厚血膜中疟原虫形态
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厚薄血膜中四种人体疟原虫鉴别
（吉氏染色剂染色）
（吉氏染色剂染色）
疟原虫在人体内的发育场所依次为肝细胞内及红细胞内，现以间日疟原虫为例，描述如下：1．早期滋养体（环状体）
胞质纤细呈环状，中间为一空泡，核位于一侧，形似戒指状，故称环状体。
红细胞为正常大小。
2．晚期滋养体（大滋养体）
虫体明显增大，胞质增多，并伸出不规则伪足。
虫体胞质中出现细小杆的疟色素。
被寄生的红细胞胀大，颜色变浅，开始出现被染成红色的小点-薛氏点。
3．裂殖体
（1）未成熟的裂殖体
虫体逐渐变圆，空泡消失，核开始分裂，细胞质未分裂，疟色素分散。
红细胞胀大色浅，有薛氏点。
（2）成熟裂殖体
核分裂到12～24个时，胞质也随之分裂，一团细胞质包绕一个核，形成12～24个椭圆形的裂殖子，疟色素集中成堆，虫体充满胀大的红细胞，胞浆出现红染的薛氏点。
4．配子体
配子体呈圆形或椭圆形，胞质无空泡，内有均匀散在的疟色素。
雌配子体：核小，较致密，深红色，常位于虫体的一侧，胞质深蓝色。
雄配子体：核大而疏松，淡红色，位于虫体中央，胞质浅蓝略带红色。
（吉氏染色剂染色）
（吉氏染色剂染色）
（吉氏染色剂染色）。
厚、薄血膜法查疟原虫
厚、薄血膜法查疟原虫基本原理：疟原虫寄生于红细胞，经制片、染色后，显微镜下可以鉴别疟原虫的虫种和虫期。
试剂器材：75%酒精棉球、采血针、载玻片、甲醇、pH7.0~7.2 PBS缓冲液、姬氏染液（或瑞氏染液）、显微镜等。
操作方法：(1)采血：①采血时间在普查时，一般无法考虑采血时间。
在临床上，对现症病人一般可随时采血，但为了提高检出率，就应当考虑采血的适当时间。
对典型发作的间日疟及三日疟患者，应选择发作后数小时至10余小时采血为好。
此时疟原虫发育至环状体乃至大滋养体，虫体大，疟色素已形成，受染红细胞也出现变化，有利于疟原虫的检出。
恶性疟原虫大滋养体和裂殖体是在皮下、脂肪和内脏微血管中发育的，通常在外周血液中不易查到，配子体在环状体出现1周后方能见于外周血液，故在发作时采血。
②采血部位从患者耳垂或指尖（以左手无名指为宜）取血，婴儿通常从大姆趾第二趾骨腹面针刺采血。
③采血方法用75%乙醇棉球消毒取血部位皮肤，待干后用左手拇指和食指捏住采血部位，右手持针迅速刺入皮肤，待血液流出或轻轻挤出血滴，供制作涂片用，采血完毕用干棉球轻压伤口止血。
(2)制片：①薄血膜的制作取1滴血于1张洁净的载玻片上，选1张边缘平整、光滑的载玻片作推片，用左手拇指和中指夹持其两端，将推片的边缘中点与血滴接触，并与载玻片呈30o~45o夹角，待血滴沿推片边缘向两侧展开后，立即由右向左迅速推成薄血膜。
理想的薄血膜要求红细胞均匀地铺成一层，无裂痕，其末端凸出呈舌尖形。
注意：推片时用力和速度要均匀，不能中途停顿或重复推片，以免造成血膜断裂或厚薄不匀。
如取血量多，夹角宜小；取血量小，则夹角可大些。
②厚血膜的制作用推片的一角接触刺血点上的血滴，取血2滴，置载玻片上，并从里向外作旋转涂布，使成直径为0.8cm大小的圆形血膜，厚薄要均匀，然后平置桌上，待自然干燥。
人体疟原虫红内期形态
人体疟原虫红内期形态涂制于玻片上的红内期疟原虫，经吉氏染色后核呈红色，胞质呈蓝色，疟色素呈黄褐色或深褐色，不着色部分为空泡。
一、薄血膜中疟原虫形态薄血膜涂制均匀时疟原虫着色良好，结构清晰，便于观察形态和鉴别虫种。
薄血膜上各期红内期疟原虫的形态见表1。
表1 薄血膜4种疟原虫形态(吉氏染剂染色)间日疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫被寄生红细胞大小形状颜色斑点胀大褪色薛氏点，红色，细小数多正常正常或稍紫茂氏点，红色，粗大数少正常或缩小正常齐氏点淡红色，微细正常或稍胀大卵圆形或边缘呈伞矢状褪色薛氏点，粗大数多早期滋养体(环状体)大小核胞质色素较大，约占红细胞直径的1/31个较薄无较小，约占红细胞直径的1/61或2个纤细无中等1个较粗厚偶见细小褐色颗粒中等1个较粗厚无大滋养体大小核胞质色素较大1个阿米巴样，常含空泡黄褐色，细小，杆状，散在分布较小1或2个圆形，空泡不显著黄褐色，细小，结成团块后，呈黑褐色较小1个带状，空泡不显著深褐色，粗大，沿边缘分布较小1个圆形，空泡不显著棕黄色，较粗大未成熟裂殖体大小核胞质色素较大2个以上圆形或不规则，空泡消失黄褐色，分布不匀较小2个以上圆形，空泡消失黑褐色团块状较小2个以上圆形，空泡消失深褐色，分布不匀较小2个以上圆形或卵圆形，空泡消失棕黄色，分布不匀成熟裂殖体大小裂殖子色素大于正常红细胞12～24个，常为16～18个，排列不规则，较大黄褐色，常聚集一侧小于正常红细胞8～32个，常为8～18个，排列不规则，较小黑褐色团块