新生儿溶血三项检测的临床应用000
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个基因者称AB型，有H基因而无A、B基因为O型 假如母“O”型，父“A”型（纯合子或杂合子）
母基因 型OO 子基因型 子血型 AO A 父基因 型AA 母基因 型OO 父基因 型AO
AO 或 OO A 或 O
ABO血型抗体
正常情况下，红细胞上缺乏A或B抗原时，血浆 中存在相应的抗体即抗A抗体或抗B抗体为天然抗 体，以IgM为主，实质是由于机体与广泛存在的类 ABO物质接触产生。
定血型及交叉配血次测试验中使用的红细胞
新生儿红细胞抗体放散试验结果意义
指示红细胞 AC BC OC + + + + 意义 放散出IgG抗-A 放散出IgG抗-B 放散出IgG抗-AB或同时放散 IgG抗-A或IgG抗-B 放散出ABO血型以外的抗体 没有放散出抗体
+-
+-
+ -
新生儿血型血清学检查结果分析
抗人免疫球蛋白 自身抗体
直接Coombs试验
注意事项
• 标本采取后应立即进行试验，延迟试验或中途停止可使 抗体从细胞中丢失。 抗球蛋白试剂应按照说明最适稀释度使用，否则可产生前 带或后带现象而误认为阴性结果。 受检红细胞一定要用盐水洗涤3次，除去红细胞悬液混杂 的血清蛋白，以防止假阴性结果。 最好对阴性结果进行核实，即在该试管中再加1滴IgG致敏 红细胞如结果为阳性，则表示试管内的抗球蛋白试剂未被 消耗，阴性结果可靠。 如需了解体内致敏红细胞的Ig类型，则可分别以抗IgM或 抗C3单价抗球蛋白试剂进行试验。
致敏红细胞和血型抗体测定
抗人球蛋白试验
抗人球蛋白试验：
又称Coombs’试验， 利用抗球蛋白抗体作为第二抗体， 连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。经 常用作试验的有两类方法。 • 直接试验：是检查被检红细胞上有无已结合的不 完全抗体（包括IgG类的抗A或抗B）。 • 间接试验：是检查血清中游离的不完全 抗体 （包括IgG类的抗A或抗B）。
如果由于输血、怀孕或类ABO物质的刺激使 抗体浓度增加，这种免疫抗A或抗B抗体多半为IgG， 特别是O型母亲。
ABO血型与抗体
血型
O A B
基因型
OO AA AO BB BO AB
血浆中可以存在的抗体
抗A抗体和抗B抗体 抗B抗体 抗A抗体 无
AB
ABO溶血病可发生在怀孕第一胎 自然界存在A或B血型物质如某些植物、寄生虫、 伤寒疫苗、破伤风及白喉类毒素等。 O型母亲在第一次妊娠前，已接受过A或B血型物 质的刺激，血中抗A或抗B (IgG)效价较高。 怀孕第一胎时抗体即可进入胎儿血循环引起溶血。 ABO血型不合中约20%发病
注意事项
• 当红细胞上的抗体分子数量在500个以上时在有利于抗球 蛋白与不规则抗体的结合，当红细胞上抗体数量较少，可 通过反复离心、摇摆，在离心的方法，增加抗原抗体的接 触，提高阳性率。 • 如果检测的抗体为补体依赖抗体，则必须加入新鲜AB型血 清. • 试剂：多特异性抗球蛋白试剂（IgG、C3d）；已知抗体血 清（用于检测特殊红细胞抗原）：5%已知抗原的红细胞盐 水悬液（用于检测血清中不完全抗体）；5%D阳性红细胞 盐水悬液（阳性对照用）；不完全抗D血清：AB型血清。
热放散试验注意事项
鉴定放散液应与原抗原抗体反应方法相同，如抗体较弱，可用酶处理 红细胞做试验 放散液用生理盐水制备不稳定，若要保存放散液，用AB血清进行放散
