草莓PPT课件

一、大蒜脱毒苗的培育
• （一）脱毒的方法:茎尖培养、茎盘培
养、花序轴培养、茎盘圆顶培养、体细 胞胚再生培养。
1. 茎尖培养脱毒
• 2.花序轴培养脱毒
茎尖分生组织
（1）培养方法
• 大蒜鳞茎先在4℃下贮藏30d左右，以打破休眠。 • 蒜瓣表面消毒后→剥取0.2～0.9mm长的带一个或不
带叶原基的茎尖→接种在附加6-BA 2.0mg／L+NAA 0.6mg／L的 (MS、B5、LS)培养基上→40d后开始分 化→形成侧芽→ 100d后形成丛生芽。
（三）营养条件
常见诱导培养基：B5、MS、SH或改良 的MS。
还原型氮对胡萝卜体细胞胚的启动和成 熟特别重要。除NH4+的形式外，还原性氮 还有多种形式，如椰子汁、水解酪蛋白以 及多种氨基酸等。
金属离子在胡萝卜体细胞胚胎发生的过 程中也是一个重要的因子。
① 光；
（四）环境因子
胡萝卜体细胞胚胎发生过程中，
完全黑暗或连续光照都能产生更正常
的成熟胚。高强度的白光、蓝光抑制
胡萝卜悬浮细胞的体细胞胚的发生和
• 花序轴初代培养的培养基为B5+NAA 0.1 mg／L+BA 2.0mg／L(pH6.5)；
• 继代培养基为MS+BA 2.0mg／L+NAA 0.1mg／L + GA3 0.05mg／L+蔗糖20g／L（pH6.2)。
3. 茎盘培养脱毒
• 无菌的鳞茎盘→接种到LS固体培养基上→约1周后茎 盘外植体表面出现多个圆顶状结构→长出愈伤组织→ 2周后分化出绿芽→ 3周后长至lcm左右。
每10 ~ 18 d将上述悬浮培养物移入 1/2MS固体培养基上使体细胞胚成苗。
（3）体细胞胚发生的主要阶段
体细胞胚胎发生至少经历两个阶 段，即需要生长素阶段和不需要生长素阶 段。
• 形成胚性细胞团（0期）生长素→细胞缓慢 增殖（1期）无激素→形成球形胚（2期）→ 经历心形胚、鱼雷形胚→再生植株（3期）
继代培养 ：相同成分的悬浮培养基上或固体培养基 上。
（2）体细胞胚的诱导
继代4次以上的愈伤组织，用不 锈钢的32 μm、63 μm和125 μm的过滤筛过 滤。将保留在32 μm的细胞团在1 000 r/min 下离心5次后，沉淀物用于体细胞胚诱导。
诱导培养基 ：MS, 加入5 mmol/L的 Ca2+有利于胚胎发生。
培养条件
• 培养基含蔗糖30g／L、琼脂8g／L、pH 5.8～6.0。
• 培养温度为25±1℃ • 光照强度1200～2 000Lx，12h/d。
（2）影响茎尖脱毒的主要因素
①培养基
②茎尖大小
③ 热处理或茎 尖培养结合热 处理
2. 花序轴培养脱毒
• 蒜薹总苞段→ 70％酒精表面消毒1min →0.1％氯化 汞中灭菌12min →无菌水冲洗4～5次后→剥去外层 苞叶→横切花序轴顶部→去除花茎部分→将花序轴 接种于固体培养基上。
2.热处理和茎尖培养相结合脱毒
• （1）40℃处理16h，35℃处理8h；时间4～5周 • （2）38℃恒温，湿度60～70％， 处理12～50d • （3）35℃ 7d，38℃，湿度40～68％，光照强度
4000～5000Lx，35d
3.花药培养脱毒
取单核期的花蕾→低温（4～5℃）处理24h→70 ％酒精浸3～5s → 0.1％升汞消毒10～15min → 无菌 水冲洗3～5次 → 剥离花冠，取下花药→接种→诱 导愈伤组织培养基MS+BA1.0+NAA0.2+IBA0.2→20d 愈伤组织→培养基MS+BA1.0+IBA0.05→50～60d植株
第四节 草 莓
一、草莓脱毒苗的培育
草莓病毒病是指草莓感染不同的病毒后引起发
病的总称，在栽培上表现的症状大致可分为黄化
型和缩叶型。 • 主要病毒： • 草莓斑驳病毒(SMoV) • 草莓皱缩病毒（SCrV） • 草莓镶嵌病毒（SVBV） • 草莓轻型黄边病毒（SMYEV）
（－）脱毒技术
• 脱毒的方法主要有： • 1.茎尖培养法 • 2.茎尖培养和热处理相结合 • 3.花药培养法。
• 在不加任何生长调节物质的培养基中，平均每个茎盘 可分化15个芽。
二、大蒜单倍体育种
（－）材料处理及培养 1. 取材和消毒 2. 接种和培养
（二）单倍体植株鉴定 大蒜单倍体植株可通过染色体观察
进行鉴定。
第六节 胡萝卜
一、胡萝卜体细胞胚胎发生 二、影响体胚发生的主要因素 三、人工种子
一、胡萝卜体细胞胚胎发生
植物体胚发生过程中的基因调控网络
胚胎晚期
胚后发育
子叶形胚 鱼雷形胚
基因的差异表达 体胚的形态建成
心形胚
由此进入
胚性细胞
原胚
球形胚
二、影响体胚发生的主要因素
（一）外植体 基因型往往是体细胞胚胎发生的决定因素。
一般来说，下胚轴、叶柄和贮藏根等都是 较理想的外植体。 （二）生长调节物质
生长素(2,4-D)和细胞分裂素在胚性愈伤组 织和体细胞胚胎发生的诱导阶段起作用， 而ABA是在体细胞胚胎发育成熟阶段起作 用。
（－）体胚发生体系的建立
（1）愈伤组织的诱导和保存
外植体：无菌苗的下胚轴（长0.5 cm）、消毒叶柄 （长0.5 ~ 1.0 cm）、贮藏根（横切面0.5 cm2）。
诱导培养基：MS＋2,4-D 0.1 ~ 1.0 mg/L，蔗糖30 g/L， 琼脂8 g/L。
培养条件：26 ℃、黑暗条件下培养4 ~ 8周，即可获 得愈伤组织。
1.茎尖培养脱毒
• 剪取5cm左右的顶梢 → 剪去叶片 → 自来水冲 洗 → 70％酒精浸3～5s → 0.1％升汞消毒2～ 10min → 无菌水冲洗3～5次 → 剥离茎尖外面的 幼叶和鳞片 →切取茎尖分生组织 →接种于诱 导培养基MS+BA0.5+GA3 0.1+IBA0.2 →分化培养 基MS+BA0.5～1.0→ 20d分化丛生芽→生根培养基 1/2MS+IBA0.2～1.0→生根→炼苗→移栽
（二）脱毒苗的检测
1. 指示植物小叶嫁接鉴定法 2. 电子显微镜鉴定法
二、草莓无性系变异
（一）选择的主要途径
1. 悬浮细胞 2. 愈伤组织 3. 单倍体细胞
（二）诱变方法
1. 化学诱变 2. 物理诱变
三、草莓种质资源保存
（－）冷冻保存 （二）常低温缓慢生长保存
第五节 大 蒜
大蒜叶枯病
大蒜紫斑病Baidu Nhomakorabea