植物组织培养实验(4)

（四）实验步骤
1.

配制以下培养基各100ml ： MS1：MS+1.0mg/LBA+0.5mg/L NAA MS2：MS+2.0mg/LBA+0.1mg/L NAA MS7：MS+0.1mg/LBA+2.0mg/L NAA
① 取200ml烧杯3只，标记，各加入4g MS培养基和100ml 蒸馏水，加热直至完全溶解。 ② 分别加入 1mg/ml 6-BA 100、200、10µ l，并不断搅拌。
4. 接种
① 水稻种子去壳，70％乙醇浸泡30s，2％次氯酸钠 液（加1～2滴吐温-80）浸泡20min。 ② 进入无菌室，用70％乙醇擦洗双手、盛放外植体 的烧杯外壁和工作台面，点燃酒精灯。
③ 将次氯酸钠倒掉，加无菌水冲洗3～5次。
④ 每平皿接种5粒。每组每种培养基各4平皿。
⑤ 光照培养箱25℃暗培养。
实验四 水稻成熟胚愈伤组织的诱导
（一）实验目的

掌握水稻成熟胚愈伤组织的诱导技术，熟悉植物 组织培养操作过程。
ห้องสมุดไป่ตู้
（二）实验原理

在一定的条件下，植物种子的胚和胚乳都 可以脱分化形成愈伤组织，在这一过程中 同一类植物生长调节剂中不同的化合物可 能会有不同的效果。
（三）实验材料和用具
实验材料：水稻种子 实验药品：
作业
1. 1周后观察培养体系有无污染，计算每一个平皿 内染菌外植体数和外植体外的菌落数，分析染 菌原因。 2. 1周后计算每种培养基的愈伤组织诱导率（形成 愈伤组织的外植体数/总接种外植体数×100％）， 比较其诱导效果。
实验报告内容



实验名称 实验目的 实验原理 实验材料和用具 实验步骤 实验结果与分析

MS、 1mg/ml NAA 、 1mg/ml 6-BA、 1mol/L HCl、1mol/L NaOH、蒸馏水、灯 用酒精、70％酒精、无菌水 。
灭菌培养基：MS5、 MS6
实验用具：

天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三 角瓶、pH试纸、电炉、高压灭菌锅。 无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、 解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、 滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养 箱。
③ 分别加入 1mg/ml NAA 50、10、200µ l，并不断搅拌。
④ 用1mol/L HCl或NaOH调节pH至5.8～6.0。
2. 分装。将3种培养基分别分装到4个三角瓶中，做 好标记。 3. 灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃、 0.1MPa条件 下灭菌15～20min。操作按仪器操作步骤进行。 灭菌后待压力下降到0Pa时取出，凝固后待用。