受检血清与吸收用红细胞比例要高一些，若抗体弱，可以充分与红细 胞结合
加热放散温度要准确，如温度降低，放散出的抗体又会重新与抗原结 合 放散抗体时，应不断摇动，促使抗体从抗原抗体复合物上分离下来
直抗 +/+/+/+ 游离 释放 试验 试验 + + + + + 抗筛 -/+ -/+ -/+ 结果 判定 确诊 确诊 确诊 可疑 可疑 否定 意义 ABO HDN,抗筛（+）存在ABO以外抗体 ABO HDN,抗筛（+）存在ABO以外抗体 ABO HDN,抗筛（+）存在ABO以外抗体 可疑ABO HDN 可疑ABO HDN 血清学实验未能证实
极少数可能是由于Rh阴性孕妇的母亲为Rh阳性，其 母怀孕时已使孕妇致敏，故第一胎发病（外祖母学 说）。
RhD血型不合者约5%发病
母亲对胎儿红细胞Rh抗原的敏感性不同。
临床表现
临床特点 发生频率 发生的母子血型 发生胎次 下一胎情况 临床表现 黄疸 ABO溶血病 常见 主要发生在母O型胎儿A 型或B型 第一胎可发病（约半数） 不一定 较轻 生后第2～3天出现 Rh溶血病 不常见 母缺少任一Rh抗原 Rh抗原 胎儿却具有该
第一胎不溶血
胎儿已 娩 出 胎儿Rh血 型同上胎 少量胎儿血 0.05～0.1ml
第二胎溶血
胎儿红细胞 溶血
Rh阴性母血
产生IgM抗 体
产生少量 IgG抗体
母血循环
产生大量 IgG抗体
胎盘
初发免疫反应
次发免疫反应
Rh溶血病发生在第一胎的情况
Rh阴性母亲既往输过Rh阳性血。
Rh阴性母亲既往有流产或人工流产史。
抗人球蛋白试验的应用 • 直接法： 常用于新生儿溶血症、自身免疫性溶血症、特发性自 身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等的检测。 • 间接法： 多用于检测母体Rh（D）抗体，以便及早发现和避免 新生儿溶血症的发生。亦可对红细胞不相容的输血所产生 的血型抗体进行检测。
游离试验
• 检查新生儿血清中游离抗体：
胎儿从父亲遗传而来的红细胞抗原恰为母亲所缺少,胎儿红 细胞通过胎盘进入母体血循环中刺激母体产生相应的血型 抗体（IgG）。 此抗体又可通过胎盘进入胎儿血循环中导致胎儿、新 生儿体内特异性抗原抗体反应，使红细胞致敏单核-吞噬 细胞系统内破坏而溶血。
ABO溶血病的病因和发病机制
ABO血型的遗传
有A基因者称A型，有B基因者称B型，同时有A、B二
放散试验原理 抗原与抗体的结合是可逆的。在物理和化学的条件 改变时，抗体又会从抗原抗体复合物上分离下来，将
抗体由抗原抗体复合物上分离下来的试验称为放散试
验。
放散液
用放散试验 技术将大量附着于红细胞上的 抗体放散到小量的生理盐水中，这种含有抗体
的溶液称为放散液
放散液中的抗体具有特异性，可以与相应 抗原结合，从而可以进一步确定抗体的特异性。
抗体释放试 验
测定患儿红 加热使患儿致敏红细胞结 细胞上结合 合的母体血型抗体释放于 的血型抗体 释放液中，该释放液与同 型成人红细胞混合，再加 入抗人球蛋白血清
游离抗体试 验
测定患儿血 在患儿血清中加入与其相 清中来自母 同血型的成人红细胞，再 体的血型抗 加入抗人球蛋白血清 体
新生儿溶血三项检测的临床应用
新生儿溶血病(Hemolytic disease of newborn HDN）,系 指母、婴血型不合引起的同族免疫性溶血;已发现的人类 29个血型系统中，以ABO血型不合最常见，Rh血型不合 较少见; 有报道:
