兽医微生物学培训课件

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Hale Waihona Puke 2.间接凝集试验 将可溶性抗原(或抗体) 吸附不溶性
颗粒载体的表面，与相应抗体(或抗原)作用，在电解 质存在条件下，出现的特异性的凝集反应称为间接 凝集反应。 优点 敏感性高，比直接凝集反应敏感2-8倍。
常用载体
红细胞(绵羊红细胞)、胶乳颗粒等。当
载体吸附了可溶性抗原后即称为致敏颗粒。 间接血凝试验 是将可溶性抗原致敏于红细胞表面， 用以检测相应抗体。 反向间接血凝试验 如将抗体致敏于红细胞表面，
集反应。本法广泛应用于多种细菌和某些病毒的
快速诊断。
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二、沉淀试验
可溶性抗原与相应抗体结合，在电解质存在下，形 成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀试验。 参与沉淀试验的抗原称沉淀原，抗体称为沉淀素。
抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等，抗原分子较小，如细菌的 外毒素、内毒素、菌体裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、组 织浸出液等。
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二、血清学反应的影响因素
1.电解质 特异性的抗原和抗体具有对应的极性基(羧 基、氨基等 ) ，它们互相吸附后，其电荷和极性被中 和因而失去亲水性，变为憎水系统。 易受电解质作用失去电荷而互相凝聚、发生凝集或
沉淀反应。
2.温度 较高的温度可以增加抗原和抗体接触的机会， 血清学反应常用 pH 为 6-8 ，过高或过低的 从而加速反应的出现。常用37℃水浴保温。 3. 酸碱度 pH可使抗原抗体复合物重新离解。
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第二节
凝聚性试验
抗原与相应抗体结合形成复合物，在有电解质存 在下，复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝聚小块或 沉淀物，根据此现象来测定相应抗体或抗原，称为 凝聚性试验。分为凝集试验和沉淀试验。
一、凝集试验
细菌、红细胞等颗粒性抗原，与相应抗体结合， 在有适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集团块， 称为凝集试验。参与的抗体主要为 IgG 、 IgM 。凝 集试验可用于检测抗原或抗体，优点是操作简便。
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抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性
结合，因抗体主要来自血清，因此在体外进行的抗 原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。 第一节 概 述 免疫血清学技术按抗原抗体反应性质不同可分为：
1. 凝聚性反应 包括凝集试验和沉淀试验。
2. 标记抗体技术 包括荧光抗体、酶标抗体、放射
性标记抗体、发光标记抗体技术等。
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用以检测检样中相应抗原 。
3. 乳胶凝集试验 (LAT)
用它胶乳微球（直径约
0.8um）作载体吸附某些抗原(或抗体)，可用以检
测相应的抗体(或抗原)。
优点 快速简便、易保存、较准确等。 4.协同凝集试验(COAG) 葡萄球菌A蛋白(SPA) 能 与多种动物 IgG 分子的 Fc 片结合，结合后保持其 抗体活性，当与相应的抗原结合时，就可产生凝
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根据抗原的性质分为直接凝集试验和间接凝集试验。
1.直接凝集试验 颗粒性抗原与凝集素直接结合并出现 凝集现象的试验称作直接凝集试验。按操作方法可分 玻片法和试管法两种。 （1）玻片法 为一种定性试验。将含有已知抗体的诊
断血清与待检抗原悬液在玻片上混合，数分钟后，如
出现颗粒状或絮状凝集，即为阳性反应。 此法简便快速，适用于新分细菌的鉴定或分型。如 沙门氏菌的鉴定。也可用已知的诊断抗原，检测待检 血清中的相应抗体，如布氏杆菌、鸡白痢全血平板凝
兽 医 微 生 物 学
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兽医微生物学
(多媒体教学课件)
天津农学院动科系动物预防医学教研室制作 2003/02/28
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内 容 简 介
绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生 物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、 致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免 疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、 微生物学诊断和免疫防治等。 真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与 防治等。 病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病 性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。 实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备 及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药 敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定 等。
集试验。
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（2）试管法 为一种定量试验，用以检测血清抗体
含量。 将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后加入等 量抗原，置37℃水浴数小时观察。视不同凝集程度 记录为++++(100％凝集)、+++(75％凝集)、++(50
％凝集)、+(25％凝集)和-(不凝集)。以其++以上的
血清最大稀释度为该血清的凝集价(或称滴度)。 试验时必须设置阳性血清、阴性血清和生理盐水 等对照。
3. 补体参与的反应 补体结合试验、免疫黏附试验 等。
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4. 中和反应 病毒中和试验、毒素中和试验。 一、血清学反应的一般特点
1. 特异性与交叉性 血清学反应具有高度特异性，如
抗猪瘟病毒的抗体只能与猪瘟病毒结合，而不能与 口蹄疫病毒结合。这是血清学试验用于分析各种抗 原和进行疾病诊断的基础。 但若两种天然抗原之间含有部分共同抗原时，则
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第八章
抗原与抗体
第九章
第十章 第十一章 第十二章 第十三章 第十四章
免疫系统与免疫应答
抗感染免疫 变态反应 免疫调节与免疫遗传 免疫血清学技术 免疫学的应用
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第十二章
免疫调节与免疫遗传（自学）
第十三章
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节
免疫血清学技术
概念 凝聚性反应 标记抗体技术 补体参与的试验 中和试验
发生交叉反应。交叉反应是区分血清型和亚型的重
要依据。
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2. 抗原抗体结合机理
抗原和抗体的结合为弱能非
共价键结合，其结合力决定于抗原决定簇和抗体的 抗原结合点之间形成的非共价键的数量、性质和距 离。 常规的血清学反应，如凝集反应、沉淀反应、补
体结合反应等，只有在抗原与抗体呈适当比例时，
结合反应才出现凝集，沉淀等可见反应，在最适比 例时，反应最明显。 这种因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反 应的现象，称为带现象（图13-1-166）。