不同猪瘟疫苗免疫抗体比较与分析
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分别采集注射一针和两针猪瘟脾淋苗和细胞苗
的 ２４００ 头商品猪的血样，分离血清，通过 ＥＬＩＳＡ 检
测方法进行猪瘟抗体合格率检测，结果见表 ２。
表1 方法 血清数 合格数 合格率
不同检测方法比较猪瘟抗体合格率
ＥＬＩＳＡ
ＩＨＡ
１２００
１２００
１０３８
９９１
８６．５%
８２．６%
表 2 不同疫苗、不同免疫次数抗体合格率调查的结果
疫苗 免疫次数 血清清数 抗体合格数 抗体合格率 ／%
脾淋苗
１
２
１２００ １２００
９８８
１０８１
８２．３
９０．１
细胞苗
１
２
１２００
１２００
８５８
１０７９
７１．５
８９பைடு நூலகம்９
猪瘟脾淋苗一免和二免的血清抗体合格率分别
为 ８２．３%（９８８／１２００）和 ９０．１%（１０８１／１２００），抗体合
格率有所上升；猪瘟细胞苗一免和二免的血清抗体合
猪瘟是由猪瘟病毒（ＨＣＶ）引起的急性、热性和高 度接触性传染病，该病各种年龄猪均易发生，一年四 季流行，其临床特征为：急性呈败血性变化，实质器 官出血、坏死和梗死，发病率和死亡率高慢性呈纤维 素性坏死性肠炎，后期常继发副伤寒及巴氏杆菌病。 目前，猪瘟最有效的控制方法是疫苗免疫，从 ２００７ 年起，猪瘟被农业部列为国家强制免疫病种［１］。
誗兽医科技
不同猪瘟疫苗免疫抗体比较与分析
陈 红 徐春志 袁翠霞 白 璧 方 英 贵州省贵阳市动物疫病预防控制中心 （５５００８１）
中图分类号： Ｓ８５８．２８５．３， Ｓ８５２．４＋３ 文献标识码： Ｂ 文章编号： １００２－２９９６（２０１４）０７－００５７－０２
摘 要 ：为有效评估猪瘟脾淋苗和细胞苗两种疫苗在贵阳市的免疫效 果，笔者采用间接 ＥＬＩＳＡ 检测方法对 １２００ 份猪瘟脾淋苗血清和猪瘟 灭活疫苗免疫血清进行猪瘟抗体合格率比较与分析。结果表明，猪 瘟脾淋苗一免和二免、猪瘟细胞苗一免和二免的血清抗体合格率分 别为 ８２．３%、９０．１%、７１．５%和 ８９．９%，猪瘟脾淋苗一免效果优于猪瘟 细胞苗一免，两种疫苗二免抗体合格率基本持平。根据调查结果，笔 者提出了有针对性的免疫建议。 关键词： 猪瘟疫苗，抗体合格率，比较与分析
１ 材料和方法
１．１ 血清标本及检测试剂 采集贵阳市规模养猪场一免和二免的猪瘟脾淋
苗和猪瘟细胞苗血液样本各 １２００ 头份，使用常规方 法分离血清，－２０℃保存。
猪瘟病毒正向间接血凝试验诊断试剂盒购自中国 农业科学院兰州兽医研究所；猪瘟病毒 ＥＬＩＳＡ 抗体检 测试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。 １．２ 检测方法
猪瘟抗体效价检测是科学评价免疫质量的有效 手段，也是科学免疫程序的依据。目前，我国使用的 猪瘟疫苗为脾淋苗和细胞苗。不同的疫苗、不同的 免疫次数、采用不同的检测方法都可能使结果差异 显著。本试验采用正向间接血凝试验和间接 ＥＬＩＳＡ 试验对猪瘟脾淋苗和细胞苗血清进行猪瘟抗体检测 和比较分析，现报告如下：
