草莓PPT课件

一、大蒜脱毒苗的培育
• （一）脱毒的方法:茎尖培养、茎盘培
养、花序轴培养、茎盘圆顶培养、体细 胞胚再生培养。
1. 茎尖培养脱毒
• 2.花序轴培养脱毒
茎尖分生组织
（1）培养方法
• 大蒜鳞茎先在4℃下贮藏30d左右，以打破休眠。 • 蒜瓣表面消毒后→剥取0.2～0.9mm长的带一个或不
带叶原基的茎尖→接种在附加6-BA 2.0mg／L+NAA 0.6mg／L的 (MS、B5、LS)培养基上→40d后开始分 化→形成侧芽→ 100d后形成丛生芽。
1.茎尖培养脱毒
• 剪取5cm左右的顶梢 → 剪去叶片 → 自来水冲 洗 → 70％酒精浸3～5s → 0.1％升汞消毒2～ 10min → 无菌水冲洗3～5次 → 剥离茎尖外面的 幼叶和鳞片 →切取茎尖分生组织 →接种于诱 导培养基MS+BA0.5+GA3 0.1+IBA0.2 →分化培养 基MS+BA0.5～1.0→ 20d分化丛生芽→生根培养基 1/2MS+IBA0.2～1.0→生根→炼苗→移栽
培养条件
• 培养基含蔗糖30g／L、琼脂8g／L、pH 5.8～6.0。
• 培养温度为25±1℃ • 光照强度1200～2 000Lx，12h/d。
（2）影响茎尖脱毒的主要因素
①培养基
②茎尖大小
③ 热处理或茎 尖培养结合热 处理
2. 花序轴培养脱毒
• 蒜薹总苞段→ 70％酒精表面消毒1min →0.1％氯化 汞中灭菌12min →无菌水冲洗4～5次后→剥去外层 苞叶→横切花序轴顶部→去除花茎部分→将花序轴 接种于固体培养基上。
每10 ~ 18 d将上述悬浮培养物移入 1/2MS固体培养基上使体细胞胚成苗。
（3）体细胞胚发生的主要阶段
体细胞胚胎发生至少经历两个阶 段，即需要生长素阶段和不需要生长素阶 段。
• 形成胚性细胞团（0期）生长素→细胞缓慢 增殖（1期）无激素→形成球形胚（2期）→ 经历心形胚、鱼雷形胚→再生植株（3期）
（三）营养条件
常见诱导培养基：B5、MS、SH或改良 的MS。
还原型氮对胡萝卜体细胞胚的启动和成 熟特别重要。除NH4+的形式外，还原性氮 还有多种形式，如椰子汁、水解酪蛋白以 及多种氨基酸等。
金属离子在胡萝卜体细胞胚胎发生的过 程中也是一个重要的因子。
① 光；
（四）环境因子
胡萝卜体细胞胚胎发生过程中，
完全黑暗或连续光照都能产生更正常
的成熟胚。高强度的白光、蓝光抑制
胡萝卜悬浮细胞的体细胞胚的发生和
（－）体胚发生体系的建立
（1）愈伤组织的诱导和保存
外植体：无菌苗的下胚轴（长0.5 cm）、消毒叶柄 （长0.5 ~ 1.0 cm）、贮藏根（横切面0.5 cm2）。
诱导培养基：MS＋2,4-D 0.1 ~ 1.0 mg/L，蔗糖30 g/L， 琼脂8 g/L。
培养条件：26 ℃、黑暗条件下培养4 ~ 8周，即可获 得愈伤组织。
（二）脱毒苗的检测
1. 指示植物小叶嫁接鉴定法 2. 电子显微镜鉴定法
二、草莓无性系变异
（一）选择的主要途径
1. 悬浮细胞 2. 愈伤组织 3. 单倍体细胞
（二）诱变方法
1. 化学诱变 2. 物理诱变
三、草莓种质资源保存
（－）冷冻保存 （二）常低温缓慢生长保存
第五节 大 蒜
大蒜叶枯病
大蒜紫斑病
植物体胚发生过程中的基因调控网络
胚胎晚期
胚后发育
子叶形胚 鱼雷形胚
基因的差异表达 体胚的形态建成
心形胚
由此进入
胚性细胞
原胚
球形胚
二、影响体胚发生的主要因素
（一）外植体 基因型往往是体细胞胚胎发生的决定因素。
一般来说，下胚轴、叶柄和贮藏根等都是 较理想的外植体。 （二）生长调节物质
生长素(2,4-D)和细胞分裂素在胚性愈伤组 织和体细胞胚胎发生的诱导阶段起作用， 而ABA是在体细胞胚胎发育成熟阶段起作 用。
继代培养 ：相同成分的悬浮培养基上或固体培养基 上。
（2）体细胞胚Βιβλιοθήκη 诱导继代4次以上的愈伤组织，用不 锈钢的32 μm、63 μm和125 μm的过滤筛过 滤。将保留在32 μm的细胞团在1 000 r/min 下离心5次后，沉淀物用于体细胞胚诱导。
诱导培养基 ：MS, 加入5 mmol/L的 Ca2+有利于胚胎发生。
• 在不加任何生长调节物质的培养基中，平均每个茎盘 可分化15个芽。
二、大蒜单倍体育种
（－）材料处理及培养 1. 取材和消毒 2. 接种和培养
（二）单倍体植株鉴定 大蒜单倍体植株可通过染色体观察
进行鉴定。
第六节 胡萝卜
一、胡萝卜体细胞胚胎发生 二、影响体胚发生的主要因素 三、人工种子
一、胡萝卜体细胞胚胎发生
第四节 草 莓
一、草莓脱毒苗的培育
草莓病毒病是指草莓感染不同的病毒后引起发
病的总称，在栽培上表现的症状大致可分为黄化
型和缩叶型。 • 主要病毒： • 草莓斑驳病毒(SMoV) • 草莓皱缩病毒（SCrV） • 草莓镶嵌病毒（SVBV） • 草莓轻型黄边病毒（SMYEV）
（－）脱毒技术
• 脱毒的方法主要有： • 1.茎尖培养法 • 2.茎尖培养和热处理相结合 • 3.花药培养法。
2.热处理和茎尖培养相结合脱毒
• （1）40℃处理16h，35℃处理8h；时间4～5周 • （2）38℃恒温，湿度60～70％， 处理12～50d • （3）35℃ 7d，38℃，湿度40～68％，光照强度
4000～5000Lx，35d
3.花药培养脱毒
取单核期的花蕾→低温（4～5℃）处理24h→70 ％酒精浸3～5s → 0.1％升汞消毒10～15min → 无菌 水冲洗3～5次 → 剥离花冠，取下花药→接种→诱 导愈伤组织培养基MS+BA1.0+NAA0.2+IBA0.2→20d 愈伤组织→培养基MS+BA1.0+IBA0.05→50～60d植株
• 花序轴初代培养的培养基为B5+NAA 0.1 mg／L+BA 2.0mg／L(pH6.5)；
• 继代培养基为MS+BA 2.0mg／L+NAA 0.1mg／L + GA3 0.05mg／L+蔗糖20g／L（pH6.2)。
3. 茎盘培养脱毒
• 无菌的鳞茎盘→接种到LS固体培养基上→约1周后茎 盘外植体表面出现多个圆顶状结构→长出愈伤组织→ 2周后分化出绿芽→ 3周后长至lcm左右。