占新生儿溶血比例 85.3% 14.6% 0.1% ABO溶血病 Rh溶血病 MN溶血病
同种异型抗体
抗人免疫球蛋白
间接Coombs试验
注意事项
• 如血清与相应红细胞在37 ℃水浴中致敏1小时，75%的抗 体吸附于红细胞上，如致敏2小时，则抗体吸附达95%；如 以低离子盐水溶液代替生理盐水配制5%红细胞悬液，则致 敏时间可减少至15-30分钟，但抗Fy抗体需较长的孵育时 间。 • 红细胞洗涤应迅速、彻底。要将生理盐水用力冲入管底， 使管底红细胞松散分离。要防止手上的蛋白质污染。1滴 1:4000稀释的血清可中和抗球蛋白血清1滴，导致假阳性 结果。 • 离心速度和时间非常重要，应取能使阳性对照管出现阳性 反应的最小离心力和最短离心时间。
d表示D阴性表现型; RHD和RHCE基因编码的单倍型中最常见的有8种形 式：Dce、dce，DCe、dCe、DcE、dcE、DCE和dCE。
Rh溶血病
红细胞缺乏D抗原称为Rh阴性，具有D抗原称为Rh阳 性，中国人绝大多数为Rh阳性。
母亲Rh阴性(无D抗原)，若胎儿Rh阳性可发生Rh溶血
病。 母亲Rh阳性(有D抗原)，但缺乏Rh系统其他抗原如E
血浆及组织中存在的A和B血型物质，部分中 和来自母体的抗体。 胎儿红细胞A或B抗原位点少， 抗原性弱，反应能力差。
Rh溶血病的病因和发病机制
Rh基因
编码Rh抗原的两个基因是RHD和RHCE; Rh基因系统的等位基因中最重要的是D、E、C、c、e 五种，不存在d基因;
RHD基因编码D抗原，RHCE基因的编码产物为C/c和 E/e，C和E一起遗传，排列为DCE；无d抗原;
热放散试验 主要应用ABO 血型系统新生儿溶血病及从 红细胞上洗脱掉IgM及IgG抗体。此方法制备抗 体最容易，但抗体回收较差，即如果抗体较弱， 放散试验可得到假阴性的结果。
其优点是适用于一般化验室，缺点是放散
液中含有较多游离白蛋白。
热放散试验方法 1.将疑有抗体包被的红细胞用生理盐水洗涤3-4次，最后一次 尽量吸取红细胞上层的生理盐水。 2.在压积红细胞中加等量生理盐水（也可用AB血清或6%牛血清 白蛋白），臵 56℃水浴箱中10分钟，期间摇动数次（15-30S 摇动1次）。 3.取出后立即高速离心，3000 转/分钟；取上清液（樱红色的 上清液即为放散液），与已知红细胞试验。按不同试验要求做 试验，将放散液作为抗体使用。
乙醚放散试验
主要应用于温自身抗体（IgG）或同种抗体
引起的直抗阳性，以及用于分离IgG抗体混合物
其最大优点是适用于检查获得性溶血性贫 血，鉴定Rh抗体效果最好，不宜用于 ABO 抗 体鉴定
酸放散
放散试验的应用
鉴定新生儿溶血病患儿红细胞上的抗体
在溶血性贫血和可疑输血反应中，用来鉴定产生直抗 阳性的红细胞 制备少量的单特异性抗体 从病人红细胞上去除抗体，制备可用于自身吸收或鉴
新生儿溶血三项检测
试验名称 改良直接抗 人球蛋白试 验(改良 Coombs试验) 目的 方法 结果判定 意义 测定患儿红 “最适稀释度”的抗人球 细胞上结合 蛋白血清与充分洗涤后的 的血型抗体 受检红细胞盐水悬液混合 红细胞凝聚 红细胞已致敏，为确 为阳性 诊实验 Rh溶血病阳性率高而 ABO溶血病低 红细胞凝聚 检测致敏红细胞的敏 为阳性 感试验，为确诊实验 Rh和ABO溶血病一般 均为阳性
将新生儿血清与标准A(B)细胞（与新生儿同种 红细胞） 做间接抗人球蛋白试验，阳性结果， 则表示有抗体存在。
新生儿血清中游离抗体检查结果 意义
