创伤性休克大鼠模型的建立

创伤性休克大鼠模型的建立①
510282　广州　第一军医大学珠江医院　
孙英刚　黄宗海　冯浩淼
宋慧娟　雷洪伊
摘　要　建立一种既符合临床特征,又简便易行的创伤性休克动物模型。

用2500g 铁轮于30cm 高度击中SD 大鼠双侧股骨中上段造成粉碎性骨折、软组织损伤及出血,引发休克,维持90min 后复苏,监测生命体征,计算24、72h 内死亡率。

结果显示,于30cm 高度砸伤
大鼠,(718±116)min 后达到休克水平,24h 内死亡率为2715%,72h 内死亡率为5215%。

该模型操作简单,易于控制,模型相对稳定并有一定的死亡率,是一种比较理想的急性创伤休克动物实验模型。

关键词　休克,创伤性;疾病模型,动物;大鼠
中国图书资料分类号　R605191
DEVE LOPMENT OF AN EX PERIMENT A L MO DE L OF TR AU MA TIC SH OCK IN R A T S
Sun Y inggang ,Huang Z onghai ,Feng Haomiao et al.Zhujiang H ospital ,First Military Medical University ,G uangzhou 510282
Abstract T o establish a standard ex perimental m odel of traumatic shock in rats that could not onl y imitate clinical features ,but als o be performed easily ,multiple injuries inv olving the leg b ones ,the s oft tissue and hem orrhage in S prague 2Daulay rats were made by hitting its legs on b oth sides with a 2500g pontil falling from 30cm height to induce traumatic shock.Resuscitated the rats after 90minutes and m onitored the vital si g ns ,and then calcu 2lated the 242hour and 722hour death rates.There were ab out (718±116)minutes of the rats from in jury to shock.The death rates were 2715%in 24hours and 5215%in 72hours.This m odel has beenproved to be relatively sim ple ,stable and basically closed to clinical features of traumatic shock ,s o it is a reliable ,acute animal m odel for ex perimental study of traumatic shock.
K ey w ords shock ,traumatic ;disease m odel ,animal ;rats
目前现有的创伤性休克模型,由于存在着诊断标准不合理、致伤因素难以定量、动物存活时间短、模型不稳定、成功率低等缺点而难以被临床工作者接受[1]。

针对这种情况,作者应用重物致伤引发创伤性休克,将致伤因素进行了量化,建立了相对稳定的创伤性休克模型。

1　材料与方法
111　材料　健康SD 大鼠60只,雌雄不拘,体重280～320g ,由第一军医大学动物实验室提供。

LMS 22B 型二道生理记录仪(成都仪器厂),显微外科手术器械(上海医疗仪器厂),2500g 铁轮,动物固定台。

112　实验分组　实验分预实验和实验两部分进行。

预实验用鼠20只,应用2500g 铁轮于不同的高度(20cm 、30cm 、40cm )分别击中大鼠双侧股骨中上段,引发休克,以了解不同创伤程度与休克发生之间的关系。

实验部分用鼠40只,根据预实验结果,应用2500g 铁轮于30cm 高度对大鼠造成创伤,监测各项指标。

113　实验方法　动物称重后,以质量分数为1%的戊巴比妥钠(0165ml/100g )腹腔注射麻醉,将动物固定,行单侧颈动、静脉插管,置管前行肝素化。

颈动脉插管后连接到LMS 22B 型二道生理记录仪监测血压,稳定10min ,以2500g 三棱皮带轮顺木槽自30cm 处先后砸中大鼠双侧股骨中上段,立即监测血压,待平均动脉压降至40mmHg ,加压包扎双侧创面以减少进一步出血,维持此低血压90min 后进行复苏,在此期间行一侧股动脉插管
以备放血或采血检查各项指标。

若血压不能降到40mmHg ,即采用股动脉快速放血使血压降低;当血压不能维持40mmHg 时,通过持续少量输液维持,直至回输估计失血量的40%为止。

休克过程约为90min ,之后回输4～5倍估计失血量的平衡液进行复苏,使血压恢复至伤前水平的70%以上并维持。

拔管、缝合创口,待动物完全清醒后置入鼠笼予以常规喂食。

114　观测指标　经LMS 22B 型二道生理记录仪监测创伤前后大鼠平均动脉压波动,并监测呼吸、心率、肛温等生命体征,计算24、72h 内死亡率。

2　结　果
全部实验手术插管时间为617±211min ,创伤后大鼠均有股骨干骨折、下肢软组织损伤及不同程度的出血,以平均动脉压低于40mmHg 作为休克标准,休克大鼠均出现不同程度的心率增快、脉压差减小、呼吸急促等表现,复苏后上述各项指标相对平稳,完全清醒后能够摄食。

24～72h 后存活大鼠都出现体重下降,并出现不同程度的肛温升高或下降,呼吸、心率增快,呼吸困难、心律紊乱,少尿、无尿等SIRS 及MODS 的表现。

预实验结果:30cm 高度创伤组的休克直接发生率为7114%(5/7),其余则需要再进行不同程度的放血才能达
孙英刚,医学硕士,主治医师。

主要从事创伤休克的基础与临床研究工作,已发表论文7篇。

现工作单位:济南军区总医院①广东省自然科学基金资助课题(编号001048)
到休克,24h内死亡率为2816%(2/7),72h内死亡率为5711%(4/7);40cm高度创伤组10010%(7/7)的大鼠直接达到休克水平而不需要再行放血,但24、72h内死亡率高,分别为5711%(4/7)、8517%(6/7);20cm高度创伤组的休克直接发生率为3313%(2/6),24h内死亡率为1617%(1/6),72h内死亡率为3313%(2/6)。

