农残检测培训

正确使用移液枪的手势
迅速把最后加入底物的样 品摇匀放入比色池内，迅 速盖上盖章，按样品检测 。
四、结果打印及判定
检测结果为40%以下为合格样品；40—50%为可疑农药残留超标样
品；50%以上为农药残留超标样品；
注意：对超过或者接近限量值的样品（即40%以上的样品），应重复进
行测定。
检测注意事项
存。建议酶试剂从冰箱拿出→常温放臵30分钟再使用。
农残检测试剂保存
请参考试剂厂家说明对试剂进行保存。
茶青农药残留检测所需试剂：缓冲溶液、显色剂、底物
农残速测仪操作规程 一、对照测量的具体操作方法： 取3毫升缓冲液加入比色皿中，加入100微升酶试剂，加入100微升显色剂，摇匀静 臵10分钟，加入100微升底物，迅速放入比色池内，盖上样品仓盖，按“对照测量”进 入倒计时，倒计时结束后，在屏幕的下方可以看到具体数值。 二、对照测量要求 要测量样品，必须有△AC吸光值。第一次使用本机，更换了每小盒酶试剂（蓝白 色瓶装）试剂时，进行“对照测量”，以得到△AC吸光值。 标准样△AC吸光度值的要求： 标准样△AC吸光度值△A0的值国标规定应该0.3—0.7之间才能进行样品测量，否 则重做对照。 造成△AC吸光度值达不到要求的原因： 环境温度过低，酶试剂的温度过低，可延长酶试剂从冰箱出来后放臵的时间，可 以适当延长加入酶液和显示剂后的静臵时间，如果酶过期，则该方法无效，应更换检 测试剂。
湄潭县茶产业发展中心 2015年茶青农药残留检测培训
2016/5/13
一
培训 内容
农药残留快速检测定义、标准 农药残留的快速检测工作的设备及辅助仪器 农残检测的前准备工作、药剂配置、操作规程 农残检测注意事项
二 三 四
农药残留快速检测定义 1. 实验准备简便，使用的试剂较少，配臵好的试剂保存期长； 2. 样品前处理简单； 3. 分析方法简单，准确和快速。 4. 属于定性检测：即快速地得出被检样品中是否农药残留超标，检测结果通常以 抑制率、阴性或阳性表述。检测结果阴性或抑制率<某值为合格。 农药残留快速检测标准 1.GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸甲酯类农药残留的快速检测。 2.NYT 448-2001 蔬菜上有机磷和氨基甲酸醋类农药残毒快速检测方法。 其他：GB 8855-1988 新鲜水果和蔬菜的取样方法。
一、前处理需要注意哪些问题？
1、剪得太碎（茶叶最好不要剪，如春茶（芽茶或一芽1-3叶），只需从叶梗处剪下，
保持每个叶片完整；如夏秋茶茶叶较大的尽量选择一芽1-2叶部份）。原因是：茶叶为易 泡物质，如把茶叶子剪碎，容易造成茶叶里的其他物质溶解于样品中，对检测结果造成一 定的影响 2、浸泡、震荡时间过长。原因：时间过长除了把叶片上是否含有的农药残留浸在样 品中外，茶叶中的其他物质也可能溶解于其中，对检测结果造成一定的影响。
二、提取液/缓冲液配制时，比较难溶解； 技巧： 1、取纯净水； 2、将粉末缓缓倒入，越慢越好，同时用玻璃棒搅拌； 3、使用塑料瓶，盖上盖子摇晃；
检测注意事项
三、试剂如何保存？ 1. 未配臵的试剂，放臵于0-5℃冰箱保存，保质期为6个月。 2. 已配臵好的试剂（显色剂、酶液、底物）放臵于0-5度冰箱保存， 保存期：1-2周。 3 .缓冲液可室温保存，保存期：1-2周。 检测试剂过保存期后，不要立即丢弃，一般来讲，保存得当，试剂的可用时间 会相对延长2-4周左右。在过期后，请先做一次空白对照，确定失效后才停用（ 如果对照△AC吸光值在0.3—0.7之间，说明药剂还可继续使用，反之应立即换 药剂）。
茶青农药残留的快速检测工作的设备及辅助仪器 序号
1
2 3 4 5 6 7 8 9
名称
办公桌椅
农残速测仪WT-51A 农药残留检测试剂 打印机 冰箱
单位
套
套 盒 台 台
用途
检测仪放臵、检测平台
酶抑制率法农残速测 茶青农药残留检测 WT-51A仪器自备有 试剂保存 、抽检样品保存 检测需要 计时 过滤样品前处理过程产生的碎片， 大颗粒等
备注
玻璃器皿、烧杯、试管、锥形瓶、移液枪、 套 吸嘴、容量瓶、比色皿、天平等 定时器 滤纸 其他 个 袋
农药残留的快速检测原理——分光光度法 分光光度法（酶抑制率法）检测原理 1、在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用 ，其抑制率与农药的浓度呈正相关。 2、正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产物与显色 剂反应产生黄色物质。 3、用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过 抑制率可以判断出样品是否有高剂量有机磷或者氨基甲酸酯类农药的存在。
三、样品测量 1、用电子天平称取1—2克样品（茶样）于小烧杯中，建议茶青不 要从叶子上剪碎，按1：10的比例加入缓冲液，浸提1—3分钟； 2、用移液枪取上清液3毫升于比色皿中； 3、加入100微升酶试剂； 4、加入100微升显色剂； 5、摇匀静臵10分钟； 6、加入100微底物； 7、迅速放入比色池内，盖上样品仓盖，按“样品测量”进入倒计 时； 8、倒计时结束后，在屏幕的右方可以看到具体的数值，即为酶抑 制率（检测结果）。
农残检测的试剂配制 一、仪器预热：由于仪器的光源等部件需要一定的预热，为确保测量结果的准 确性，建议仪器开机20分钟后再使用。 二、试剂的配制： 1、一包缓冲液（白色塑料袋装）加入500毫升蒸馏水溶解，转移至大口
塑料瓶中常温保存。
2、一瓶显色剂(紫色瓶装)加入10.5毫升缓冲液溶解，冰箱0—5℃保存。 3、一瓶底物（红白色瓶装）加入3.1毫升蒸馏水溶解，冰箱0—5℃保存 。 4、一瓶酶试剂（蓝白色瓶装）加入3.1毫升缓冲液溶解，冰箱0—5℃保
左图：湄潭县茶青 市场使用的农药残 留快速检测仪器之 一：WT-51A
农 残 速 测 仪 检 测 流 程 图
农残检测的前准备工作
1、纯净水（哇哈哈纯净水等）替代蒸馏水
2、试剂即配即用 3、试剂保存0-5度冰箱内保存。 4、提前20分钟开机预热 5、开机后检测仪器光源、仪器屏幕显示通道等是否正常 6、仪器开机前不可有样品比色皿在仪器内。