指示红细胞 AC BC OC + + + + +++ 意义 游离的抗-A 游离的抗-B 游离的抗-A抗-B或-AB 游离的ABO系统以外的抗体 无游离抗体
放散试验
一般发生在第二胎；第一胎也可发病 大多数更严重 较重，严重者甚至死胎 24小时内出现并迅速加重
贫血
肝脾大 晚期贫血
轻
很少发生 很少发生
可有严重贫血或伴心力衰竭
多有不同程度的肝脾增大 可发生，持续至生后3～6周
实验室检查
血型检查
母子ABO和Rh血型
溶血检查
溶血时红细胞和血红蛋白减少，早期新生儿毛细血管血 血红蛋白<145g/L可诊断为贫血; 网织红细胞增高（第一天>6%）; 血涂片有核红细胞增多（>10/100个白细胞）; 血清总胆红素和未结合胆红素明显增加;
等，若胎儿有该抗原也可发生Rh溶血病。
RhD溶血病最常见 其抗原性强弱依次为D＞E＞C＞c＞e。 RhD溶血病最常见，其次为RhE，Rhe溶血病罕见。
Rh溶血病一般不发生在第一胎
由于自然界无Rh血型物质
首次妊娠末 期或胎盘剥 离
Rh阳性胎儿 血 >0.5～ 1ml
经过2-6月
以后
再次妊娠
孕期
Fra Baidu bibliotek几天内
•
• • •
注意事项
• 红细胞上吸附抗体太少,直接抗球蛋白试验可成假阴性反 应。 • 全凝集或冷凝集血液标本中有很多网织红细胞且抗球蛋白 试剂中含有抗转铁蛋白时，均可使红细胞发生凝集。 • 试剂：多特异性抗球蛋白试剂（IgG、C3d）；阳性对照细 胞[IgG抗D致敏的5%Rh(D)阳性红细胞生理盐水悬液。取3 人份O型红细胞等量混匀，经生理盐水洗涤后取压积红细 胞，加等量抗D血清，至37℃水浴致敏1小时，取出后用生 理盐水洗涤3次压积红细胞洗涤配成5%红细胞生理盐水悬 液]；阴性对照细胞（正常人5%红细胞生理盐水悬液。取3 人份O型红细胞等量混匀，经生理盐水洗涤后取压积红细 胞，配成5%红细胞生理盐水悬液）。
母基因 型OO 子基因型 子血型 AO A 父基因 型AA 母基因 型OO 父基因 型AO
AO 或 OO A 或 O
ABO血型抗体
正常情况下，红细胞上缺乏A或B抗原时，血浆 中存在相应的抗体即抗A抗体或抗B抗体为天然抗 体，以IgM为主，实质是由于机体与广泛存在的类 ABO物质接触产生。
定血型及交叉配血次测试验中使用的红细胞
新生儿红细胞抗体放散试验结果意义
指示红细胞 AC BC OC + + + + 意义 放散出IgG抗-A 放散出IgG抗-B 放散出IgG抗-AB或同时放散 IgG抗-A或IgG抗-B 放散出ABO血型以外的抗体 没有放散出抗体
+-
+-
+ -
新生儿血型血清学检查结果分析
抗人免疫球蛋白 自身抗体
直接Coombs试验
注意事项
• 标本采取后应立即进行试验，延迟试验或中途停止可使 抗体从细胞中丢失。 抗球蛋白试剂应按照说明最适稀释度使用，否则可产生前 带或后带现象而误认为阴性结果。 受检红细胞一定要用盐水洗涤3次，除去红细胞悬液混杂 的血清蛋白，以防止假阴性结果。 最好对阴性结果进行核实，即在该试管中再加1滴IgG致敏 红细胞如结果为阳性，则表示试管内的抗球蛋白试剂未被 消耗，阴性结果可靠。 如需了解体内致敏红细胞的Ig类型，则可分别以抗IgM或 抗C3单价抗球蛋白试剂进行试验。
致敏红细胞和血型抗体测定
抗人球蛋白试验
抗人球蛋白试验：