小于正常红细胞6～12个，常为8个，常排列如菊花状，较大深褐色，常聚集中央小于正常红细胞6～12个，常为8个，排列不规则，较大棕黄色，聚集中央或一侧雌配子体大小形状核胞质色素大于正常红细胞圆形1个，较小，致密，深红色，位于一侧深蓝色黄褐色，均匀散在较大新月形，两端尖锐1个，较小，深红色，位于中央深蓝色黑褐色，紧密分布于核周围小于正常红细胞圆形1个，较小，深红色，位于一侧深蓝色深褐色，均匀散在小于正常红细胞圆形1个，较小，深红色，位于一侧深蓝色棕黄色，散在雄配子体大小形状核胞质色素大于正常红细胞圆形1个，较大，疏松，淡红色，位于中央浅蓝色黄褐色，均匀散在较大腊肠形，两端钝圆1个，较大，淡红色，位于中央浅蓝色或淡红色黑褐色，松散分布于核周围小于正常红细胞圆形1个，较大，淡红色，位于中央浅蓝色深褐色，均匀散在小于正常红细胞圆形1个，较大，淡红色，位于中央浅蓝色棕黄色，散在有时大滋养体与即将要成熟的雌配子体形态相似，对两者的鉴别见表2。
疟原虫形态特征
恶性疟
虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色 体小，圆形；空泡小；早期疟色素细小，金黄
素细小，黄褐色
色，晚期结成块状，黄褐色
裂殖体前期
间日疟
恶性疟
圆形或不规则，核分裂为2个以上，空泡消失； 圆形，核分裂为2个以上；疟色素集成团块 疟色素分布不匀
裂殖体
间日疟
恶性疟
大于正常红细胞，裂殖子12-24个，通常16－18 小于正常红细胞；裂殖子较小，8～26个，通常8、 个，排列不规则，疟色素常集于一侧，黄褐色 18个，排列不规则，疟色素成团块状，黑褐色
镜检疟原虫本卷须知
应掌握疟原虫的各个发育阶段的根本特点，比较厚薄血膜中疟原虫形态的变化规律，注意识别 不典型疟原虫，先看薄血膜，后定位到看后血膜。
镜检时，用油镜〔100×)配合低倍目镜〔5－6×〕镜检，当发现疑难问题时，可调换10×目镜 进展观察。
镜检疟原虫本卷须知
镜检时应从厚血膜上方开场，从上而下，从左到右，再由右到左，往返一行接一行，一个视野 接一个视野看完好个血膜。
状；
间日疟大滋养体
间日疟原虫呈阿米巴样，胞浆常断裂成几块或缩成圆形，色深，有的核和疟色素包裹在胞浆之 中只隐约可见红色的核和黄绿色疟色素，色素分布不均。
间日疟裂殖体 核2个以上，一般12－24个，除虫体略为缩小且着色较深外，均与薄血膜的相似。
间日疟配子体
除虫体略为缩小且着色较深外，均与薄血膜的相似。一般虫体较大，圆形，色素粗大，大配子 核小，偏与一侧，胞浆深兰色。小配子核大，居中，胞浆浅兰色。
谢谢观赏！
2020/11Leabharlann 528恶性疟配子体
恶性疟原虫大配子体为新月形，小配子体为腊肠形。核居中，疟色素围在核周，外为一圈胞浆。 此外，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和疟色素，或核和胞浆均消失，只留下 一些疟色素
疟原虫形态
大配子体与大滋养体区别
虫体大小:几乎充满被寄生的红细 胞 核:一个，较大且致密，周围有 一圈空白的不染色带 胞浆:边缘清楚，不含空泡 疟色素:颗粒较多较粗，均匀散 在 虫体大小:不超过被寄生红细 胞的3/4 核:一个，延长呈带状，周围 无明显的不染色带 浆:边缘不整齐，多有空泡 疟色素:颗粒较少较细，分布
薄血膜中裂殖体前期形态特征
间日疟原虫裂殖体前 期 圆形或不规则；核分 裂为2个以上，空泡 消失；疟色素分布不 匀 恶性疟原虫裂殖体前 期 圆形，核分裂为2个 以上；疟色素集成团 快
薄血膜疟原虫形态
间日疟成熟裂殖体 红细胞：胀大，褪色，可见薛氏 小点。 大小： 个体较大。 胞浆和核：裂殖子12~24个平均 16个，排列不规则， 核红色，胞浆浅兰色。 色素： 黄褐色常集于疟原虫的一 边。
薄血膜疟原虫形态
恶性疟大（雌）配子体 形状大小：新月形，两端稍尖。 胞浆： 深兰色。 核： 一个，较小，致密， 深红色位于中央， 核周可见透明不染 色带。 色素： 黑褐色，密布于核 的周围
薄血膜疟原虫形态
恶性疟小（雄）配子体 形状大小：腊肠形，两端钝圆。 胞浆： 浅兰色或淡紫红色。 核： 一个，较大，疏松， 位于中央，浅红色， 核周可见不染色带。 色素： 黑褐色，疏松地分 布于核周围。
不均匀
二、厚血膜中疟原虫的形态
厚血膜用血量多，血膜小，细胞重迭， 干燥缓慢，以致虫体皱缩，形态有所改 变。相对薄血膜而言不易漏诊，适用于 普查。
厚血膜中常见的血液成分
中性球
酸性球
中性球
大单核球 淋巴球 血小板
厚血膜中疟原虫的形态
厚血膜由于用血量较多， 涂制的血膜小，红细胞 重叠且干燥慢，致使虫 体皱缩，空泡消失，胞 浆变形，其形态改变的 程度与疟原虫运动的强 弱、空泡有无和大小有 关。各期疟原虫在发育 中，大小滋养体明显的 阿米巴样运动，其他期 仅有轻微运动；大、小 滋养体含明显空泡，裂 殖前期的空泡不明显或 消失，成熟裂殖体和配 子体均无空泡 。
