沈阳药科大学专业硕士考试(生理实验部分)

沈阳药科大学专业硕士考试（生理实验部分）
考试实验包括6个，分别是：
实验一：肌肉的收缩特征
实验二：红细胞渗透脆性测定
实验三：离体蛙心灌流
实验四：心血管活动的神经—体液调节
实验五：呼吸运动的调节
实验六：离体肠管平滑肌的生理特征
具体实验分诉如下：
实验一肌肉的收缩特征
1 实验目的
学习坐骨神经腓肠肌标本的制作，手术器械和刺激、记录仪器的使用。

观察肌肉收缩的形式及刺激频率与肌肉收缩反应之间的关系。

2 实验原理
当给神经肌肉标本1个阈上刺激时，肌肉即发生1次收缩反应。

用记录仪器扫记收缩过程，可得到1次单收缩曲线。

每个单收缩曲线依次分为3个时期，即潜伏期、收缩期与舒张期。

如相继给两个以上阈刺激，刺激之间的间隔超过1个单收缩的持续时间，则肌肉将出现一连串各自分离的单收缩；若刺激间隔时间比单收缩的持续时间短，则前一个收缩还未结束就开始后一个收缩，这样两次收缩就会重叠起来，这种现象称复合收缩。

如果后一个收缩是在前一个收缩的舒张期内发生，那么各自收缩复合
的结果，就会出现一持续的锯齿状的收缩曲线，这种收缩称为不完全强直收缩。

若刺激之间的间隔时间比单收缩的收缩期短，后一个收缩就在前一个收缩期内发生，结果会出现一持续的收缩曲线，完全看不到舒张期的形迹，这样的持续收缩状态称为完全强直收缩。

3 实验动物
蟾蜍或蛙
4 实验器材
肌槽、万能支台、蛙板、蛙类手术器械、铜锌弓、肌肉张力换能器、RM6240多道生理信号采集处理系统。

5 实验药品
任氏液
6 实验内容
制作坐骨神经腓肠肌标本，观察该肌肉标本收缩的基本形式及刺激频率的变化对肌肉收缩反应的影响。

7 实验项目
（1）找出阈刺激先给标本单个弱刺激，然后逐渐增大刺激强度，直到刚能描记出收缩曲线为止，此时的强度为阈强度。

记录该刺激强度。

低于阈强度的刺激为阈下刺激。

（2）找出最适刺激强度在阈刺激的基础上，继续增加刺激强度，肌肉收缩曲线的幅度也逐渐增大，但当达到一定的刺激强度时，肌肉收缩曲线的幅度便不再随着刺激强度的增大而增高。

刚刚能引起最大收缩反应的刺激强度为最适刺激强度。

记录该刺激强度。

（3）描记单收缩曲线选用最适刺激强度，刺激模式设为单刺激，扫描速度设为1.0s/div，描记单收缩曲线。

（4）描记复合收缩曲线选用最适刺激强度，刺激模式设为连续刺激，刺激频率从0.5Hz开始，依次为0.5Hz、1Hz、2Hz、4Hz、8Hz、16Hz、32Hz……，扫描速度设为1.0s/div。

伴随刺激频率的逐步增加，依次描记出呈锯齿状的不完全强直收缩曲线和平滑的完全强直收缩曲线。

8 注意事项
（1）每项试验结束，等待标本恢复兴奋性后，再进行下一次刺激。

（2）标本剥皮后将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，以免蟾蜍分泌物对神经肌肉标本的兴奋性产生影响。

（3）实验过程中尽量避免用金属器械或手直接接触神经肌肉标本。

（4）实验操作动作轻柔，避免损伤神经肌肉组织。

9 思考题
（1）如何判断制备的神经肌肉标本的兴奋性？
答：阈值越低，兴奋性越高。

（2）剥皮后的神经肌肉标本能用自来水冲洗吗？为什么？
答：不能。

因为自来水中含有某些矿物资和离子等会刺激标本，产生兴奋，会影响实验的准确性，应该用任氏液。

（3）引起肌肉收缩的阈刺激、最适刺激的含义是什么？
答：刚刚能使肌肉产生动作电位的刺激称阈刺激；刚刚能引起最大收缩反应的刺激称最适刺激。

（4）肌肉的收缩形式有几种？各有何特点？
答：5种：单收缩、等张收缩、等长收缩、不完全强直收缩，完全强直收缩。

实验二红细胞渗透脆性测定
1 实验目的
测定动物红细胞的渗透脆性。

2 实验原理
将红细胞置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变；置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。