又称Coombs’试验， 利用抗球蛋白抗体作为第二抗体， 连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。经 常用作试验的有两类方法。 • 直接试验：是检查被检红细胞上有无已结合的不 完全抗体（包括IgG类的抗A或抗B）。 • 间接试验：是检查血清中游离的不完全 抗体 （包括IgG类的抗A或抗B）。
如果由于输血、怀孕或类ABO物质的刺激使 抗体浓度增加，这种免疫抗A或抗B抗体多半为IgG， 特别是O型母亲。
ABO血型与抗体
血型
O A B
基因型
OO AA AO BB BO AB
血浆中可以存在的抗体
抗A抗体和抗B抗体 抗B抗体 抗A抗体 无
AB
ABO溶血病可发生在怀孕第一胎 自然界存在A或B血型物质如某些植物、寄生虫、 伤寒疫苗、破伤风及白喉类毒素等。 O型母亲在第一次妊娠前，已接受过A或B血型物 质的刺激，血中抗A或抗B (IgG)效价较高。 怀孕第一胎时抗体即可进入胎儿血循环引起溶血。 ABO血型不合中约20%发病
注意事项
• 当红细胞上的抗体分子数量在500个以上时在有利于抗球 蛋白与不规则抗体的结合，当红细胞上抗体数量较少，可 通过反复离心、摇摆，在离心的方法，增加抗原抗体的接 触，提高阳性率。 • 如果检测的抗体为补体依赖抗体，则必须加入新鲜AB型血 清. • 试剂：多特异性抗球蛋白试剂（IgG、C3d）；已知抗体血 清（用于检测特殊红细胞抗原）：5%已知抗原的红细胞盐 水悬液（用于检测血清中不完全抗体）；5%D阳性红细胞 盐水悬液（阳性对照用）；不完全抗D血清：AB型血清。
热放散试验注意事项
鉴定放散液应与原抗原抗体反应方法相同，如抗体较弱，可用酶处理 红细胞做试验 放散液用生理盐水制备不稳定，若要保存放散液，用AB血清进行放散
受检血清与吸收用红细胞比例要高一些，若抗体弱，可以充分与红细 胞结合
加热放散温度要准确，如温度降低，放散出的抗体又会重新与抗原结 合 放散抗体时，应不断摇动，促使抗体从抗原抗体复合物上分离下来
直抗 +/+/+/+ 游离 释放 试验 试验 + + + + + 抗筛 -/+ -/+ -/+ 结果 判定 确诊 确诊 确诊 可疑 可疑 否定 意义 ABO HDN,抗筛（+）存在ABO以外抗体 ABO HDN,抗筛（+）存在ABO以外抗体 ABO HDN,抗筛（+）存在ABO以外抗体 可疑ABO HDN 可疑ABO HDN 血清学实验未能证实
极少数可能是由于Rh阴性孕妇的母亲为Rh阳性，其 母怀孕时已使孕妇致敏，故第一胎发病（外祖母学 说）。
RhD血型不合者约5%发病
母亲对胎儿红细胞Rh抗原的敏感性不同。
临床表现
临床特点 发生频率 发生的母子血型 发生胎次 下一胎情况 临床表现 黄疸 ABO溶血病 常见 主要发生在母O型胎儿A 型或B型 第一胎可发病（约半数） 不一定 较轻 生后第2～3天出现 Rh溶血病 不常见 母缺少任一Rh抗原 Rh抗原 胎儿却具有该
第一胎不溶血
胎儿已 娩 出 胎儿Rh血 型同上胎 少量胎儿血 0.05～0.1ml
第二胎溶血
胎儿红细胞 溶血
Rh阴性母血
产生IgM抗 体
产生少量 IgG抗体
母血循环
产生大量 IgG抗体
胎盘
初发免疫反应
次发免疫反应
Rh溶血病发生在第一胎的情况
Rh阴性母亲既往输过Rh阳性血。
Rh阴性母亲既往有流产或人工流产史。
抗人球蛋白试验的应用 • 直接法： 常用于新生儿溶血症、自身免疫性溶血症、特发性自 身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等的检测。 • 间接法： 多用于检测母体Rh（D）抗体，以便及早发现和避免 新生儿溶血症的发生。亦可对红细胞不相容的输血所产生 的血型抗体进行检测。