正向间接血凝（ＩＨＡ）试验：按农业部猪瘟诊断技术 规程和试剂盒说明书进行操作，抗体≥１∶ ３２ 为合格。
猪瘟病毒 ＥＬＩＳＡ 抗体检测试剂盒：按照说明书 操作，即先将 １∶ ４０ 倍稀释的血清加到已预包被有猪 瘟抗原的微量反应板，孵育并反复洗涤，再加入羊抗 猪二抗，孵育并反复洗涤，随后加入底物四甲基联苯 胺（ＴＭＢ）溶液，最后滴加浓硫酸终止酶促显色反应，
采用酶标仪测定 ＯＤ６３０ 值，试验成功的条件是阳性对 照孔平均 ＯＤ６３０ 值≥０．６，阴性对照孔平均 ＯＤ６３０ 值必 须＜０．３。样本 ＯＤ６３０ 值≥０．３５ 判为阳性，样本 ＯＤ６３０ 值＜０．３５ 判为阴性。
２ 结果与分析
２．１ 不同检测方法的比较 对 １２００ 头份免疫猪瘟疫苗的血清样本，分别用
ＥＬＩＳＡ 和 ＩＨＡ 方法进行检测猪瘟抗体合格率。 经 ＥＬＩＳＡ 检 测 抗 体 合 格 率 为 ８６．５%
（１０３８／１２００）， 经 ＩＨＡ 检 测 抗 体 合 格 率 为 ８２．６% （９９１／１２００）。ＥＬＩＳＡ 检测抗体合格率高出 ＩＨＡ 检测 抗体合格率 ３．９ 个百分点。 ２．２ 不同疫苗、不同免疫次数抗体合格率的比较
格率分别为 ７１．５%（８５８／１２００） 和 ８９．９%（１０７９／１２００），
抗体合格率明显上升。具体结果见表 ２ 和图 １。
３ 讨论
（１）笔者通过对 ＥＬＩＳＡ 和 ＩＨＡ 检测方法的比较，证 明 ＥＬＩＳＡ 检测方法敏感性要高于 ＩＨＡ 检测方法，可作 为首选检测方法，这与苗得园［２］报道结果一致。因为 ＩＨＡ 保质期较短，对于样品量较少的实验室，存在一 定的浪费现象。另一方面，ＩＨＡ 检测方法在结果判断
2014 年 7 月下旬刊 57
的 ２４００ 头商品猪的血样，分离血清，通过 ＥＬＩＳＡ 检
测方法进行猪瘟抗体合格率检测，结果见表 ２。
表1 方法 血清数 合格数 合格率
不同检测方法比较猪瘟抗体合格率
ＥＬＩＳＡ
ＩＨＡ
１２００
１２００
１０３８
９９１
８６．５%
８２．６%
表 2 不同疫苗、不同免疫次数抗体合格率调查的结果
疫苗 免疫次数 血清清数 抗体合格数 抗体合格率 ／%
脾淋苗
１
２
１２００ １２００
９８８
１０８１
８２．３
９０．１
细胞苗
１
２
１２００
１２００
８５８
１０７９
７１．５
８９பைடு நூலகம்９
猪瘟脾淋苗一免和二免的血清抗体合格率分别
为 ８２．３%（９８８／１２００）和 ９０．１%（１０８１／１２００），抗体合
格率有所上升；猪瘟细胞苗一免和二免的血清抗体合
猪瘟是由猪瘟病毒（ＨＣＶ）引起的急性、热性和高 度接触性传染病，该病各种年龄猪均易发生，一年四 季流行，其临床特征为：急性呈败血性变化，实质器 官出血、坏死和梗死，发病率和死亡率高慢性呈纤维 素性坏死性肠炎，后期常继发副伤寒及巴氏杆菌病。 目前，猪瘟最有效的控制方法是疫苗免疫，从 ２００７ 年起，猪瘟被农业部列为国家强制免疫病种［１］。
誗兽医科技
不同猪瘟疫苗免疫抗体比较与分析
陈 红 徐春志 袁翠霞 白 璧 方 英 贵州省贵阳市动物疫病预防控制中心 （５５００８１）
