尼泊金甲酯化妆品防腐剂抑菌效果的研究

尼泊金甲酯化妆品防腐剂抑菌效果的研究
王军锋
安徽科技学院应用化学系，安徽凤阳（233100）
E-mail：Junfengwang0815@
摘要：采用防腐剂效力测试法观察了尼泊金甲酯化妆品防腐剂在不同浓度和不同时间对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、绿脓杆菌的抑制情况。

实验结果表明，尼泊金甲酯有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉浓度分别为：0.04%、0.06%、0.08%、0.10%，而在试验浓度范围内不能有效抑制绿脓杆菌。

关键词：尼泊金酯，化妆品，防腐剂
化妆品在存储和使用过程中，极易受微生物的污染而导致腐败。

防止化妆品由于微生物污染而产生对人体皮肤的危害及产品的变质、发霉，当前最有效的办法就是添加防腐剂，防腐剂是能够抑制微生物的生长、繁殖的一类化学药剂[1]。

尼泊金酯亦称对羟基苯甲酸酯，是国际上公认的广谱、高效、低毒，已被广泛应用于化妆品、调味品、腌制品、酱制品、饮料、啤酒、黄酒以及果蔬保鲜等领域。

常用的有尼泊金甲酯、乙酯、丙酯三种，其中使用的最多的是甲酯。

尼泊金甲酯防腐剂尽管低毒，但使用量过大便会影响人体健康。

因此，国家对化妆品防腐剂的添加量有着严格的控制，我国《化妆品卫生标准》中对尼泊金酯最大允许使用浓度规定如下：混合酯10%，单一酯0.4%[2]。

目前，国内化妆品防腐剂抑菌试验报道甚少，为了帮助厂家选择对人体健康危害小，抑菌效果好的防腐剂，本文采用国外防腐效力试验法对尼泊金甲酯化妆品防腐剂抑菌进行研究。

现将结果报道如下。

1. 材料与方法
1.1 样品
尼泊金甲酯(天津市科密欧化学试剂开发中心)，化妆品：雪花膏(自制，不含防腐剂)。

1.2 菌种
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、绿脓杆菌(西安微生物研究所提供)。

1.3 菌悬液
将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌分别接种肉汤培养液、37℃培养24h，白色念珠菌、绿脓杆菌分别接种沙保弱液体培养基、25℃培养5d ，黑曲霉接种察氏液体培养基、25℃培养6d，配制成一定量的菌悬液。

1.4 防腐剂效力测试[3]
用无菌锥形瓶称取一定量的未加防腐剂的化妆品，加不同浓度防腐剂(0.04%、0.06%、0.08%、0.10%、0.20%)充分搅拌均匀，加进已制备好的菌悬液(见表1)。

表1 防腐剂效力测试法的检样配比
Table1 the material constitutes of antiseptic effectiveness assay
菌株菌量(CFU/mL) 菌液(mL) 化妆品(g/盒) 防腐剂(mL) 大肠杆菌 6
金黄色葡萄球菌106 0.4 10 0.1 白色念珠菌105 0.3 10 0.1 黑曲霉104 0.3 10 0.1 绿脓杆菌106 0.3 20 1.0
反复搅拌待测，分别于6h、24h、48h、72h、5d、7d后进行测定，细菌计数用卵磷脂─
吐温80─营养琼脂。

每个菌柱另设一组表，采用普通营养琼脂,只加菌悬液，不加防腐剂。

1.5 菌落总数的测定
菌落总数的测定方法按照国标GB4789.2-94测定[4]
2. 结果与讨论
2.1微生物在不含防腐剂化妆品中的生长情况
分别将五种配制好的菌悬液按照表1中的比例加入到一定比例的雪花膏盒子中(不加防
腐剂)分别在6h、24h、48h、72h、5d、7d涂布平板，培养，计数。

结果见表2。

表2 微生物在不含防腐剂化妆品中的生长情况(×103CFU/ml)
Table2 The result of growth Microorganism with no Antiseptic
时间大肠杆菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌黑曲霉绿脓杆菌
6h 556 48906 98.0 5.6 560.3 24h 6020 245.3 76.5 6.5 656.3 9786 35201 203.1 4.5 978.5 48h
72h 10023 105.6 456 3.2 10028 5d 23152 4503 678 2.36 25530 7d 53760 2406 1228.8 1.43 46826 由表2可知，大肠杆菌、白色念珠菌在不含防腐剂的化妆品中，随着放置时间的延长菌
量增加，原因是化妆品中所含营养物质超过细菌生长需要量。

