一种单萜类化合物及其提取方法和应用_CN109553623A

( 54 )发明 名称 一种单萜类化合物及其提取方法和应用
( 57 )摘要 本发明属于天然药物化学技术领域，具体涉
及一种单萜类化合物，其结构式为：
权利要求书2页 说明书9页 附图6页
的临床应用前景，今后可被开发成市场上新的抗 肝癌药物或/和抗乙肝病毒药物。
并涉及所述单萜类
CN 109553623 A
(74)专利代理机构 上海申新律师事务所 31272 代理人 严罗一
(51)Int .Cl . C07D 493/08(2006 .01) A61K 31/357(2006 .01) A61P 35/00(2006 .01) A61P 31/20(2006 .01)
(10)申请公布号 CN 109553623 A (43)申请公布日 2019.04.02
化合物的提取方法，还涉及所述单萜类化合物在 制备治疗肝癌药物与抗乙肝病毒药物中的应用， 以 及 提 供 了 一 种药 物 制 剂 。该 单 萜 类 化 合 物 Japopenoid A的提取方法的步骤简单 ，易于操 作；该单萜类化合物Japopenoid A的毒副作用较 小 ，既 表现出很好的 抗肝癌效果 ，又表现出显著 的抗乙肝病毒作用，从而能够为肝癌及乙肝患者 提供新的 治疗药物及治疗途径。因此 ，本发明所 述的单萜类化合物Japopenoid A与包含该单萜 类化合物Japopenoid A的药物制剂均具有广阔
( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910054695 .4
(22)申请日 2019 .01 .21
(71)申请人 深圳市人民医院 地址 518000 广东省深圳市东门北路1017 号
(72)发明人 曾小斌 葛岚岚 万浩强 肖凌云 李洁媚 吴伟刚 周伯平 吴诗品
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权 利 要 求 书
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和药学上可接受的载体。 10 .根据权利要求9所述的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂的剂型选自以下任一
种：片剂，胶囊剂，丸剂，颗粒剂，混悬剂，口服液，涂剂，巴布剂，喷雾剂，粉针剂和水针剂。
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CN源自文库109553623 A
说 明 书
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权 利 要 求 书
1 .一种单萜类化合物，其特征在于，具有以下结构式(I)：
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2 .一种根据权利要求1所述的单萜类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤： S1 ：在室温下 ，用75％乙醇对金银花进行多次冷浸、渗漉提取 ，合并提取液后 ，减压回收 溶剂，浓缩以制得乙醇浸膏； S2：将所述乙醇浸膏混悬于水，然后分别用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，以分别制得 环己烷浸膏，乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏； S3 ：取所述乙 酸乙 酯浸膏 ，用氯 仿 和甲 醇溶解 ，并 用柱层析硅胶进行拌样 ，装柱 ，上样 ， 接着进行梯度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得20个组分E1～E20； S4：取组分E3，用二氯甲烷和甲醇溶解，进行第一次Sephadex LH-20(23×750mm)柱层 析 ，其中采 用洗脱剂进行等度洗脱 ；采 用TLC分析 ，合并 相同 流分后获得7个组分 ：E3A ，E3B ， E3C，E3D，E3E，E3F和E3G； S5：取组分E3F，用二氯甲烷和甲醇溶解，进行第二次Sephadex LH-20(23×750mm)柱层 析 ，其中采用洗脱剂进行等度洗脱 ；采用TLC分析 ，合并相同流分后获得6个组分E3F1～ E3F6； S6：取组分E3F4，用甲醇溶解、过滤，然后进行高效液相色谱分离，收集保留时间为20～ 22min的流分，从而得到所述单萜类化合物。 3 .