第二章_紫外可见分光光度法.
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摩尔吸光系数 吸光系数
百分吸光系数
K值的大小取决于吸光物质的性质、入射 光波长、溶液温度和溶剂性质等，与溶液浓 度大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液
浓度所采用的单位的不同而异。
⑴ 摩尔吸光系数ε
当溶液的浓度以物质的量浓度（mol· L-1）表示，液
层厚度以厘米（cm）表示时，相应的比例常数K称为摩 尔吸光系数。以ε表示，其单位为L· mol-1· cm-1。这样，
（二）偏离Lambert-Beer定律的原因
4. 溶液本身发生化学变化的影响
溶液中待测组分发生了解离、缔合等作用， 造成物质光化学性质改变，偏离了偏离朗伯-比 尔定律。例如，铬酸盐在溶液中有如下平衡： 离解、缔合、异构等 如：Cr2O72-+H2O-=2HCrO4-=2H++2CrO42橙色 黄色 lnm=350nm lnm=375nm Cr2O72-呈橙色，而 CrO42- 呈黄色，二者对 不同波长 的光线的吸收性能完全不同。
（二）偏离Lambert-Beer定律的原因
5. 浓度的限制
朗伯-比尔定律假定物质分子之间不发生相互作 用，因此只有稀溶液时才基本符合。 浓度较高时，物质分子间会互相影响对方的电 荷分布，吸光性能发生改变，必然导致偏离。朗 伯-比尔定律
三 吸光系数
吸光系数K物理意义：液层厚度为1cm的 单位浓度溶液的吸光度，它表示物质对特定 波长光的吸收能力。一个物质在一定条件下 的吸光系数为定值。通常有两种表示方法：
主要内容
§2.1 §2.2 §2.3 §2.1 基本原理 紫外-可见分光光度计 分析条件的选择 紫外-可见分光光度法的应用
§4.1 基本原理
透光率和吸光度 光的吸收定律 偏离朗伯-比尔定律 的因素
基 本 原 理
Lambert-Beer定律 吸光系数
摩尔吸光系数
百分吸光系数
吸收光谱
一、透光率和吸光度
当一束单色光通过均匀的溶液时，光 的一部分被吸收，一部分透过溶液，还有 一部分被器皿表面反射。设入射光强度为 I0,吸收光强度为Ia，透射光强度为It，则：
I0 I a It
1. 透光率
透射光(It)占入射光（I0） 的比例的大小称为透光 率，用T表示：
It T I0
透光率越大，溶液对光的吸收越少； 反之，透光率越小，溶液对光的吸收 越多。
A＝ κ • b • c
适用条件：仅适用于单色光,稀溶液
吸光度的加合性
溶液中含有多种吸光物质时，若吸光物 质之间没有相互作用，则溶液吸光度等于各 吸光物质的吸光度之和。
二、Lambert-Beer定律
（二） 偏离朗伯-比尔定律的因素 根据朗伯比尔定律 A=kbc 过原点的直线。
A 但在实际工 作中，吸光度 与浓度之间的 线性关系常常 发生偏离 c A
的有色化合物进行测定，选择具有最大ε值的波
长作入射光。
（2） 百分吸光系数
一定波长下，吸光物质的溶液浓度为 1g/100ml(1%)，液层厚度为1cm时， 溶液的吸光度。设吸光物质的摩尔质量为 M g/mol ，则：
1mol/L＝M g/1000ml＝M/10· 1g/100ml
吸光度A
表示物质对光的吸收程度。 吸光度A公式：
I0 A lg T lg It
透光率的负对数称为吸光度，用A表示。 A越大，表示物质的吸光能力越强。
二、朗伯--比尔定律 分光光度法定量的依据
（一） 光的吸收定律 当一束平行的单色光通过某一均匀、无散射 的含有吸光物质的溶液时，在入射光的波长、 强度以及溶液的温度等因素保持不变的情况下， 该溶液的吸光度A与溶液的浓度C及溶液的厚度 b的乘积成正比关系，称为朗伯-比尔定律：
“十一五”国家规划教 材
第二章
紫外-可见分光光度法
学习目标
1. 掌握紫外-可见可见分光光度法的原理；
2. 熟悉紫外-可见可见分光光度计的结构及各部 分作用，了解不同类型分光光度计的结构； 3. 了解紫外-可见分光光度法实验条件的选择； 4. 掌握紫外-可见分光光度计的定性定量方法。