游离试验
• 检查新生儿血清中游离抗体：
胎儿从父亲遗传而来的红细胞抗原恰为母亲所缺少,胎儿红 细胞通过胎盘进入母体血循环中刺激母体产生相应的血型 抗体（IgG）。 此抗体又可通过胎盘进入胎儿血循环中导致胎儿、新 生儿体内特异性抗原抗体反应，使红细胞致敏单核-吞噬 细胞系统内破坏而溶血。
ABO溶血病的病因和发病机制
ABO血型的遗传
有A基因者称A型，有B基因者称B型，同时有A、B二
放散试验原理 抗原与抗体的结合是可逆的。在物理和化学的条件 改变时，抗体又会从抗原抗体复合物上分离下来，将
抗体由抗原抗体复合物上分离下来的试验称为放散试
验。
放散液
用放散试验 技术将大量附着于红细胞上的 抗体放散到小量的生理盐水中，这种含有抗体
的溶液称为放散液
放散液中的抗体具有特异性，可以与相应 抗原结合，从而可以进一步确定抗体的特异性。
抗体释放试 验
测定患儿红 加热使患儿致敏红细胞结 细胞上结合 合的母体血型抗体释放于 的血型抗体 释放液中，该释放液与同 型成人红细胞混合，再加 入抗人球蛋白血清
游离抗体试 验
测定患儿血 在患儿血清中加入与其相 清中来自母 同血型的成人红细胞，再 体的血型抗 加入抗人球蛋白血清 体
新生儿溶血三项检测的临床应用
新生儿溶血病(Hemolytic disease of newborn HDN）,系 指母、婴血型不合引起的同族免疫性溶血;已发现的人类 29个血型系统中，以ABO血型不合最常见，Rh血型不合 较少见; 有报道:
占新生儿溶血比例 85.3% 14.6% 0.1% ABO溶血病 Rh溶血病 MN溶血病
同种异型抗体
抗人免疫球蛋白
间接Coombs试验
注意事项
• 如血清与相应红细胞在37 ℃水浴中致敏1小时，75%的抗 体吸附于红细胞上，如致敏2小时，则抗体吸附达95%；如 以低离子盐水溶液代替生理盐水配制5%红细胞悬液，则致 敏时间可减少至15-30分钟，但抗Fy抗体需较长的孵育时 间。 • 红细胞洗涤应迅速、彻底。要将生理盐水用力冲入管底， 使管底红细胞松散分离。要防止手上的蛋白质污染。1滴 1:4000稀释的血清可中和抗球蛋白血清1滴，导致假阳性 结果。 • 离心速度和时间非常重要，应取能使阳性对照管出现阳性 反应的最小离心力和最短离心时间。
d表示D阴性表现型; RHD和RHCE基因编码的单倍型中最常见的有8种形 式：Dce、dce，DCe、dCe、DcE、dcE、DCE和dCE。
Rh溶血病
红细胞缺乏D抗原称为Rh阴性，具有D抗原称为Rh阳 性，中国人绝大多数为Rh阳性。
母亲Rh阴性(无D抗原)，若胎儿Rh阳性可发生Rh溶血
病。 母亲Rh阳性(有D抗原)，但缺乏Rh系统其他抗原如E
血浆及组织中存在的A和B血型物质，部分中 和来自母体的抗体。 胎儿红细胞A或B抗原位点少， 抗原性弱，反应能力差。
Rh溶血病的病因和发病机制
Rh基因
编码Rh抗原的两个基因是RHD和RHCE; Rh基因系统的等位基因中最重要的是D、E、C、c、e 五种，不存在d基因;
RHD基因编码D抗原，RHCE基因的编码产物为C/c和 E/e，C和E一起遗传，排列为DCE；无d抗原;
热放散试验 主要应用ABO 血型系统新生儿溶血病及从 红细胞上洗脱掉IgM及IgG抗体。此方法制备抗 体最容易，但抗体回收较差，即如果抗体较弱， 放散试验可得到假阴性的结果。
其优点是适用于一般化验室，缺点是放散
液中含有较多游离白蛋白。