疟原虫形态特征
疟原虫与其它物体的鉴别
灰尘和染色液的色素沉着误认为疟色素：可依据颗粒性状、大小、色泽、有无核与胞浆的结构 来鉴别。也可转动微调，看是否在一个平面，不在一个平面一般不是疟原虫。
细菌：很相疟原虫的核，但球菌形体较大，边缘光滑，与红细胞不在一个平面。
疟原虫与其它物体的鉴别
水中原虫：可看到核、胞浆和空泡，似间日疟原虫大滋养体，但无疟色素，而空泡多如网眼即 可区别。
恶性疟配子体
恶性疟原虫大配子体为新月形，小配子体为腊肠形。核居中，疟色素围在核周，外为一圈胞浆。 此外，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和疟色素，或核和胞浆均消失，只留下 一些疟色素
疟色素
间日疟色素为黄褐色，细小，杆状或结成粗大颗粒，分布不均。 恶性疟的色素为金黄色，颗粒细小，结成块后呈黑褐色，配子体色素粗大，分别核周。 疟色素与原虫在一水平面上；有立体感；色泽特殊，只有单色；
谢谢大家！
谢谢！
雌配子体
间日疟
恶性疟
大于正常红细胞，圆形；核小．致密，探红色， 新月形，两端较尖；核小，致密，深红色，位于
偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在
中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周
雄配子体 间日疟
恶性疟
大于正常虹细胞，圆形；核大，疏松，浅红色， 腊肠形，两端钝圆，核大，疏松，淡红色，位于 多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在 中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周
大滋养体: T
三日疟：P.m
裂殖体：S
蛋形疟：P.o
配子体：G
疟原虫与其它物体的鉴别
白细胞残核和幼稚红细胞残核：白细胞破裂散出的颗粒，易误诊为环状体的核，但看不到胞浆。 白细胞残核和幼稚红细胞残核为兰色，与疟原虫胞浆相似，与其它红的或血小板巧合在一起，
疟原虫的镜检技术--2012年
染液的染色原理
红细胞和疟原虫的蛋白质均由氨基酸组 成，每个氨基酸电离出一个带正电荷的-NH3+ 和一个带负电荷的-COO-。碱性染料美蓝的有 色基团带阳离子，可与细胞中带负电荷的COO- 部分结合，使之成为蓝色。疟原虫、淋 巴细胞和大单核细胞的胞浆、嗜碱性粒细胞 的颗粒等酸性蛋白质，被染成蓝色。 酸性染料伊红的有色基团带阴离子，可 与细胞中带正电荷的-NH3+ 部分结合，使之呈 红色；美蓝与伊红都不能使疟原虫和白细胞 的核着色，但美蓝氧化后产生的天青有媒染 作用，在媒染物与染料的共同作用下，疟原 虫和白细胞核被染成紫红色。
用水应选择pH6.8-7.2清洁水，通常使用新鲜的蒸馏水 或过滤的冷开水。
• （6）染色用水 染液的稀释用水和染色后冲洗
• （7）冲洗方法
应沿玻片或染色缸边缘加水使 染液表面一层溢出，并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒 沾污血膜。
血片制作与染色注意事项
●使用前载玻片一定要清洁，否则会影 响血片制作和镜检结果。 ●厚血膜干燥时勿加热，加热会使原虫 变形，影响镜检结果。 ●配置母液时过滤可除去杂质颗粒，有 助于提高镜检质量。
1.载玻片：新玻片浸入有液态洗涤剂的清水中10-20分钟，
2. 采血针：一次性 3.玻片盒：防止污染和昆虫吸食血膜 4.75%酒精棉球：采血前后消毒 5.记号笔：玻片上书写号码
血膜的制作（取血时间）
• 采血时间 现症病人和流调普查时可不考虑取血时机，但在诊断 或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。 • 疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗 期和间歇期五期。 • 间日疟在前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜 检多为阴性；发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体胀破红细 胞期，镜检多见裂殖体和环状体；发热期外周血中以环状体（小 滋养体）为主；出汗期因原虫密度太低，镜检多为阴性；发作后 数小时（h），间歇期外周血中以大滋养体为主，形态较易辩认， 为诊断的有利时机。发作36-48h，可检出裂殖体；发作1-2次后， 配子体出现较多。 • 恶性疟较理想的取血时间是在发作后20h内取血，初发患者退热 后常查不到原虫。
