诱变育种：是用物理或化学的诱变剂使诱变对象内的遗传物质...精选版

诱变育种的步骤：
原始菌种 原菌种特性鉴定 纯化 斜面/肉汤培养 诱变剂处理 计算存活率 复筛
平板分离 观察形态变异， 小试 挑单菌落 移至斜面 良种保藏 中试
单孢子/单细胞悬液
初筛
诱变育种的基本过程：
选择选择合适的出发菌株 ↓ 制备待处理的菌悬液 ↓ 诱变处理 ↓
筛选
↓ 保藏和扩大试验
1.出发菌株的选择： 出发菌株———用来育种处理的起始菌株

简便有效的诱变方法：紫外线的照射最为方便。
化学诱变剂的种类、浓度和处理方法尤其是中止 反映的方法很多，实际工作时可参看有关书籍。一种较有 效的简易处理方法的大致操作步骤是：先在平板上涂上出 发菌株细胞，然后在平板上均匀地放上几颗很小的诱变剂 颗粒（也可放吸有诱变剂溶液的滤纸片），经培养后，在 制菌圈的边缘挑取若干突变菌落，分别制成悬浮液，然后 将其涂在一般平板表面使长出许多单菌落，最后可用影印 培养法或逐个检出法选出突变种。
表型迟延现象:指某一突变在DNA复制和细胞分裂后，才 在表型上显示出来，造成不纯的菌落。 产生原因： ①分离性迟延现象
②生理性迟延现象
3.诱变处理：
诱变剂的作用： ①提高突变的频率 ②扩大产量变异的幅度 ③使产量变异朝着正突变或负突变移动
剂量的表示法：不同种类和不同生长阶段的微生物对诱变 剂的敏感程度不同，所以在诱变处理前，一般应预先 作诱变剂用量对菌体死亡数量的致死曲线，选择合适 的处理剂量。—致死率是最好的诱变剂相对剂量的表 示方法。
最适剂量的选择：产量性状的育种中多倾向于低剂量（致 死率在70~80%）

选择诱变剂的种类：在选用理化因子作诱变剂时，在同样 效果下，应选用最方便 的因素；而在同样方便的情况下，
则应选择 最高效 的因素。在物理诱变剂中，尤以紫外线 为最方便，而在化学诱变剂中，一般可选用诱变效果最为 显著的“超诱变剂”，如NTG。
以选育高产突变株为例，诱变育种的基本环节概括如下：
可见，设计和采用效率高的筛选方案和方法 极其重要。
第一轮：
Biblioteka Baidu
一个出发菌株→→→选出200个菌株→→→选出50株
（每瓶一株） 复筛
诱变处理
初筛
→→→选出5株
（每瓶四株）
40株 第二轮： 5个出发菌株→→→
诱变处理
40株
→→ → 选出50株 →→ →选出5株 40株
◆出发菌株应具备：
①对诱变剂的敏感性高； ②具有特定生产性状的能力或潜力； ◆出发菌株的来源； ①自然界直接分离到的野生型菌株：
②历经生产考验的菌株：
③已经历多次育种处理的菌株：
2.制备细胞悬液
要求： ①菌体处于对数生长期，并使细胞处于同步生长； ②细胞分散且为单细胞，以避免表型迟延现象 （phenotypic lag）; 方法： ①玻璃珠打散10-15min; ②加０.3%吐温80（表面活性剂） ③用无菌脱脂棉过滤。 制备： 物理诱变剂——生理盐水（0.85%NaCl) 化学诱变剂——缓冲液 浓度： 细菌、放线菌 108个/ml 霉菌、酵母菌 106个/ml
（七）诱变育种
诱变育种：是用物理或化学的诱变剂使诱变对
象内的遗传物质（ DNA ）的分子结构发生改变，
引起性状变异并通过筛选获得符合要求的变异菌
株的一种育种方法。

诱变育种具有极其重要的实践意义。当前发酵工 业和其他微生物生产部门所使用的高产菌株，几 乎毫无例外地都是通过诱变育种而明显提高其生 产性能的。
诱变处理方式： 单一因子处理： 复合因子处理：
两种以上因素 先后使用 同时使用 单一因子重复使用
常用诱变剂的使用方法
4. 菌种筛选
筛选是最为艰难的也是最为重要的步骤 .
4.1 筛选方案：
实际工作中，为了提高筛选效率，往往将筛选工作分为 初筛和复筛两步进行。 初筛的目的：删去明确不符合要求的大部分菌株，把生 产性状类似的菌株尽量保留下来，使优良性状的菌株不 至于漏网；——因此，初筛工作以量为主，测定的精确 性还在其次；初筛手段应尽可能快速、简单。 复筛的目的：确认符合要求的菌株；——复筛以质为主， 应精确测定每个菌株的生产指标。
（每瓶一株） （每瓶四株）
初筛
复筛
40株 40株
4.2 变异菌的一般筛选方法
4.2.1 平皿快速检测法

变色圈法 透明圈法 生长圈法


抑菌圈法
梯度平板法
4.2.2 摇瓶培养法