实验结果:大鼠创伤至休克的时间为(718±116)min,失血量3～6ml,有2715%(11/40)的大鼠在创伤后需要再进行不同程度的放血才能达到休克水平,休克复苏成功率9215% (37/40),24h内死亡率为2715%(11/40),72h内死亡率为5215%(21/40),休克大鼠早期死亡的原因为重度不可逆性休克导致呼吸、循环衰竭,后期死亡的主要原因为继发性感染及MODS。

3　讨　论
创伤性休克动物模型的复制仍然是一个探索中的课题。

20世纪70年代以前,常采用单因素致伤如打击肢体法、止血带法和转鼓法等,这些方法与创伤性休克的临床实际过程有较大的差距。

20世纪80年代以来,国内外学者采用了多因素复合致伤,相继建立了一些新的创伤性休克模型,但由于存在着诊断标准不合理、施加因素(创伤)难以定量、致病因素单一、动物存活时间短、成功率低等缺点,并且由于研究目的特殊、休克的发生不稳定,以及应用范围的限制,迄今为止仍还没有建立大家公认的实验动物模型标准。

理想的动物模型应该与临床情况尽可能相似。

一般认为,较理想的创伤性休克模型应具备以下条件:①以创伤和休克为主要致伤因素,创伤以软组织损伤和长骨骨折为宜,休克以失血失液为主;②创伤和休克的程度能够定量和易于复制;③能反映创伤性休克的发病过程和临床特征;④能导致多脏器功能障碍和有一定的死亡率[2]。

致伤程度及创伤后的出血程度取决于创伤的施加因素。

Chaudry[3]应用电刀切开大鼠的腹壁,切口长5cm,再经股动脉快速放血,在10min内使血压降至40mmHg,休克过程为1h,之后复苏而制成模型,其伤后3～5天的死亡率高达50%,是比较理想的创伤性休克模型。

梅冰等[4]将1个重约1000g的铁棒从1m高处落下,砸中鼠双下肢,然后通过三通管从颈总动脉放血,连接到自制的无菌贮血瓶内,通过调节血液平面的高度控制血压,维持血压在40mmHg,制成动物模型。

方玉荣等[5]以4411牛顿力(4012J)作用于大鼠双下肢,造成双下肢粉碎性骨折和软组织损伤,但避免其外出血。

我们的预实验结果表明,2500g重物在30cm高度击中大鼠致其休克比较接近于临床,高于此高度会因创伤太重而使死亡率过高,低于此高度又因创伤太轻使休克的直接发生率和死亡率过低,因此实验部分就采用了这一创伤条件。

本组实验中应用重物在固定高度致大鼠股骨骨折并软组织挫伤,将致伤因素进行了量化,其致伤因素、发病过程和临床特征与创伤性休克临床过程基本一致,且操作简单,易于控制,模型相对稳定并有一定的死亡率。

实验过程中应注意的几个问题:在不影响手术操作的情况下,麻醉要浅,尽量与临床实际相似;肝素用量要控制到最小,以避免复苏后出血不止。

另外,插管熟练程度、复苏时间的掌握、复苏液及用量、采血量等都对模型的复制有或多或少的影响[6]。

参　考　文　献
1文士铭.实验动物休克模型.见:胡同增,张自云主编.实验外科学.
第2版.北京:人民卫生出版社,2000.287-296
2胡　森.创伤性休克.见:罗正曜主编.休克学.天津:天津科学技术出版社,2001.764
3Chaudry IH.Rat and m ouse m odels of hypov olem ic2traumatic shock.In: S chlag G,Redl H eds.Pathophysiology of shock,sepsis and organ failure.
Berlin:S pringer2Verlag,1993.371-383
4梅　冰,康舟军,杨瑞和等.创伤性休克大鼠中性粒细胞CD18、糖皮质激素受体的变化及纳洛酮治疗作用的研究.上海医学,2000,23(1):19 5方玉荣,王立金,张梅芳等.地塞米松在大鼠创伤性休克中的作用.中国病理生理杂志,1996,12(2):146
6S chlag G,Sue E.Hypov olem ic2traumatic shock in bab oons.In:S chlag G, Redl H eds.Pathophysiology of shock,sepsis and organ failure.Berlin: S pringer2Verlag,1993.384-402
(2002205222收稿　2002208216修回)
(本文编辑　王远美)
《临床五官科急症学》
本书为人民军医出版社策划出版的《实用急症学》系列高级参考书之一。

本书分3篇共37章。

第一篇口腔科急症,主要介绍了口腔科急症的临床检查、麻醉要点及拔牙、口腔颌面部炎症与损伤、颌骨骨髓炎、涎腺、神经、颞下颌关节、口腔内科、修复科、正畸科急症的诊治要点;第二篇眼科急症,主要介绍了急性化脓性疾病、急性变态反应性疾病、外伤、急性青光眼、营养缺乏性疾病等眼科急症的诊治要点;第三篇耳鼻咽喉科急症,主要介绍了急性炎症、外伤、出血、异物、眩晕、突发性耳聋、颅底外伤等耳鼻咽喉科急症的诊治要点。

全书语言精练,理论紧密联系实际,实用性、可操作性强,是急诊科、五官科医师及研究生的重要参考读物。

本书于2002年7月由人民军医出版社出版。