疟原虫形态鉴别
1. 寄生的红细胞正常或缩小，有淡红色细小 的齐氏点（Ziemann’s）； 2.环状体中等大小，核较大，胞浆粗厚； 3.滋养体胞浆常呈带状，核呈条状，疟色素深 褐色，粗大常沿边缘分布； 4.裂殖体小于正常红细胞，核6～12个，常排 列成菊花状，疟色素常聚集于中央； 5.雌雄配子体小于正常红细胞，色素呈深褐色； 6.常可查见各阶段的疟原虫。
雌配子体
雄配子体
恶性疟原虫雌配子体
新月形，两端较尖 核致密，深红色， 常位于中央 疟色素黑褐色，分 布于核周围
恶性疟原虫雄配子体
腊肠形，两端钝圆 胞质色蓝而略带红 核疏松，淡红色，位于 中央 疟色素黑褐色，小杆状， 在核周围较多
厚血膜上四种疟原虫的形态
间日疟原虫 恶性疟原虫
厚血膜中四种人体疟原虫从主要鉴别要点
间日疟原虫 恶性疟原虫 三日疟原虫 卵形疟原虫
环状体
核较大，胞浆粗厚，常 有伪 虫体较大，胞浆呈阿米 巴运动，有薛氏点
核较小，常见2个核， 胞浆纤细 在末稍血不常见，虫体 呈不规整圆形，有黑色 疟色素团块
核粗大，胞浆常缩 成圆形，拥抱于核 周 虫体常呈带状，胞 浆蓝色深，疟色素 较多
⑵大滋养体(big trophozoite)
Pv大滋养体与成熟裂殖体
间日疟裂殖体
2.1
经40小时晚期滋养体发育成熟，虫 体变圆，空泡消失 核开始分裂又称裂殖体前期 未成熟裂殖体 （immature schizont） 色素聚集成团块
成熟裂殖体约有12－24个 细胞核 胞浆也随之分裂 受染RBC 胀大、颜色苍白、虫体几乎 充满红细胞
卵形疟原虫的主要形态特征
1. 寄生的红细胞正常或稍胀大，可呈卵圆形或边 缘呈锯齿（伞矢）状，薛氏点出现较早粗大，量多； 2. 环状体中等大小，核较大，胞浆粗厚； 3. 滋养体胞浆常呈圆形，空泡不明显，疟色素棕 黄色，粗大常沿边缘分布； 4. 裂殖体小于正常红细胞，核6～12个，常排列 不规则，疟色素常散在。 5. 雌雄配子体小于正常红细胞，色素呈深褐色； 6. 常可查见各阶段的疟原虫。
疟原虫的形态鉴别
间日疟原虫雌配子体 小于正常红细胞， 小于正常红细胞，圆 形；核小，致密，深 核小，致密， 红色，偏于一侧， 红色，偏于一侧，胞 浆深蓝色； 浆深蓝色；疟色素散 在 恶性疟原虫雌配子体 新月型，两端较尖； 新月型，两端较尖； 核小，致密，深红色， 核小，致密，深红色， 位于中央； 位于中央；胞浆深蓝 色；疟色素块围于核 周
间日疟原虫裂殖体 大于正常红细胞； 大于正常红细胞；裂 殖子12~24个，通 殖子 个 常16个，排列不规 个 则；疟色素常集于一 侧，黄褐色 恶性疟原虫裂殖体 小于正常红细胞； 小于正常红细胞；裂 殖子较小， 殖子较小，8~36个， 个 排列不规则； 排列不规则；疟色素 成团状， 成团状，黑褐色
薄血膜中大（ 薄血膜中大（雌）配子体 形态特征
人 体 疟原虫的基本结构
2. 核 即细胞核或染色质粒。 即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈鲜红 呈圆形或不规则，结构致密， 色，呈圆形或不规则，结构致密，在个别发育阶 段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。 段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。 3. 疟色素 间日疟原虫的色素颗 粒呈短棒状，黄褐色； 粒呈短棒状，黄褐色； 恶性疟原虫的色素颗 粒呈细砂状，黑褐色。 粒呈细砂状，黑褐色。
大滋养体
厚血膜裂殖体形态
间日疟原虫、 裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体 前期及成熟殖体，除虫体略为缩小， 前期及成熟殖体，除虫体略为缩小，着色 较深外，均与薄血膜相似。 较深外，均与薄血膜相似。
恶性疟裂殖体
厚血间日疟配子体形态
间日疟原虫的配子 体除虫体略缩小且 着色深外， 着色深外，均与薄 血膜相似。 血膜相似。
雌配子体 新月形， 新月形，两端较尖 致密，深红色，常位于边缘 致密，深红色， 黑褐色，分布于核周围 黑褐色，
间日疟原虫裂殖体 大于正常红细胞； 大于正常红细胞；裂 殖子12~24个，通 殖子 个 常16个，排列不规 个 则；疟色素常集于一 侧，黄褐色 恶性疟原虫裂殖体 小于正常红细胞； 小于正常红细胞；裂 殖子较小， 殖子较小，8~36个， 个 排列不规则； 排列不规则；疟色素 成团状， 成团状，黑褐色
薄血膜中大（ 薄血膜中大（雌）配子体 形态特征
人 体 疟原虫的基本结构
