食品中铁的测定(邻菲罗啉比色法)实验报告

食品中铁的测定（邻菲罗啉比色法）

1 目的

熟练掌握直接灰化法的原理，操作及注意事项。以铁的测定为代表，掌握灰化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握消化法的原理，操作及注意事项。以铁的测定为代表，掌握消化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握邻菲罗啉比色法测铁的原理、操作及注意事项。

2 原理

2.1 灰化

食品经高温灼烧至恒重，残留物称重称为灰分；

2.2 消化

样品与浓硫酸和催化剂一同加热，可使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出，食品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵；

2.3 比色法测铁

样品经灰化(或消化)，用抗坏血酸将三价铁还原为二价铁，二价铁与邻菲罗啉反应生成红色络合物，在520nm下测其光吸收强度A，根据A值在

，再计算样品中铁的含量。

标准曲线上查对应二价铁浓度得C

样

3 试剂

硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、邻菲罗啉、铁标准溶液（C=10ug/mL）。

4 仪器

4.1 灰化：瓷坩埚、灰化炉、干燥器、精密天平；

4.2 消化：定氮瓶、铁架台、电炉；

4.3 比色法测铁：水浴锅、可见光分光光度计、25mL比色管。

5 样品

学生营养奶粉

6 操作方法

6.1 样品的灰化处理及样品中灰分的测定

6.1.1恒重处理

取大小适宜的两个瓷坩埚（标号1、2）置于高温炉中，在600℃下灼烧0.5h，冷却至200℃以下后，取出，放入干燥器中冷却置室温，精密称量，并重复灼烧至恒重。

6.1.2 样品称量

分别向1、2号瓷坩埚中加入奶粉5.0001g和5.0000g后，精密称量。

6.1.3 预灰化

把两个坩埚置于电炉上，半盖坩埚盖，以小火加热至样品充分炭化无

黑烟产生，取下坩埚，各加入两滴HNO3溶液。

6.1.4 正式灰化

炭化后，把两个坩埚放置在600℃高温炉中灼烧至无炭粒，打开炉门，将坩埚移至炉口处冷却至200℃左右，放入干燥器中冷却至室温，称量。重复灼烧至前后两次称量之差不超过0.5mg为恒重。

6.1.5制备灰化液

分别向1、2号坩埚中加入盐酸2mL溶解，并移入100mL容量瓶中，用少量水洗坩埚，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀，制成1、2号灰化液备用。

6.1.6 制备空白液

向100mL容量瓶中加入2mL盐酸，以水定容至刻度。

6.2 样品的消化处理

6.2.1 制备消化液

称取5.1300g奶粉移入干燥的100mL定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，2g 硫酸钾及20mL浓硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，在继续加热0.5h.取下放冷，慢慢加入20mL水。放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀，制成消化液备用。

6.2.2 制备空白液

向100mL容量瓶中加入20mL蒸馏水，以水定容至刻度。

6.3 比色法测铁

6.3.1 铁标准曲线的绘制

分别吸取铁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml放入比色管中，加入1ml 抗坏血酸和2ml邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60℃水浴下加热15min后，冷却。

以“0”管溶液为参比溶液，在520nm下测各管A值并绘制曲线。

6.3.2 灰化液中铁含量的测定

分别从1、2号各吸取3个10.00mL灰化液和1个10.00mL空白液于比色管中，加入1mL抗坏血酸和2mL邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60℃水浴下加热15min后，冷却。

参比溶液：吸取10.00mL灰化液于比色管中，加入1mL抗坏血酸，不加邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60℃水浴下加热15min后，冷

却。

将比色管中的有色溶液依次注入比色皿中，在520nm下测各管的吸光

度。1号记为：A

灰1 A

灰2

A

灰3

A

灰空

；2号记为A

灰1´

A

灰2´

A

灰3´

A

灰

空´

。

6.3.3 消化液中铁含量的测定

吸取3个10.00mL消化液及1个10.00mL空白液于比色管中，加入1mL 抗坏血酸和2mL邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60℃水浴下加热15min后，冷却。

参比溶液：吸取10.00mL消化液于比色管中，加入1mL抗坏血酸，不加邻菲罗啉，并定容至25mL，混匀，然后60℃水浴下加热15min后，冷却。

将各比色管中的有色溶液依次注入比色皿中，在520nm下测各管溶液

的吸光度值A

消1 A

消2

A

消3

A

消空

。

7 数据整理

7.1 样品中灰分的测定

表1-灰化样品及坩埚质量

m样（g）m坩埚恒重前(g) m坩埚恒重后(g) m坩锅+样品(g)

5.0479 92.4651 93.3881 98.4360

7.2 比色法测铁

7.2.1 铁标准曲线的绘制

表2-铁标准溶液曲线绘制测定数据表

V(ml) 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00

A 0.000 0.153 0.323 0.475 0.655 0.790

图1-铁标准溶液曲线