ATP检测
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ATP检测（Molecular Probesʼ ATP Determination Kit A22066)
实验原理：
Kit Contents：
1、D-Luciferin（荧光素）：Component A, blue cap，5支，3mg/支（干冻粉）
2、Luciferase（荧光素酶）：Component B, red cap 5mg/ml 40ul
3、Dithiothreitol (DTT)：Component C ，black cap，25 mg
4、Adenosine 5′-triphosphate ATP：Component D, green cap 5mM，400ul
5、20X Reaction Buffer：Component E 10 mL 500mM
试剂准备：
1、配制1ml 1* Reaction Buffer:50ul20X Reaction Buffer+950ul
去离子水；
2、配制1ml-10mM D-luciferin储存液：将上述步骤1中的1ml
Reaction Buffer加入到一整管D-luciferin（Component A,
blue cap）中；-20℃避光；
3、配制100mM DTT储存液：加1.62ml水至25mg的DTT管（Component
C ，black cap）-20℃保存，若拿出溶解，请放置4℃，勿再次
冻融；
4、稀释ATP做标曲： 1 2 3 4 5
水： 100 90 90 90 90
ATP： 0.2ul 每管逐加10ul
浓度： 1uM 100nM 10nM 1nM 0 -20℃保存工作液制备：
1.8.9ml 去离子水
2.0.5ml 20X Reaction Buffer (Component E)
3.0.1 mL 0.1 M DTT（之前试剂准备中的步骤3）
4.0.5 mL of 10 mM D-luciferin（之前试剂准备中的步骤2）
5. 2.5 ul of firefly luciferase 5 mg/mL stock solution
（Component B, red cap）
配制后轻柔的颠倒混匀，禁止涡旋，配制好后可放于4℃保存数天，但检测敏感性会持续下降。
实验步骤：
与制作标曲时的上样量一致：90ul工作液+10ul（ATP、裂解后样本）。