中图分类号： Ｓ８５８．２８５．３， Ｓ８５２．４＋３ 文献标识码： Ｂ 文章编号： １００２－２９９６（２０１４）０７－００５７－０２
摘 要 ：为有效评估猪瘟脾淋苗和细胞苗两种疫苗在贵阳市的免疫效 果，笔者采用间接 ＥＬＩＳＡ 检测方法对 １２００ 份猪瘟脾淋苗血清和猪瘟 灭活疫苗免疫血清进行猪瘟抗体合格率比较与分析。结果表明，猪 瘟脾淋苗一免和二免、猪瘟细胞苗一免和二免的血清抗体合格率分 别为 ８２．３%、９０．１%、７１．５%和 ８９．９%，猪瘟脾淋苗一免效果优于猪瘟 细胞苗一免，两种疫苗二免抗体合格率基本持平。根据调查结果，笔 者提出了有针对性的免疫建议。 关键词： 猪瘟疫苗，抗体合格率，比较与分析
１ 材料和方法
１．１ 血清标本及检测试剂 采集贵阳市规模养猪场一免和二免的猪瘟脾淋
苗和猪瘟细胞苗血液样本各 １２００ 头份，使用常规方 法分离血清，－２０℃保存。
猪瘟病毒正向间接血凝试验诊断试剂盒购自中国 农业科学院兰州兽医研究所；猪瘟病毒 ＥＬＩＳＡ 抗体检 测试剂盒购自武汉科前动物生物制品有限责任公司。 １．２ 检测方法
猪瘟抗体效价检测是科学评价免疫质量的有效 手段，也是科学免疫程序的依据。目前，我国使用的 猪瘟疫苗为脾淋苗和细胞苗。不同的疫苗、不同的 免疫次数、采用不同的检测方法都可能使结果差异 显著。本试验采用正向间接血凝试验和间接 ＥＬＩＳＡ 试验对猪瘟脾淋苗和细胞苗血清进行猪瘟抗体检测 和比较分析，现报告如下：
正向间接血凝（ＩＨＡ）试验：按农业部猪瘟诊断技术 规程和试剂盒说明书进行操作，抗体≥１∶ ３２ 为合格。
猪瘟病毒 ＥＬＩＳＡ 抗体检测试剂盒：按照说明书 操作，即先将 １∶ ４０ 倍稀释的血清加到已预包被有猪 瘟抗原的微量反应板，孵育并反复洗涤，再加入羊抗 猪二抗，孵育并反复洗涤，随后加入底物四甲基联苯 胺（ＴＭＢ）溶液，最后滴加浓硫酸终止酶促显色反应，
采用酶标仪测定 ＯＤ６３０ 值，试验成功的条件是阳性对 照孔平均 ＯＤ６３０ 值≥０．６，阴性对照孔平均 ＯＤ６３０ 值必 须＜０．３。样本 ＯＤ６３０ 值≥０．３５ 判为阳性，样本 ＯＤ６３０ 值＜０．３５ 判为阴性。
２ 结果与分析
２．１ 不同检测方法的比较 对 １２００ 头份免疫猪瘟疫苗的血清样本，分别用
ＥＬＩＳＡ 和 ＩＨＡ 方法进行检测猪瘟抗体合格率。 经 ＥＬＩＳＡ 检 测 抗 体 合 格 率 为 ８６．５%
（１０３８／１２００）， 经 ＩＨＡ 检 测 抗 体 合 格 率 为 ８２．６% （９９１／１２００）。ＥＬＩＳＡ 检测抗体合格率高出 ＩＨＡ 检测 抗体合格率 ３．９ 个百分点。 ２．２ 不同疫苗、不同免疫次数抗体合格率的比较
格率分别为 ７１．５%（８５８／１２００） 和 ８９．９%（１０７９／１２００），
抗体合格率明显上升。具体结果见表 ２ 和图 １。
３ 讨论
（１）笔者通过对 ＥＬＩＳＡ 和 ＩＨＡ 检测方法的比较，证 明 ＥＬＩＳＡ 检测方法敏感性要高于 ＩＨＡ 检测方法，可作 为首选检测方法，这与苗得园［２］报道结果一致。因为 ＩＨＡ 保质期较短，对于样品量较少的实验室，存在一 定的浪费现象。另一方面，ＩＨＡ 检测方法在结果判断
2014 年 7 月下旬刊 57