]。目前关于ADAM家族成员在脑肿瘤中的研究还局限在胶质瘤中，关于ADAMs在脑膜瘤中的研究国内