补充内容 --- 光的性质
物质对光的选择性吸收
1、单色光：同一波长的光 2、复合光：不同波长组成的光 3 、互补色光 ： 若两种光按适当的强度比 例混合而成白光，则这两种光称为互 补色光
引言：什么是紫外-可见分光光度法？
是根据溶液中物质分子或离子对波长为 200-760nm这一范围的电磁波（紫外和可见 光谱）的吸收特特点建立起来的一种定性、 定量和结构分析方法。
，如固定液层
正偏离
厚度b,以吸光度对浓度作图时，应得到一条通
负偏离
0 c
0
（二）偏离Lambert-Beer定律的原因
1. 非单色光的影响 在紫外-可见分光光度计中，由于仪器性能的 限制，得不到单纯的单色光。 2. 非均相体系的影响 当样品溶液中含有颗粒等悬浮杂质时，样品为 不均匀的体系，光线会出现散射。 3. 非平行入射光引起的偏离
比尔定律可以改写成 A=εbc
物理意义：将样品浓度为1mol· L-1的溶液置于1cm样品 池中在一定波长下测得的吸光度值。
摩尔吸光系数是吸光物质的重要参数之一，
它表示物质对某一特定波长光的吸收能力。ε愈 大，表示该物质对某波长光的吸收能力愈强， 测定的灵敏度也就愈高。因此，测定时，为了 提高分析的灵敏度，通常选择摩尔吸光系数大
那么光的本质是什么？ 光具有波动性，用波长(λ)和频率(ν)表 示；光具有粒子性，用能量(E)表示不同波长 的光具有不同的能量。
既然太阳光可以色散成各种波长的有色光， 但为什么平时我们却看不到有色光？
把适当颜色的两种光按一定强度比例混合能 成为白光，这两种颜色的光称为互补光。太阳 光中各种色光两两互为互补，成为白光，所以 我们看到的太阳光wk.baidu.com无色的。
互补色光示意图
为什么我们看到的物质具有不同的颜色？ 这是因为物质选择性吸收了某种颜色的光， 而呈显出被吸收光的互补光的颜色。
如: CuSO4溶液选择性地吸收白光中间的黄色 光，故CuSO4溶液呈蓝色。 [Fe(SCN)6]3-呈血红色，说明其溶液选择 性地吸收白光中的青色光。 如果溶液不吸收白色光，则溶液表现为 无色透明；如溶液对所有颜色的光全部吸收， 则溶液呈黑色。
百分吸光系数
K值的大小取决于吸光物质的性质、入射 光波长、溶液温度和溶剂性质等，与溶液浓 度大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液
浓度所采用的单位的不同而异。
⑴ 摩尔吸光系数ε
当溶液的浓度以物质的量浓度（mol· L-1）表示，液
层厚度以厘米（cm）表示时，相应的比例常数K称为摩 尔吸光系数。以ε表示，其单位为L· mol-1· cm-1。这样，
（二）偏离Lambert-Beer定律的原因
4. 溶液本身发生化学变化的影响
溶液中待测组分发生了解离、缔合等作用， 造成物质光化学性质改变，偏离了偏离朗伯-比 尔定律。例如，铬酸盐在溶液中有如下平衡： 离解、缔合、异构等 如：Cr2O72-+H2O-=2HCrO4-=2H++2CrO42橙色 黄色 lnm=350nm lnm=375nm Cr2O72-呈橙色，而 CrO42- 呈黄色，二者对 不同波长 的光线的吸收性能完全不同。
（二）偏离Lambert-Beer定律的原因
5. 浓度的限制
朗伯-比尔定律假定物质分子之间不发生相互作 用，因此只有稀溶液时才基本符合。 浓度较高时，物质分子间会互相影响对方的电 荷分布，吸光性能发生改变，必然导致偏离。朗 伯-比尔定律
三 吸光系数
吸光系数K物理意义：液层厚度为1cm的 单位浓度溶液的吸光度，它表示物质对特定 波长光的吸收能力。一个物质在一定条件下 的吸光系数为定值。通常有两种表示方法：
主要内容
§2.1 §2.2 §2.3 §2.1 基本原理 紫外-可见分光光度计 分析条件的选择 紫外-可见分光光度法的应用
§4.1 基本原理
透光率和吸光度 光的吸收定律 偏离朗伯-比尔定律 的因素
基 本 原 理
Lambert-Beer定律 吸光系数
摩尔吸光系数
百分吸光系数
吸收光谱
一、透光率和吸光度