2. 核 即细胞核或染色质粒。 即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈鲜红 呈圆形或不规则，结构致密， 色，呈圆形或不规则，结构致密，在个别发育阶 段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。 段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。 3. 疟色素 间日疟原虫的色素颗 粒呈短棒状，黄褐色； 粒呈短棒状，黄褐色； 恶性疟原虫的色素颗 粒呈细砂状，黑褐色。 粒呈细砂状，黑褐色。
大滋养体
厚血膜裂殖体形态
间日疟原虫、 裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体 前期及成熟殖体，除虫体略为缩小， 前期及成熟殖体，除虫体略为缩小，着色 较深外，均与薄血膜相似。 较深外，均与薄血膜相似。
恶性疟裂殖体
厚血间日疟配子体形态
间日疟原虫的配子 体除虫体略缩小且 着色深外， 着色深外，均与薄 血膜相似。 血膜相似。
雌配子体 新月形， 新月形，两端较尖 致密，深红色，常位于边缘 致密，深红色， 黑褐色，分布于核周围 黑褐色，
厚血膜中疟原虫的形态
大滋养体
厚血膜恶性疟大滋养 体形态
恶性疟原虫大滋
养体，与薄血膜
形态相似，常呈
大滋养体
圆形，体小结实，
疟色素细小，金
黄色，结成块状
后，呈黑褐色。
厚血膜裂殖体 形态
裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前 期及成熟殖体，除虫体略为缩小着色较深外， 均与薄血膜相似。
厚血间日疟配子体 形态
.间日疟原虫的配子体 呈圆形或卵圆形，除虫 体略缩小且着色深外， 均与薄血膜相似。间日 疟雄配子体，核大，疏 松，圆形或呈星状，胞 浆较少，着色淡，疟色 素颗粒大，数量较多， 散在分布。雌配子体与 圆形成熟的大滋养体相 似，但配子体疟色素颗 粒粗大，多而散在分布。
厚血膜中疟原虫的形态
因此，在厚血膜中，各 期疟原虫的体积都略为 缩小，其中只有大、小 滋养体的形态有较大改 变，而裂殖体和配子体 的形态则无明显变化。
厚血膜小滋养体 形态
小滋养体 胞浆呈环状或
向核的一侧或两侧收缩， 使环的中间断裂，或围 绕核。间日疟原虫的环 较大，常呈分号“；” 和感叹号“！”状；而 恶性疟原虫的环纤细， 常呈分号“：”、飞鸟 “⌒.⌒”、V状和断环状。
薄厚血膜的优缺点及其适用范围
厚血膜
用血量约为10μl～20μl。涂制成直径 1cm的厚血膜由于在制备过程中红细胞已溶解， 疟原虫在形态上仍可分辨，但由于厚血膜与薄 血膜相比血量大，须查范围小，节省时间，阳 性检出率较高。厚血膜能查出疟原虫数是薄血 膜的15～25倍。所以，疟疾诊断应以检查厚 血膜为主。在普查时均应查完整个厚血膜，未 查见疟原虫则判为阴性。
厚血膜恶性疟配子体 形态
恶性疟原虫的配子体呈新 月形或腊肠形，如血膜干 燥较慢，则可缩成圆形， 核居中，疟色素围在核周， 外围一圈胞浆。此外，还 可见配子体的胞浆部分或 全部消失，ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ留下核和疟 色素，或核和胞浆均消失， 只留下一些疟色素。
间日疟原虫与恶性疟原虫形态的区别
胞 浆：深蓝色。
核：
一个，较小，深红色常
偏于一边，核周可见
明显不染色带。
色 素：黄褐色，均匀散在，数
目较多。
间日疟原虫形态
间日疟小（雄）配子体
形状大小：圆形，虫体较大。
胞 浆：浅蓝色。
核：
一个，较大，疏松，
位于中央，浅红色，
周围有明显不着色带。
色 素：黄褐色，散在分布。
薄血膜疟原虫形态
恶性疟大（雌）配子体
有18～36个裂殖子
核粗大，胞浆常缩 成圆形，拥抱于核 周
与三日疟相似
虫体常呈带状，胞 浆蓝色深，疟色素 较多
虫体呈边缘锯齿状 的圆形
有6～12个裂殖子， 有6～16个裂殖子 排列呈菊花状
配子体
雌性核偏于一侧，致密， 雌性呈新月形，雄性呈 与间日疟相似 雄性位于中央，疏松 腊肠形
与间日疟相似
疟色素 黄绿色，短杆状
疟 色 素 : 颗粒较多较粗，均匀散在
虫体大小:不超过被寄生红细胞3/4
核:
一个，延长呈带状，周围
无明显的不染色带
浆:
边缘不整齐，多有空泡
疟 色 素:颗粒较少较细，分布不均
匀
疟原虫厚血膜镜检的主要形态变异
1. 寄生的红细胞 经染色后，因细胞内血红蛋白溶解，轮 廓消失，但有时尚留下残骸的“影子”或点彩。
形状大小：新月形，两端稍尖。
胞 浆：深蓝色。
核：
一个，较小，致密，
深红色位于中央，
核周可见透明不染
色带。
色 素：黑褐色，密布于核
的周围
薄血膜疟原虫形态
恶性疟小（雄）配子体
形状大小: 腊肠形，两端钝圆。
胞 浆: 浅蓝色或淡紫红色。
疟原虫的镜检技术
注意：吸取母液时，不要晃动瓶子,以免沉淀物泛起影响染色效果.