热放散试验方法 1.将疑有抗体包被的红细胞用生理盐水洗涤3-4次，最后一次 尽量吸取红细胞上层的生理盐水。 2.在压积红细胞中加等量生理盐水（也可用AB血清或6%牛血清 白蛋白），臵 56℃水浴箱中10分钟，期间摇动数次（15-30S 摇动1次）。 3.取出后立即高速离心，3000 转/分钟；取上清液（樱红色的 上清液即为放散液），与已知红细胞试验。按不同试验要求做 试验，将放散液作为抗体使用。
乙醚放散试验
主要应用于温自身抗体（IgG）或同种抗体
引起的直抗阳性，以及用于分离IgG抗体混合物
其最大优点是适用于检查获得性溶血性贫 血，鉴定Rh抗体效果最好，不宜用于 ABO 抗 体鉴定
酸放散
放散试验的应用
鉴定新生儿溶血病患儿红细胞上的抗体
在溶血性贫血和可疑输血反应中，用来鉴定产生直抗 阳性的红细胞 制备少量的单特异性抗体 从病人红细胞上去除抗体，制备可用于自身吸收或鉴
新生儿溶血三项检测
试验名称 改良直接抗 人球蛋白试 验(改良 Coombs试验) 目的 方法 结果判定 意义 测定患儿红 “最适稀释度”的抗人球 细胞上结合 蛋白血清与充分洗涤后的 的血型抗体 受检红细胞盐水悬液混合 红细胞凝聚 红细胞已致敏，为确 为阳性 诊实验 Rh溶血病阳性率高而 ABO溶血病低 红细胞凝聚 检测致敏红细胞的敏 为阳性 感试验，为确诊实验 Rh和ABO溶血病一般 均为阳性
将新生儿血清与标准A(B)细胞（与新生儿同种 红细胞） 做间接抗人球蛋白试验，阳性结果， 则表示有抗体存在。
新生儿血清中游离抗体检查结果 意义
指示红细胞 AC BC OC + + + + +++ 意义 游离的抗-A 游离的抗-B 游离的抗-A抗-B或-AB 游离的ABO系统以外的抗体 无游离抗体
放散试验
一般发生在第二胎；第一胎也可发病 大多数更严重 较重，严重者甚至死胎 24小时内出现并迅速加重
贫血
肝脾大 晚期贫血
轻
很少发生 很少发生
可有严重贫血或伴心力衰竭
多有不同程度的肝脾增大 可发生，持续至生后3～6周
实验室检查
血型检查
母子ABO和Rh血型
溶血检查
溶血时红细胞和血红蛋白减少，早期新生儿毛细血管血 血红蛋白<145g/L可诊断为贫血; 网织红细胞增高（第一天>6%）; 血涂片有核红细胞增多（>10/100个白细胞）; 血清总胆红素和未结合胆红素明显增加;
等，若胎儿有该抗原也可发生Rh溶血病。
RhD溶血病最常见 其抗原性强弱依次为D＞E＞C＞c＞e。 RhD溶血病最常见，其次为RhE，Rhe溶血病罕见。
Rh溶血病一般不发生在第一胎
由于自然界无Rh血型物质
首次妊娠末 期或胎盘剥 离
Rh阳性胎儿 血 >0.5～ 1ml
经过2-6月
以后
再次妊娠
孕期
Fra Baidu bibliotek几天内
•
• • •
注意事项
• 红细胞上吸附抗体太少,直接抗球蛋白试验可成假阴性反 应。 • 全凝集或冷凝集血液标本中有很多网织红细胞且抗球蛋白 试剂中含有抗转铁蛋白时，均可使红细胞发生凝集。 • 试剂：多特异性抗球蛋白试剂（IgG、C3d）；阳性对照细 胞[IgG抗D致敏的5%Rh(D)阳性红细胞生理盐水悬液。取3 人份O型红细胞等量混匀，经生理盐水洗涤后取压积红细 胞，加等量抗D血清，至37℃水浴致敏1小时，取出后用生 理盐水洗涤3次压积红细胞洗涤配成5%红细胞生理盐水悬 液]；阴性对照细胞（正常人5%红细胞生理盐水悬液。取3 人份O型红细胞等量混匀，经生理盐水洗涤后取压积红细 胞，配成5%红细胞生理盐水悬液）。