根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，在S3中所述的梯度洗脱包括：依次用 二氯甲烷、体积比为100：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为50：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为25： 1的二氯甲烷-甲醇、体积比为15：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为5：1的二氯甲烷-甲醇、体积 比为2：1的二氯甲烷-甲醇、甲醇实施洗脱。 4 .根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，在S4和S5中所述的洗脱剂为体积比8： 2的二氯甲烷-甲醇。 5 .根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，在S6中所述的高效液相色谱分离的条 件包括： RP-18制备液相色谱柱规格：Cosmosil 5C18-MS-II，5μm，20×250mm； 检测波长：254nm； 流动相：体积比为53：47的甲醇-水，流速为8mL/min。 6 .根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述柱层析硅胶的粒径为100～200 目。 7 .根据权利要求1所述的单萜类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用。 8 .根据权利要求1所述的单萜类化合物在制备抗乙肝病毒药物中的应用。 9 .一种药物制剂，其特征在于，包含治疗有效量的根据权利要求1所述的单萜类化合物
一种单萜类化合物及其提取方法和应用
技术领域 [0001] 本发明属于天然药物化学技术领域，具体涉及一种单萜类化合物，并涉及所述单 萜类化合物的提取方法，还涉及所述单萜类化合物在制备治疗肝癌药物与抗乙肝病毒药物 中的应用，以及提供了一种药物制剂。
背景技术 [0002] 众所周知，肝病是危害人类健康的重大疾病。在亚洲，肝纤维化和肝硬化都是常见 的慢性肝病，研究表明，90％的肝硬化可转化为肝癌。 [0003] 肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是一种原发于肝细胞的恶性肿瘤，其平均 生存时间为6-16个月，严重危害人类生命健康。据统计，全世界每年约有78 .2万人罹患肝 癌，分别位列癌症疾病中男性发病率和女性发病率的第5位和第7位，死亡率则分别高居第2 位和第6位。在我国 ，HCC也是常见高发的恶性 肿瘤之一 ，数据显示 ，我国肝癌患者数约占 全 球总患者数的50％，排在肿瘤发病率的第二位。通过大数据分析和研究发现，肝癌大多数是 由乙 肝 病毒 (HBV) 感染形成乙 型肝炎发展而来 ，在这个过程中还伴有肝纤维化 和肝硬化等 病症。因此 ，如何有效预防 和治疗高发性的乙 肝 病毒以 及伴随 生成的 肝癌已 经成为各国 政 府及相关医疗机构都需共同承担和亟需解决的重大难题。 [0004] 目前，手术切除被认为是早期肝细胞癌的最佳治疗方案，但是，晚期患者只能选择 化疗，并伴随术后复发率高和肝功能损伤大的缺点。即便如此，传统的化学治疗方法并没有 显著延长肝癌患者的 总体生存期 ，大量数据表明 ，其五年生存率仅为7％。临床上 ，对于HBV 的控制主要是以接种疫苗预防为主，尽管疫苗效果明显，然而，一旦感染乙肝病毒，则只能 终身携带，不能治愈，况且目前的治疗效果不尽令人满意。现有的治疗肝癌的化学药物除药 物疗效不佳外，其药物毒性及长期使用所产生的耐药性等缺陷同样亟需克服。然而，与化学 药物不同 ，天然药物具有天然无毒、调节免疫、多靶点的特性 ，并且在肝癌的治疗中占 有越 来越重要的 地位。因此 ，如何从合适 种类的 动植物或矿物中寻找到并提取出疗效高且毒性 低的化疗药物是临床上治疗乙肝及肝癌的热点研发方向之一。 [0005] 植物提取物是以植物为原料，按照对提取的最终产品的用途的需要，经过物理化 学提取分离过程 ，定向获取 和浓集植物中的 某一种或多种有效成分 ，而不改变其有效成分 结构而形成的 产品。按照提取植物的成份不同 ，一般可获得甙、酸、多酚、多糖、萜类、黄酮、 生物碱等 ；按照性状不同 ，又可分为植物油、浸膏、粉、晶状体等种类。 [0006] 金银花 (Flos Lonicerae Japonicae) 是忍冬科忍冬属植物忍冬 (Lonicera japonica Thunb .)的干燥花蕾或带初开的花，药用历史悠久，首载于梁代陶弘景的《名医别 录》中 ，其为常 用中药品种之一 ；此外 ，金银花在日常生活中还可 用于食疗 ，如人们经常饮 用 的金银花茶等。近期的药物化学研究表明，金银花含有丰富的萜类化合物，且其中的某些萜 类化合物在抗病毒方面具有较好的疗效。