将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞的最小抵抗力，而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力。

对低渗盐溶液的抵抗力小，表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小。

最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。

3 实验动物
家兔
4 实验器材
试管架、5ml试管10支、2ml吸管2支、注射器
5 实验药品
1%NaCl溶液、蒸馏水、3.8%枸橼酸钠溶液。

6 实验内容
测定家兔的红细胞对低渗溶液的抵抗力。

7 实验项目
观察各试管的透明度以判断是否溶血。

试管内下层为混浊色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏；试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，首先出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵抗力（最大脆性）；试管内溶液呈现透明红色，说明红细胞全部破坏，称为完全溶血，引起完全溶血的最高低渗盐溶液浓度，即红细胞的醉倒抵抗力（最小脆性）。

记录红细胞的脆性范围。

8 注意事项
（1）试管应按编号顺序放置于试管架上，以免顺序颠倒
（2）吸取蒸馏水和1%NaCl溶液时，溶液量要准确。

（3）每支试管内所加血液量应尽可能一致，以保证实验结果的准确。

（4）向试管内轻轻的滴入血液，然后轻轻混匀，不要剧烈振动，防止破坏红细胞，造成假象
（5）观察实验结果时，应以白色为背景，尽量在光线明亮处。

9 思考题
（1）什么是红细胞的渗透脆性？
答：红细胞在低渗溶液中会发生溶胀破裂的性质称红细胞渗透脆性。

（2）测定红细胞渗透脆性时，应注意什么？
答：见8 注意事项
（3）简要说明红细胞渗透脆性试验的意义？
答：了解红细胞的渗透脆性，在临床输液时可作为输液产品的生产标准，防止输液渗透性过高或过低对机体造成伤害。

（4）画出红细胞，巨噬细胞，单核细胞，淋巴细胞的显微结构（2011考研原题）
答：见生理书。

实验三离体蛙心灌流
1 试验目的
了解离子、激素及神经递质对离体心脏活动的调节作用，加深理解内环境的相对稳定对心脏正常活动的重要意义。

2实验原理
心肌细胞生物电活动的基础是钠、钾、钙等离子的跨膜移动，因此细胞外液这些离子浓度的变化将直接影响心肌的活动。

神经、体液因素对心脏活动的调节是通过神经递质或激素与心肌细胞膜上相应的受体结合，引起增强或减弱心脏活动的效应。

离体蛙心灌流即利用离体蛙心在适宜的环境下，仍能保持自动的节律性性活动的特点，体外观察离子、肾上腺素、乙酰胆碱登对心脏活动的影响。

3 实验动物
蟾蜍或蛙
4实验器材
万能支台、蛙心灌流套管、蛙心夹、线、棉球、烧杯、吸管、蛙板、蛙类手术器械、肌肉张力换能器、RM6240多道生理信号采集系统。

5 实验药品
任氏液、1:10000肾上腺素、1:10000普萘洛尔、1:10000乙酰胆碱溶液、1:2000硫酸阿托品溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、0.65%NaCl溶液。

