银耳多糖的提取工艺

银耳多糖的提取工艺

一、实验目的

1、了解银耳多糖制备的基本原理。

2、掌握糖类物质提取的基本操作技术。

二、实验原理

银耳是真菌的一种，是我国传统的珍贵药材之一，具有滋阴润肺、益胃生津等功效。常用于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症。

银耳多糖是银耳的主要药效成分，银耳中含有的多糖类物质则具有明显提高机体免疫功能，抗炎症和抗放射等作用。

1、制备（提取）原理：银耳多糖易溶于水，但不溶于乙醇。因此本实验采用沸水抽提、氯仿-正丁醇法除蛋白和乙醇沉淀分离制得银耳多糖粗品。然后再进行定性分析。

2、分析（鉴定）原理：

Molish反应

多糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下，脱水形成糠醛及其衍生物，其与α-萘酚反应，作用生成紫色的化合物。原理是羰基与酚类进行了缩合，这样，糖与浓酸作用后，再与α-萘酚反应，就能生成紫色的化合物。因此，阴性反应证明没有糖类物质的存在；而阳性反应，则说明有糖存在的可能性，需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有无糖的存在。

斐林试剂

质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的氢氧化铜沉淀。氢氧化铜与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。

三、实验试剂和器材

1、银耳子实体

2、乙醇

3、乙醚

4、丙酮

5、Ssvag试剂：氯仿：正丁醇=

6、Molish试剂：取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL，临用前配置，棕色瓶保存。

7、斐林试剂：甲液质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液；乙液质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液；临用时临时配置，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。

四、仪器和器材

烧杯试管分液漏斗容量瓶电炉石棉网纱布离心机真空干燥箱电子天平

五、实验步骤

1、制备步骤

（1）取银耳子实体10g加水300mL，直火提取1h，提取过程中不断用玻棒搅拌。双层纱布过滤，提取液浓缩至100mL左右。

（2）浓缩液加入等体积的Sevag试剂去蛋白，3000rpm离心10min。

（3）上清液加入3倍95%乙醇，搅拌均匀后，3000rpm离心10min（或静止1h）。（4）沉淀用无水乙醇洗涤2次，乙醚洗涤1次，真空干燥，得因而多糖粗品。

2、分析步骤

（1）称取银耳多糖粗品20mg，加水溶解并定容至100mL，作为样品制备溶液

供试。

（2）Molish反应

取试管，加入多糖溶液1mL，然后加入两滴Molish试剂，摇匀。倾斜试管，沿管壁小心加入约1mL浓硫酸，切勿摇动，小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。用水代替糖溶液，重复一遍，观察结果。

（3）斐林试剂

取试管，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中。摇匀后，分别加入4滴待测糖溶液，置于沸水浴中加热2～3min，取出冷却，观察沉淀和颜色变化。

制药1201班

戴开武