单张血片染色：将处理好的血膜，加姬氏母液1-2滴，加中性蒸馏水15-30滴，染色30分钟左右，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。
较理想的染色结果是红细胞为淡红或淡紫红色，疟原虫的胞质呈蓝色，核为紫红色，疟色素为棕褐色。
姬氏染液的染色方法
单击此处添加文本具体内容，简明扼要地阐述你的观点
202X
疟原虫的镜检技术
采血时间 现症病人和流调普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗期和间歇期五期。
间日疟在前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜检多为阴性。发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体涨破红细胞期，镜检多为裂殖体和环状体。
恶性疟原虫--环状体
环纤细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大 核1个，但2个常见，红细胞常含2个以上原虫
薄血膜间日疟大滋养体形态
04
02
感染的红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等、分布均匀、数目较多、鲜红色的薛氏小点。
虫体大小：较大。
胞浆：不规则，浅蓝色，出现阿米巴伪足，有空泡。
核： 红色，一个。
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称厚血膜。无特殊要求的可厚薄血膜分载玻片涂制。
发热病人血片
01
标本片
02
血膜的制作（涂片操作）
发热病人血片
涂制厚、薄血膜的位置 通常将厚、薄血膜涂在一张载玻片上。方法是将载片分为6等分，第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个；门诊和发热病人血片每片1人， 涂2个厚血膜1个薄血膜， 以防血膜脱落而影响检查；
单张血片染色：将处理好的血膜，加姬氏母液1-2滴，加中性蒸馏水15-30滴，染色30分钟左右，然后用清水轻轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。
较理想的染色结果是红细胞为淡红或淡紫红色，疟原虫的胞质呈蓝色，核为紫红色，疟色素为棕褐色。
姬氏染液的染色方法
单击此处添加文本具体内容，简明扼要地阐述你的观点
202X
疟原虫的镜检技术
采血时间 现症病人和流调普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗期和间歇期五期。
间日疟在前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜检多为阴性。发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体涨破红细胞期，镜检多为裂殖体和环状体。
恶性疟原虫--环状体
环纤细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大 核1个，但2个常见，红细胞常含2个以上原虫
薄血膜间日疟大滋养体形态
04
02
感染的红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等、分布均匀、数目较多、鲜红色的薛氏小点。
虫体大小：较大。
胞浆：不规则，浅蓝色，出现阿米巴伪足，有空泡。
核： 红色，一个。
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称厚血膜。无特殊要求的可厚薄血膜分载玻片涂制。
发热病人血片
01
标本片
02
血膜的制作（涂片操作）
发热病人血片
涂制厚、薄血膜的位置 通常将厚、薄血膜涂在一张载玻片上。方法是将载片分为6等分，第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个；门诊和发热病人血片每片1人， 涂2个厚血膜1个薄血膜， 以防血膜脱落而影响检查；
显微镜下疟原虫形态鉴别特征
02 显微镜检查方法
薄血膜法
01
02
03
制备薄血膜
取患者耳垂或指尖血制成 薄血பைடு நூலகம்，待其自然干燥后， 用甲醇固定，再用水冲洗。
镜检
在显微镜下观察薄血膜， 可见到红细胞内不同发育 阶段的疟原虫，如环状体、 滋养体、裂殖体等。