6 实验内容
制备离体蛙心插管标本；观察钾，钠、钙等离子和肾上腺素、乙酰胆碱等对蛙心搏动曲线的影响。

7 实验项目
（1）描记一段正常心搏曲线，观察心脏收缩的振幅及心跳频率。

（2）把蛙心套管中的任氏液全部换成0.65%NaCl溶液，观察心搏曲线的变化。

（3）吸出0.65%NaCl溶液，用新鲜任氏液冲洗3次，加入新的任氏液。

待曲线基本恢复后，向套管内滴入2%CaCl2溶液1~2滴，观察心搏曲线的变化。

（4）吸出含有2%CaCl2溶液，用新鲜任氏液冲洗3次，加入新的任氏液。

待曲线基本恢复后，向套管内滴入1%KCl溶液1~2滴，观察心搏曲线的变化。

（5）同上吸出含KCl溶液，用新鲜任氏液冲洗3次，加入新的任氏液。

待曲线基本恢复后，向套管内滴入1:10000肾上腺素1~2滴，观察心搏曲线的变化。

（6）吸出含有肾上腺素的溶液，用新鲜任氏液冲洗3次，加入新的任氏液。

待曲线基本恢复后，向套管内滴入1:10000普萘洛尔1~2滴，数十秒后，再滴入1:10000肾上腺素1~2滴观察心搏曲线的变化，并与前一项（5）项结果进行比较。

（7）吸出含有药物的任氏液，用新鲜任氏液冲洗3次，加入新的任氏液。

待曲线基本恢复后，向套管内滴入1:10000乙酰胆碱溶液1~2滴，观察心搏曲线的变化。

（8）吸出含有乙酰胆碱的溶液，用新鲜任氏液冲洗3次，加入新的任氏液。

待曲线基本恢复后，向套管内滴入1:2000硫酸阿托品溶液1~2滴，数十秒后，再滴入1:10000乙酰胆碱溶液1~2滴观察心搏曲线的变化，并与前一项（7）项结果进行比较。

8 注意事项
（1）标本制备过程中勿伤及静脉窦，游离蛙心时，要连经脉窦一起取下。

（2）实验过程中蛙心套管中液面应保持恒定，以排除负荷改变对心脏活动的影响。

（3）经常向心脏表面滴加少量任氏液，以免标本干燥。

（4）进行实验项目时，滴加药物后作用不明显时，可适当增加药量；作用明显后应立即用新鲜任氏液换洗，以免心肌受损，心跳难以恢复。

待心脏搏动基本恢复正常后，方能进行下一实验项目。

（5）每种溶液或药物的吸管均应专用，不可混淆，以免干扰实验现象的观察。

9 思考题
（1）判断蛙心套管插入心室腔的标准是什么？
答：若插管已插入心室，插管中的任氏液液面将随着心搏而上下移动。

（2）如何观察正常的蛙心搏动曲线？
答：加入任氏液后观察曲线。

（3）用0.65%NaCl溶液替换任氏液后，心搏曲线如何变化？为什么？
答：同蛙心正常心搏曲线比较发现其心肌收缩力稍有减弱，这是由于室内的NaCl溶液使心肌细胞外液的Ca+2浓度下降，导致心肌细胞浆内的Ca+2浓度下降，心肌细胞收缩力也就减弱，NaCl溶液浓度越大这种收缩力减弱程度也越大。

（4）滴加2%CaCl2溶液后，心搏曲线发生什么变化？机制如何？
答：心肌细胞收缩力显著增强，并且心率变快，这是因为当细胞外液Ca+2浓度显著升高时细胞膜内外Ca+2浓度梯度增大，心率也就增大；另一方面，工作细胞动作电位期间Ca+2内流量加大导致肌浆钙离子浓度增大甚至持续增大，这样钙离子与肌钙蛋白的结合量增多甚至他们只结合不解离，最后心肌收缩力增强或者心肌持续收缩。

（5）滴加1%KCl溶液后，心搏曲线发生什么变化？机制如何？
答：心肌细胞收缩力降低，当细胞外液钾离子浓度轻度升高时，一方面，钾离子抑制
钙离子内流使钙离子内流量减少，这样钙离子的兴奋偶联作用减小心肌收缩力下降；另一方面，膜内外钾离子浓度梯度减小，使心肌细胞膜静息电位绝对值减小，这样静息电位与阈电位水平的电位差减小，心肌细胞膜兴奋性升高，当细胞外液钾离子浓度显著升高时，膜内外钾离子浓度差减小，使静息电位绝对值减小到-55mV，这样钠离子通道失活，心肌细胞兴奋性降低，心肌停搏于舒张状态。

（6）肾上腺素对离体蛙心活动有何影响？机制如何？先加入普萘洛尔后再加入肾上腺素，离体蛙心活动又发生什么变化？机制如何？
答：心肌收缩力显著增强，心率也加快，这是因为肾上腺素主要与心肌的β1受体结合，产生正性变时，变力和变传导效应，引起强心作用。

加入普萘洛尔后再加入肾上腺素，离体蛙心活动没有变化，应为普萘洛尔是肾上腺素的抑制剂。

（7）乙酰胆碱对离体蛙心活动有何影响？为什么？先加入阿托品后再加入乙酰胆碱，离体蛙心活动又发生什么变化？机制如何？
答：心肌收缩力显著减弱，心率也明显减慢，这是因为乙酰胆碱主要与心肌的M2受体结合，产生负性变时，变力和变传导效应。

