利用SRAP分子标记技术鉴定大白菜种子纯度
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21 0 1年 6月
Jn. 0 1 u e 2 1
热 带 农 业 科 学
C NE E J RNAL OF T HI S OU ROP C I AL AGRI CUL UR T E
第 3 卷第 6期 1
Vo . ,No6 131 .
利用 S A 分子标记技术鉴定大 白菜种子纯度① RP
对 于大 白菜杂 交种 传统 的纯 度检 验 多采用 田间鉴定
法 ,它 既 占用 土地 .又 需耗 费较 长 的时 间 ,影 响种 子 的 及 时 销 售 本 试 验 利 用 S A R P分 子 标 记 方 法 . 进行 大 白菜一 代杂 种纯 度 的快速 鉴定 .以使合 格种 子尽 快应 用 于生产
,
通 过
对 5 4对 S A R P标 准 引 物 的 筛 选 ,获 得 了能 区 分 大 白菜 多 抗 3及 其 亲 本 的 引 物 M 4 / m R 采 h 4 / m R引 物 对 eF E 3 。 l FE3 e
对 5份 多 抗 3系 列 商 品 种子 纯度 进 行 检 验 ,种 子 的 纯度 分 别 为 7. % 2 、8 .% 8 和 7% 5 5 、7% 0 5 、6% 3 .与 田间 种 植 纯
合 成 。 引 物 序 列 分 别 为 :上 游 序 列 M l 、M 2 、 e F e F
M 3 、M 4 、M 5 、M 6 ; 下 游 序 列 E I 、E 2 、 eF e F eF e F m R m R
Em R E 4 E R Em R E R E R Em R PC 3 mR m5 6 m7 m8 9 R
严 慧玲 ② 闰树 成 z 杨 慧 民 ) ) ③ 汲江 科 蒋 艳 霞 z ) 】
005 : 50 1 ( 1河北省 农林科 学院经 济作物研 究所 河北石 家庄
2 河 北冀蔬科技 有限公 司 河北石 家庄 0 0 5 ) 50 1
摘 要 以 大 白菜 品种 多 抗 3 其 父 母 本 为 研 究材 料 ,利 用 S A ( 关序 列扩 增 多 态 性 )分 子 标 记 方 法 及 RP 相
度 鉴 定 结 果 符 合 率 分 别 为 9 . % 9 3 、9 . % 5 5 和 9 . 5 。 说 明 利 用 S A 4 6 、8 . % 3 2 、9 . % 12 % R P分 子 标 记 方 法 对 多 抗 3大 白
菜 一 代 杂 种进 行 快 速 、准确 的纯 度 鉴定 是 可 行 的 关键词
分类号
大 白菜 :S A RP分 子 标 记 : 品种 纯 度 ‘
¥ 3 64
P rt eto iee C b a e( rsi a a sp P kn ni u i T s fChn s a b g B as a rp s . e ie s ) y c s
F a it sb RA r e lV r i y S P Ma k r ee
r s l ho e h tM e F Em 3 c n dsig ih FIh b d fCh n s a b g u k n 3 a d i a e t. e ut s w d t a 4 / s R a it u s y r so i e e c b a ed o a g n t p r ns n i s Se d p rfe ff e Chie e c b g u k n 3 F1h b d r e td b rm e ar e F Em 3 Th e u i so v i i n s a ba e d o a g y r swe e tse y p i i rp isM 4 / R. e p rt o v s ae F1 y rd wa 7 .% , 7 % , 8 .% , 6 % a 7 % ui y ff e h s i r h b s i s 55 2 05 8 nd 3 b S y RAP e h o o y tc n lg ,
S R和 A L S F P等传 统 分 子标 记 方 法 。 目前 .该 标 记 技 术 已用 于多种植 物 的遗 传 图谱构 建 、比较基 因组
① 基 金 项 目 :河北 省 财 政 专项 (0 9 50 2 。 20 0 5 0 )
是农 作物种 子质量 的最重 要指标之 一 .只有纯度 达
全 ,进 行种 子质量 监控 和市 场管 理 .防止 给生 产造 成 损 失和 保护 农 民利 益 .均具 有 一 定 的 重要 意 义
反应 体 系 为 :D A模 板 1 0 g N 5 、引 物 各 3 g . n 0n 、0 2
m o / N P 、 1×P RB f e m l Ld T s C u f r、2 5 m o / g 1 、 . m l L M C 2
2 He e i u T c n lg i td C m a y hj z u n ,He e 5 0 b iJs e h ooy Lmi o p n ,S iah a g h e i b i0 0 5 ) 1
Ab ta t P lm o p i rme ar ee s lc e o 5 RAP rme ar h o g ie e c b a e sr c o y r h c p i rp isw r ee td f m 4 S r p i rp istr u h Chn s a b g
学 、 质 鉴 定 和遗 传 多 样 性 分 析 等 ㈨ 冯 英 利 用 种 RP A D分 子 标记 的方 法对 5个 大 白菜 杂 交 品种 的种 子 纯度 进行 了鉴 定 I.田雷 等 利用 A L 7 ] F P分 子 标 记 的方 法对 l 3个大 白菜材 料杂 交 种子 的纯 度 进行 了 鉴定 [.而利 用 S A 8 ] R P标 记 技术 对 大 白菜种 子 纯 度 进行 快速 、 准确 的鉴定 未 见有报 道 。鉴定 种子纯 度
泳 系 统 采用 北 京 君 意 的测 序 电 泳槽 .扩 增 产 物 用
供试 材料 为河 北省 农林 科学 院经 济作 物研 究所
6 的变性 聚丙 烯 酰胺胶 电泳 检测 .7 % 0 W恒功率 电泳
9 i .电泳后 银染 观察 。 0m n
1 2 3 田 间 种 植 鉴 定 分 析 . .