优缺点
薄血膜法能清晰显示疟原 虫形态，但操作繁琐，且 易漏检。
厚血膜法
制备厚血膜
生物学特性及生活史
疟原虫的生活史包括红细胞外期和红细胞内期两个阶段，其中红细胞外期主要在肝 脏中进行，红细胞内期则在红细胞中进行。
疟原虫通过蚊虫叮咬传播，进入人体后首先进入肝脏进行繁殖，然后侵入红细胞进 行裂体增殖，最后导致红细胞破裂并释放出裂殖子和代谢产物。
疟原虫具有变形能力，可以在红细胞内形成不同形态的虫体，如环状体、滋养体、 裂殖体等。
将患者血液滴在载玻片上， 用推片制成厚薄均匀的血膜 ，待其自然干燥后，用溶血 剂溶解红细胞。
镜检
在显微镜下观察厚血膜， 可见到被溶解红细胞后释 放出的疟原虫。
优缺点
厚血膜法操作简便，检出 率高，但疟原虫形态不够 清晰。
荧光抗体染色技术
荧光抗体标记
将特异性荧光抗体与疟原虫表面 抗原结合，形成荧光标记的复合
05 显微镜下鉴别诊断技巧与 注意事项
鉴别诊断流程梳理
样本制备
确保样本薄而均匀，避 免过厚导致重叠影像，
影响观察。
显微镜选择
使用高倍显微镜，确保 足够放大倍数以观察疟
原虫细节。
观察步骤
先观察整体形态，再注 意细胞核、细胞质等关
键部位特征。
鉴别诊断
结合其他相似病原体特 征进行比较，排除干扰
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恶性疟裂殖体
恶性疟配子体 形态
恶性疟原虫的配子体呈 新月形或腊肠形，如血 膜干燥较慢，则可缩成 圆形，核居中，疟色素 围在核周，外围一圈胞 浆。此外，还可见配子 体的胞浆部分或全部消 失，只留下核和疟色素， 或核和胞浆均消失，只 留下一些疟色素。
恶性疟雌、雄配子体
间日疟（P. vivax ）鉴定要点
大滋养体
较大，呈阿米巴样,形状不规则。核位于胞 浆中或外边,胞浆常缩成圆形或断裂成数块 ，疟色素分布不匀
较大，裂殖子12～24个，裂殖子较大 较大。圆形,疟色素粗大。雌配子体较大, 核小,胞质深蓝色。雄配子体较小,核大,胞 浆浅蓝色
裂殖体
较小，裂殖子8～26个，裂殖子较小
配子体
雌配子体新月形,雄配子体腊肠形
红细胞感染率计算法（薄血膜）
1. 按以下公式计算： 疟原虫数/μl =红细胞疟原虫感染率（%）×红细胞 数/μl血 2. 显微镜下选择红细胞排列整齐密集，无重迭的视 野（ 300-500红细胞/视野） 3. 按一定顺序移动血片记数红细胞的同时，记录疟 原虫数 4 .如果能见到疟原虫，但是记数5000～10000个红 细胞时却没有感染红细胞，那么设定感染率为＜１％ 红细胞数：男性500万个/ μl血；女性 450万个/ μl血
厚血膜疟原虫形态
河北省疾病预防控制中心 寄生虫病防治所
甄素娟
实验室技术
厚血膜涂片是疟原虫镜检的一种常用方法， 是把血液涂成圆形，血膜中血细胞重叠，原虫较为 集中，称为厚血膜。厚血膜涂布面积小，阳性检出 率高，据统计厚血膜的检出率是薄血膜的十几倍。 但由于厚血膜用血量大，细胞重叠，干燥缓慢，虫体的鉴别比薄血膜困难。
原虫密度计算
估计疟原虫感染程度有三种方法：
●半定量计数法 检查厚血膜 ●白细胞原虫密度计数法 检查厚血膜 ●红细胞感染率计算法 检查薄血膜
半定量计数法
用厚血膜每个视野中所观察到疟原虫的平均数粗略 地估计出疟原虫密度。这种方法简便，缺点是计数 的疟原虫数受血膜厚薄影响，只能定性，不宜作定 量分析。 国内常用此方法将密度分为6级： 1.全厚血膜查见疟原虫数在10个以内，记录实际数字 2.全厚血膜查见疟原虫数在10个以上，但平均每个 视野不到1个虫，记录“少” 3.平均每个视野1~5个虫，记录“＋” 4.平均每个视野6~10个虫，记录“++” 5. 平均每个视野11~100个虫，记录“+++ ” 6. 平均每个视野100个虫以上，记录“++++ ”。
疟色素 被寄生 红细胞 其他
黄褐色,细小,杆状或结成粗大颗粒,分布不 匀
常见红细胞“影子”和薛氏点 常可查到各阶段的疟原虫
黄褐色,颗粒细小,结成团块后呈黑褐色 。配子体疟色素粗大,分布核周围
可见红细胞“影子”和茂氏点 一般仅见环状体（或）和配子体。危 重患者可见到大滋养体和裂殖体
间日疟环状体 形态
gametocyte
间日疟配子体、核在一端，有不染色带
间日疟雄配子体、核大周围有不染色 带
间日疟大滋养体、配子体
厚血膜间日疟疟色素
恶性疟小滋养体 形态
胞浆呈环状或向核的 一侧或两侧收缩，使 环的中间断裂，或围 绕核。 环纤细，常呈 “！”、 飞鸟“⌒.⌒”、V状和 断环状。
恶性疟小滋养体
谢 谢!