它能提高膜对钾离子的通透性，促进钾离子外流，使静息电位绝对值增大，心肌兴奋性下降，心率减慢。

实验四心血管活动的神经—体液调节
1 实验目的
学习哺乳动物动脉血压的直接测量方法；以动脉血压为指标，观察整体情况下某些神经-体液因素对心血管活动的调节。

2 实验原理
略
3实验动物
家兔
4实验器材
兔手术台、兔手术器械1套、动脉插管、压力换能器、动脉夹、双凹夹、铁支架、双极保护电机、注射器、丝线、RM6240多道生理信号采集系统。

5实验药品
25%乌拉坦、0.5%肝素、1:10000肾上腺素、1:10000去甲肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、1:2000硫酸阿托品。

6 实验内容
家兔颈动脉血压的测定；以动脉血压为指标，探索夹闭另侧颈总动脉、刺激减压神经、刺激迷走神经及肾上腺素、去甲肾上腺素、乙酰胆碱对心血管活动的影响。

7 实验项目
（1）记录正常血压曲线，待血压平稳后，点击“开始记录”进入记录状态。

（2）夹闭另侧颈总动脉
（3）注射肾上腺素
（4）注射乙酰胆碱
（5）注射去甲肾上腺素
（6）刺激减压神经
（7）刺激迷走神经
8 注意事项
（1）麻醉要缓慢
（2）实验结束后，必须先结扎颈总动脉近心端，再拆除动脉插管。

9 思考题
（1）阻断一侧颈总动脉，血压有何变化？为什么？
答：由于此时颈总动脉窦所感受的机械牵张减小，从而反射性地引起动脉血压升高，加上外周阻力增加以及脑缺血反射等原因，使得动脉血压明显增高。

（2）静脉注射肾上腺素或去甲肾上腺素后，血压有何变化？产生这种变化的机制是什么？
答：肾上腺素与α和β两类肾上腺素能受体的结合作用都较强，能与心肌细胞膜上的β肾上腺素能受体集合后，促使心肌收缩力增强，产生正性变时和力的作用，增强心输出量，收缩压急增加，从而血压急剧升高。

去甲肾上腺素可使全身血管广泛收缩，动脉血压升高，血压升高又使压力感受性反射活动加强，压力感受性反射对心脏的效应超过去甲肾上腺素对心脏的直接效应，故心率减慢。

（3）静脉注射乙酰胆碱后，血压和心率有何变化？给予阿托品后再注射乙酰胆碱，血压和心率是否有变化为什么？
答：作用于M受体，表现为心脏抑制，血管扩张，血压下降。

无变化。

（4）刺激完整的减压神经及其中枢端，血压有何变化？刺激该神经外周端，血压的变化又有何不同？
答：中枢端：血压下降
外周端：无变化
（5）刺激迷走神经外周端引起血压的变化机制如何？
答：心房收缩力减弱，心房肌不应期缩短，方式传导速度减弱。