金黄色葡萄球菌、黑曲霉、绿
脓杆菌随着存放时间的延长菌量减少。

可能原因是化妆品中所含化学物质不适宜这三种菌的
生长[5]。

2.2 尼泊金甲酯对五种菌效力测试结果
表3 尼泊金甲酯对大肠杆菌效力测试结果(减少率：%)
Table 3 the result of Nipagin Ester restraining E.coli
防腐剂浓度(%)
时间
24h 100 100 100 100 100 48h 100 100 100 100 100 72h 100 100 100 100 100 5d 100 100 100 100 100 7d 100 100 100 100 100
表4 尼泊金甲酯对金黄色葡萄球菌效力测试结果(减少率：%)
Table4 the result of Nipagin Ester restraining steph aureus
防腐剂浓度(%)
时间
6h 57.70 60.37 72.47 80.55 89.47 24h 75.47 87.47 89.56 91.22 93.45 48h 94.77 100 97.55 98.22 99.98 72h 100 100 100 100 100 5d 100 100 100 100 100 7d 100 100 100 100 100
表5 尼泊金甲酯对白色念珠菌效力测试结果(减少率:%)
Table 5 the result of Nipagin Ester restraining candida albicans
防腐剂浓度(%)
时间
24h 98.74 99.32 99.96 99.92 100 48h 99.98 99.99 100 100 100 72h 100 100 100 100 100 5d 100 100 100 100 100 7d 100 100 100 100 100
表6 尼泊金甲酯对黑曲霉效力测试结果(减少率：%)
Table 6 the result of Nipagin Ester restraining aspergillus niger
防腐剂浓度(%)
时间
0.04 0.06 0.08 0.10 0.20
6h 73.24 74.66 64.77 73.24 70.65 24h 70.28 78.17 85.35 88.10 72.51 48h 64.35 72.69 81.47 88.64 80.41 72h 70.20 80.41 90.74 95.12 89.71 5d 85.34 92.76 95.71 100 97.61 7d 90.73 97.12 100 100 100
表7 尼泊金甲酯对绿脓杆菌效力测试结果(减少率：%)
Table 7 the result of Nipagin Ester restraining B.green rod
防腐剂浓度(%)
时间
24h 35.14 37.94 28.47 39.51 47.53 48h 39.58 47.24 48.97 49.57 50.71 72h 50.76 58.74 57.61 70.27 80.1 5d 80.12 87.21 79.53 87.61 84.22 7d 84.55 90.10 89.33 95.44 90.44
尼泊金甲酯是通过破坏微生物的细胞膜,使细胞内的蛋白质变性,来抑制菌落的生长。

由
表3─7分别可以看出，当防腐剂的浓度为0.02%时，大肠杆菌减少率6h 已达100%；当防
腐剂浓度为0.06%时，金黄色葡萄球菌减少率48h已达100%；当防腐剂浓度为0.08%时，
白色念珠菌减少率48h已达100%；当防腐剂浓度为0.10%时，对黑曲霉减少率5d已达100%；
而尼泊金酯在国标允许范围内未能将绿脓杆菌在7d内抑制完全(减少率最高才达92.10%)即
尼泊金酯不能有效抑制绿脓杆菌。

3. 结论
通过对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、绿脓杆菌防腐剂效力测试，
结果表明尼泊金甲酯在国标范围内,能够有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、
黑曲霉，而不能抑制绿脓杆菌，其有效抑制浓度见表8。

表8 尼泊金甲酯对5种菌的有效抑制浓度
Table 8 validity consistency of Bacteriostatic of Nipagin Ester
菌种大肠杆菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌黑曲霉绿脓杆菌
有效浓度0.04% 0.06% 0.08% 0.10% — 由此可见，防腐剂加量浓度为0.10%时，均能抑制以上四种菌在化妆品中的生长。

参考文献
[1] 李辉.化妆品中防腐剂的研究[J].日用化学品科学[J], 1996,2(1):27
[2] 万素英.食品防腐与食品防腐剂[Ｍ].北京:中国轻工业出版社,1998:204
[3] 王华，周淑玉.化妆品防腐剂及防腐效力试验,化妆品卫生检验[M].天津：天津大学出版社，1994：306
[4] GB4789.2-49,食品卫生微生物学检验菌落总数测定[S]
[5] 符晓梅,封幼玲.两种方法测定化妆品防腐剂抑菌效果及评价[J].环境与健康杂志,2000,17(3):167~170 Research of the Bacteriostatic Effects of Cosmetic Antiseptic
of Nipagin Ester
Wang Junfeng
department of applied chemistry，Anhui science and technology university，FengYang，Anhui
（233100）
Abstract
The bacteriostatic effects of cosmetic antiseptic of Nipagin Ester, on observed standard bacteria, such
as E.coli, steph aureus, candida albicans, aspergillus niger, B.green rod, treated by different antiseptic concentrations of 0.04%, 0.06%, 0.08%, 0.10%, and 0.20% and with different exposure periods of
6,24,48,and 72 hours, and 5,7 days, were determined with antiseptic effectiveness assay. The results showed that, the bacteriostatic effective concentrations detected by antiseptic effectiveness assay were
0.04%, 0.06%, 0.08%, and 0.10% respectively, invalid antiseptic effectiveness detected by antiseptic effectiveness assay, only abserved in B.Green rod exposed to Nipagin Ester.
Keywords：Nipagin Ester，Cosmetic，Antiseptic
作者简介：王军锋（1979-）男，陕西乾县人，安徽科技学院助教。