当一束单色光通过均匀的溶液时，光 的一部分被吸收，一部分透过溶液，还有 一部分被器皿表面反射。设入射光强度为 I0,吸收光强度为Ia，透射光强度为It，则：
I0 I a It
1. 透光率
透射光(It)占入射光（I0） 的比例的大小称为透光 率，用T表示：
It T I0
透光率越大，溶液对光的吸收越少； 反之，透光率越小，溶液对光的吸收 越多。
A＝ κ • b • c
适用条件：仅适用于单色光,稀溶液
吸光度的加合性
溶液中含有多种吸光物质时，若吸光物 质之间没有相互作用，则溶液吸光度等于各 吸光物质的吸光度之和。
二、Lambert-Beer定律
（二） 偏离朗伯-比尔定律的因素 根据朗伯比尔定律 A=kbc 过原点的直线。
A 但在实际工 作中，吸光度 与浓度之间的 线性关系常常 发生偏离 c A
的有色化合物进行测定，选择具有最大ε值的波
长作入射光。
（2） 百分吸光系数
一定波长下，吸光物质的溶液浓度为 1g/100ml(1%)，液层厚度为1cm时， 溶液的吸光度。设吸光物质的摩尔质量为 M g/mol ，则：
1mol/L＝M g/1000ml＝M/10· 1g/100ml
吸光度A
表示物质对光的吸收程度。 吸光度A公式：
I0 A lg T lg It
透光率的负对数称为吸光度，用A表示。 A越大，表示物质的吸光能力越强。
二、朗伯--比尔定律 分光光度法定量的依据
（一） 光的吸收定律 当一束平行的单色光通过某一均匀、无散射 的含有吸光物质的溶液时，在入射光的波长、 强度以及溶液的温度等因素保持不变的情况下， 该溶液的吸光度A与溶液的浓度C及溶液的厚度 b的乘积成正比关系，称为朗伯-比尔定律：
“十一五”国家规划教 材
第二章
紫外-可见分光光度法
学习目标
1. 掌握紫外-可见可见分光光度法的原理；
2. 熟悉紫外-可见可见分光光度计的结构及各部 分作用，了解不同类型分光光度计的结构； 3. 了解紫外-可见分光光度法实验条件的选择； 4. 掌握紫外-可见分光光度计的定性定量方法。
补充内容 --- 光的性质
物质对光的选择性吸收
1、单色光：同一波长的光 2、复合光：不同波长组成的光 3 、互补色光 ： 若两种光按适当的强度比 例混合而成白光，则这两种光称为互 补色光
引言：什么是紫外-可见分光光度法？
是根据溶液中物质分子或离子对波长为 200-760nm这一范围的电磁波（紫外和可见 光谱）的吸收特特点建立起来的一种定性、 定量和结构分析方法。
，如固定液层
正偏离
厚度b,以吸光度对浓度作图时，应得到一条通
负偏离
0 c
0
（二）偏离Lambert-Beer定律的原因
1. 非单色光的影响 在紫外-可见分光光度计中，由于仪器性能的 限制，得不到单纯的单色光。 2. 非均相体系的影响 当样品溶液中含有颗粒等悬浮杂质时，样品为 不均匀的体系，光线会出现散射。 3. 非平行入射光引起的偏离
比尔定律可以改写成 A=εbc
物理意义：将样品浓度为1mol· L-1的溶液置于1cm样品 池中在一定波长下测得的吸光度值。
摩尔吸光系数是吸光物质的重要参数之一，
它表示物质对某一特定波长光的吸收能力。ε愈 大，表示该物质对某波长光的吸收能力愈强， 测定的灵敏度也就愈高。因此，测定时，为了 提高分析的灵敏度，通常选择摩尔吸光系数大
那么光的本质是什么？ 光具有波动性，用波长(λ)和频率(ν)表 示；光具有粒子性，用能量(E)表示不同波长 的光具有不同的能量。
既然太阳光可以色散成各种波长的有色光， 但为什么平时我们却看不到有色光？
把适当颜色的两种光按一定强度比例混合能 成为白光，这两种颜色的光称为互补光。太阳 光中各种色光两两互为互补，成为白光，所以 我们看到的太阳光wk.baidu.com无色的。
互补色光示意图
为什么我们看到的物质具有不同的颜色？ 这是因为物质选择性吸收了某种颜色的光， 而呈显出被吸收光的互补光的颜色。
如: CuSO4溶液选择性地吸收白光中间的黄色 光，故CuSO4溶液呈蓝色。 [Fe(SCN)6]3-呈血红色，说明其溶液选择 性地吸收白光中的青色光。 如果溶液不吸收白色光，则溶液表现为 无色透明；如溶液对所有颜色的光全部吸收， 则溶液呈黑色。