红细胞感染率计算法 （薄血膜）
不同区域的红细胞疟原虫感染率有较大差 别，通常血膜后端和边缘部疟原虫密度常比 前半部或中央部高，所以，镜检时不宜只检 查一个角落，应顺玻片的横轴检查。 镜检时，应当记录下所观察到的各种疟原 虫，不要笼统地记作混合感染。
白细胞疟原虫密度计数法（厚血膜）
白细胞疟原虫密度计数法重要性
厚血膜中疟原虫的形态
在厚血膜中，各
期疟原虫的体积 都略为缩小，其 中只有大、小滋 养体的形态有较 大改变，而裂殖 体和配子体的形 态则无明显变化。
间日疟原虫
环状体
较大。核1个，较大。胞浆较厚，常呈"！" 或"，"状
恶性疟原虫
较小。核1～2个,较小。胞浆纤细,常呈 "！"、"飞鸟"、"v"和"断环"状 较小。常呈圆形,疟色素细小或结成1～ 2个团块
胞浆呈环状或向核 的一侧或两侧收 缩，使环的中间 断裂，或围绕核。 间日疟原虫的环 较大，胞浆较厚， 常呈“，” “！” 状.
间日疟小滋养体
环状体
间日疟裂殖体、小滋养体
间日疟大滋养体 形态
呈阿米巴样形状不规则。 胞 浆常缩成圆形或断裂成几个块 状，大小不一，似互不连接。 核和疟色素均被包在胞浆之中， 着色深，只隐约可见红色的核 和黄绿色的疟色素。 核位于胞浆之中或外边。疟色 素分布不均匀。 有些仅见胞浆和疟色素而核看 不清楚。
恶性疟小滋养体
恶性疟环状体在
发育不同阶段， 其个体大小有很 大变化。注意粗 环与间日疟环状 体的区别。
恶性疟小滋养体
恶性疟环状体
恶性疟大滋养体形态
与薄血膜形态相 似，常呈圆形，体 小结实，疟色素细 小，金黄色，结成 块状后，呈黑褐色。
大滋养体
恶性疟裂殖体 形态
裂殖体前期及成熟殖体，除虫体略为缩小着色 较深外，均与薄血膜相似。
间日疟大、小滋养体、成熟裂殖体
间日疟配子体 形态
除虫体略为缩小着色较深外，均与薄血膜相似。
圆形,疟色素粗大。雌配子体较大,核小,胞质
深蓝色。雄配子体较小,核大,胞浆浅蓝色
间日疟雄配子体、成熟裂殖体、疟色素集中
间日疟雌配子体
P. vivax:
ring-form trophozoite large trophozoite
1.红细胞通常涨大 2.薛氏点明显 3.成熟环状体粗大
4.滋养体有阿米
巴样伪足 5.可见不同发育 期的原虫
恶性疟（P.falciparum）鉴定 要点
1.环状体纤细, 红细胞 不涨大 2.一个红细胞内可有 几个环状体 3.环状体内可有2个核 4.环状体可贴在红细 胞边缘 5.血片中没有其他发 育期滋养体 6.配子体呈新月形或 腊肠形 7.可出现茂氏点
厚血膜白细胞疟原虫计数法举例
●假设计数200 WBC中有35个疟原虫，在不知患者 白细胞数的情况下，以每微升血8000个白细 胞为数, 由此计算出每微升血液疟原虫密度为：
35（原虫数）x 8000÷200（白细胞数） =1400 / μl
答：该患者原虫密度为1400 / μl。
厚血膜计数方法
一个视野计数法
● 用于疟疾研究
● 用于临床诊断
● 用于抗疟后疟疾考核
白细胞疟原虫密度计数法（WHO推荐）
● 检查厚血膜，由上而下，走之字形。从看到第一个疟原虫起
开始计数白细胞和原虫数，每间隔5个视野（这5个视野不做 白细胞和原虫记数），记录一个视野（即第6个视野）内所有 白细胞和疟原虫的数量，如果该视野只有白细胞数而无原虫 就记录白细胞数，反之亦然，压线的白细胞和疟原虫均不计 数。记录200个白细胞中的疟原虫数，如果原虫密度较低， 可增加计数白细胞500以上；如果密度较高，则以10分钟内记 录的实际白细胞数折算密度。 ●白细胞疟原虫计算公式： 疟原虫数 × 患者每微升血的白细胞数 ÷ 计数的白细胞数 = 疟原虫数/μl血。 ● 如果不知患者的白细胞数，则以8 000个白细胞/μl血计算(国 际标准) 。
大滋养体
间日疟滋养体
大滋养体、形状不规则
间日疟大滋养体
间日疟滋养体染色偏酸
间日疟滋养体、成熟裂殖体
小滋养体、大滋养体、裂殖体
间日疟裂殖体 形态
裂殖体前期及成熟裂殖体，除虫体略为缩小着 色较深外，均与薄血膜相似。 裂殖子12～24个，裂殖子较大
间日疟成熟裂殖体
间日疟成熟裂殖体
间日疟裂殖体、血小板