异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为及其测定(1).

异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为及其测定(1)
【摘要】目的研究异鼠李素在碳
糊电极上的伏安行为,建立异鼠李素含量测定的新方法。

方法采用循环伏安法检测异鼠李素在电极上的电化学行为,以差示脉冲伏安测定其含量。

结果异鼠李素发生单电子、单质子的氧化还原反应,该反应为有吸附特征的可逆过程。

在pH 4.0磷酸缓冲液中,氧化峰电流与异鼠李素浓度在2.0×10-7~3.0×10-6 mol/L 呈良好的线性关系,检测限为2.5×10-8 mol/L。

结论碳糊电极可有效消除样品中其他组分对异鼠李素测定的干扰,可用于实际样品的测定。

【关键词】鼠李素位测定法电极
异鼠李素(isorhamnetin)是一种多羟基黄酮类化合物,为一些中草药的有效成分,具有较好的抗心肌缺氧、缺血、缓解心绞痛、抗心律失常、抗氧自由基、降低血清胆固醇等多种心血管效应[1?2]。

近20年来只有少量种类的黄酮类化合物的电化学性质被研究和应用[3]。

多羟基黄酮类在电分析领域的应用已经引起关注[4]。

碳糊电极具有电位范围宽、制备方便、价格低廉等特点,在伏安法中得到广泛应用[5]。

笔者研究在碳糊电极上伏安法直接测定异鼠李素的方法,探讨该化合物在碳糊电极上的伏安性质和电极反应机制,采用差示脉冲伏安法测定心达康片中黄酮的总含量。

1材料与方法
1.1材料
1.1.1仪器电化学分析仪(CHI660B,上海辰华仪器公司);采用三电极体系,工作电极为碳糊电极,对电极为铂丝电极,参比电极为Ag?AgCl电极;精密酸度计(pHS?3B型,上海雷磁仪器厂);医用数控超声波清洗器(KQ?250DE型,昆山市超声仪器有限公司);搅拌器(JB?1型,上海雷磁新泾仪器有限公司);电子分析天平(BS110S型,德国Sartorius公司)。

1.1.2试剂异鼠李素标准品(中国药品生物制品检定所),用无水乙醇配制成1.0×10-3 mol/L储备液,避光保存;磷酸缓冲液(PBS):由50 mmol/L NaH2PO4?Na2HPO4和20 mmol/L NaCl配制,用50 mmol/L H3PO4和NaOH溶液调至pH 2,3,4,5,6,7.4。

所用试剂均为分析纯,实验用水为二蒸水。

心达康片样品(四川雅达药业股份有限公司,批号:050503）,总黄酮标示量每片 5 mg。

1.2方法
1.2.1制备碳糊电极参照文献[6],取石墨粉3 g于研钵中,按3∶1(g/g)比例加入液体石蜡,搅拌均匀,调成糊状,填入直径3 mm的聚四氟乙烯管中,充分压紧,另一端用铜棒引出。

电极表面在称量纸上抛光,用蒸馏水淋洗,将电极置于
0.1 mol/L H2SO4中于-0.5~1.4 V循环扫描20圈,蒸馏水淋洗备用。

1.2.2测定异鼠李素以磷酸盐缓冲液(pH 4.0)为测定底液,加入异鼠李
素标准溶液10 μL,在电解池中通氮气5 min,除去溶解氧,开路搅拌富集2 min,静置10 s,扫描速度100 mV/s时,记录电位-0.2~0.8 V的循环伏安和差示脉冲曲线,测量氧化峰电流。

1.3判断标准可逆过程:正向电压扫描出现阴极峰,反向电压扫描出现阳极峰,且△Ep<59/n mV,Ipa/Ipc＝1;准可逆过程:正向电压扫描出现阴极峰,反向电压扫描出现阳极峰,且△Ep>59/n mV,Ipa/Ipc<1或>1;不可逆过程:正向电压
扫描出现阴极峰,反向电压扫描不出现阳极峰[7]。

2结果
2.1异鼠李素在碳糊电极上的循环伏安特征在pH 4.0的PBS中出现一
对氧化还原峰(图1),氧化峰电位(Epa)与还原峰(Epc)电位分别为0.371和
0.315 V,△Ep=56 mV。

Ipa/Ipc =6.418/7.102=0.904≈1,表明该电极反应为可逆过程。

根据可逆过程的判断依据,可知该电极反应的电子转移数n≈1。

由异
鼠李素在碳糊电极上的循环图可得,该体系氧化峰的半峰宽为129 mV,由关系式W1/2=62.5/(1-α)n,可得电子转移系数α=0.516。

改变底液pH,随溶液pH值的增加氧化还原峰电位均负移,将低扫描速度下测得的氧化还原峰电位的平均值作为式量电位Eo,并将测得的Eo对溶液的pH 作图。

在pH 2.0~7.4范围内,Eo与pH呈良好的线性关系,得到斜率为-57.8
mV/pH的直线(图2)。

该电极反应中电子的得失伴随质子转移,质子转移数与电子转移数的比值为1。

随扫描速度的增加,氧化峰电流和还原峰电流均明显增加(图3),在
20~140 mV/s扫描速度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Epa(V)=0.073
v(mV/s)+0.0817,相关系数为0.9992,表明异鼠李素在电极表面是吸附控制过程。

当扫描速度过高时,充电电流增大,不利于峰电流的测定。

在获得较大峰电流的同时又要防止充电电流过大,故选择扫描速度为100 mV/s。