实验五呼吸运动的调节
1 实验目的
观察某些因素对呼吸运动的影响。

2 实验原理
呼吸运动能够有节律地进行，并能适应机体代谢的需要，是由于呼吸中枢调节的结果。

体内、外各种刺激可以直接作用于与呼吸运动相关的神经中枢，或经不同的感受器反射性地通过膈神经和肋间神经影响呼吸肌，进而引起呼吸运动的改变。

3 实验动物
家兔。

4 实验器材
兔手术器械、兔头固定箱、兔手术台、气管插管、压力换能器、电极、RM6240生理信号采集处理系统。

5 实验药品
生理盐水、25%乌拉坦、CO2气体。

6 实验内容
气管插管，观察某些因素对呼吸运动的影响。

7 观察项目
（1）记录正常呼吸曲线。

（2）缺氧夹闭气管侧管10s松开，观察呼吸取向的变化。

（3）吸入CO2增多将装有CO2的球囊管口接近气管侧管，观察呼吸曲线的变化。

（4）增大无效腔将一段长约50cm的橡皮管与气管插管的侧管相接，观察呼吸曲线的变化。

（5）剪断迷走神经切断单侧迷走神经，观察呼吸曲线的变化。

稍后，切断双侧迷走神经，观察呼吸曲线的变化。

8 注意事项
（1）麻醉药量有个体差异，以具体的麻醉指标判断麻醉药的用量。

（2）钝分离皮下组织和迷走神经，注意避免损伤血管引起大出血。

（3）CO2球囊管口距家兔气管侧管口1cm左右，不可直接吸入。

9 思考题
（1）缺氧对呼吸有何影响？为什么？
答：结果：呼吸加深加快（没有CO2明显）
分析：吸入气体中P O2↓，动脉血P O2↓刺激颈动脉体主动脉体外周化学感受器，作用于延髓呼吸中枢，使呼吸加深加快。

（2）吸入CO2增多时，呼吸运动有何变化？为什么？
答：结果：呼吸加深加快
分析：吸入气体中P CO2增加，动脉血压P CO2增加，CO2通过血脑屏障进入脑脊液溶于水，在碳酸酐酶的作用下分解为HCO3-，H+。

H+刺激中枢化学感受器作用于延髓呼吸中枢使呼吸加深加快，同时，P CO2↑刺激主动脉体颈动脉体外周化学感受器作用于延髓呼吸中枢，使得呼吸加深加快。

（3）增加无效腔时，呼吸运动有何变化？为什么？
答：结果：呼吸加深加快
分析：（1）（2）分析之和
（4）切断单、双侧迷走神经后，呼吸运动有何变化？为什么？
答：单侧，无变化
双侧，呼吸变深变慢分析：切断迷走神经后，中断了肺牵张反射的传入通路，肺牵张反射的生理作用被消除，呼吸运动深慢。

实验六离体肠管平滑肌的生理特征
1 实验目的
学习哺乳动物离体器官的实验方法，观察哺乳动物消化道平滑肌的一般生理特性。

2 实验原理
哺乳动物消化道平滑肌具有收缩性、缓慢而不规则的自动节律性、伸展性和对化学、温度及机械牵张刺激较为敏感的生理特性。

3 实验动物
家兔。

4 实验器材
恒温水浴槽、麦氏浴管、吊瓶、W形排气管、氧气瓶、培养皿、注射器、RM6240多道生理信号采集处理系统、张力换能器、针线。

5 实验药品
台氏液、1:1000肾上腺素、1:100000乙酰胆碱。

6 实验内容
制备离体肠管平滑肌标本，观察哺乳动物肠管平滑肌的一般生理特性。

7 实验项目
（1）经W形管将氧气通入麦氏浴管的台氏液中，记录肠管在280C台氏液中的活动情况。

（2）温度的影响调节水域草的温度到380C，记录肠段由28~380C升温过程中的活动变化，温度每升高20C，记录一段肠管的活动情况。

（3）滴加肾上腺素待台氏液温度稳定于380C后，抽取1:1000肾上腺素0.1ml，直接滴加于麦氏浴管的台氏液中（不要碰在管壁上），观察肠管活动变化。

作用出现后，放掉浴管中台氏液，更换浴管中的台氏液，冲洗3~4次。

（4）滴加乙酰胆碱待肠段恢复正常活动后，抽取1:10000乙酰胆碱0.1ml，同理，记录肠段收缩曲线的变化。

8 注意事项
（1）吊瓶内的台氏液需预热至380C后再进入麦氏浴管内。

（2）麦氏浴管内台氏液的量必须没过肠段，考察药物作用时保持麦氏浴管恒温为380C，以免影响肠管平滑肌的收缩功能以及对药物反应的不稳定性。

（3）以各药液加入的量为参考数据，效果不明显可补加，但不可一次过多，以免引起不可逆反应。

（4）出现药物作用后，立即更换麦氏浴管内的台氏液，待肠管恢复正常运动后再观察下一项目。

9 思考题
（1）哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态需具备哪些基本灌流条件？
答：温度，氧气，营养液
（2）当浴管内台氏液温度从280C升至380C时，肠管活动有什么变化？为什么？答：活动减弱
（3）滴加肾上腺素后，肠管活动会出现什么变化？为什么？
答：减弱
（4）向浴管内浴液滴加乙酰胆碱后，肠管活动有什么变化？为什么？
答：加强。