白菜 课 题 组 提 供 的 大 白菜 品 种 多 抗 3父 母 本 多抗 3 P 、多抗 3 P ;5份 未经 加工 的商 品种 子 ,编 号 一1 一2
分 别 为 :多抗 3 3 、多 抗 3 3 、多 抗 3 3 、多抗 —1 —9 —8
3 2 、多 抗 3 l —3 一2
1 2 方 法 .
8 3 ,9 .% ,9 .% a d 9 .5 , epe tv l 9.% 32 55 n 12 % r s ci ey.S RAP a ay i o l e a r p d a d r l be m eh d t n l ssc ud b a i n ei l t o o a
在河 北 省农林科 学 院经 济作 物研究 所试验 田内
将 大 白菜 品种 多抗 3的 5份 杂交 种 播 种 5 0株 多
抗3 植物 学性 状 为 株高 5  ̄6 m 0 0c .株展 5 m 1c ,叶
相 关 序 列扩 增 多态 性 (e u n e rlt m l S q e c -e e a pi ad —
l o op i f d plm rhs S A ) 由 L 等 发 展 的一 种 新 e y m. R P 是 i 型的基 于 P R的标记技术 .采用 一对 引物对 开放 阅 C 读 框 进 行 扩增 [。 由于 S f I ] R P技 术 简 便 、 速 .不 i 快 需 预 知 物 种 的 序 列 信 息 ,故 而 优 于 R L 、 A D F P RP 、
一
5 — 0
严 慧玲 等 利 用 S A R P分 子标 记 技 术鉴 定 大 白菜种 子 纯度 到规 定 的要 求 .才 能发 挥其 品种在 抗逆 性 、品质 和 产 量 等诸 多方 面 的优 良特性 。建立 快 速 、 确 、 准 实
用 的 大 白 菜 杂 交 种 纯 度 鉴 定 方 法 . 对 保 证 种 子 安 SA R P标 准 引 物 由 上 海 生 物 _ 程 技 术 服 务 有 限 公 司 丁
1 a T q酶 ,总体 积 为 2 L U 0 ,不 足部 分用 d HO补 d2 充 P R扩增 在 B o e r 一 r n i n C C i m t aT 6 a d e tP R仪 上 进
行 , 程 序 为 : 9 ℃ 预 变 性 3m n 4 变 性 1 i , 4 i ;9 ℃ n m
Y i g’ Y h c e g AN Hu l ’ i n AN S u h n Y ANG Hu mi圆 J Ja g e i n I i n k JANG a xa I Y n i ̄
( Ist eo cnm cCo s H biA ae y o A r u uea dF rsy Si cs 1 ntu fE oo i rp, ee cdm f g cl r n o t c ne, it i t er e S  ̄ah ag ee 00 5 ; h i un,H bi 50 z 1
收 稿 E 期 :2 1 4 2 l 0 卜0 — 5;责 任 编 辑/ 小 玲 ;编 辑 部 E m i :r n  ̄ 6 . o 。 古 - a l d k 1 3c m
② 严 慧 玲 (98 ) 17  ̄ ,女 ,湖北 武 汉 人 ,博 士 。
③ 通 讯 作 者 。E m i :y h h 04 16 cm - a l s c 20 @ 2 .o 。
do ag 1h b d h m u kn 3F y r sadi r s yS APf qec— l da pi dp l r i )ma es T e i tp n s r ̄ i f y p s r r. h k
ts tep r f hn s a b g u k n 3 e t ui o ieecb a ed o a g . h y t C
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3 ℃ 退 火 1m n 7 ℃ 延 伸 15m n 5个 循 环 ; 5 i. 2 . i , 9 ℃ 变 性 lm n 0 退 火 1m n 2 延 伸 15 4 i .5 ℃ i ,7 ℃ .
1 材 料 与 方 法
1 1 材 料 .
m n 5个 循 环 :7 ℃ 延 伸 1 i ;8C保 存 。 电 i 。3 2 0m n 0
、
r s e t ey e p ci l.Th c o d n ae b t e RA P tc n lg n ed p a t d n i c to s 9 .% v e a c r a tr t ewe n S e h o o y a d f l— ln i ie tf ain wa 46 i ng i
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摘 要 以 大 白菜 品种 多 抗 3 其 父 母 本 为 研 究材 料 ,利 用 S A ( 关序 列扩 增 多 态 性 )分 子 标 记 方 法 及 RP 相
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大 白菜 :S A RP分 子 标 记 : 品种 纯 度 ‘
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1 2 3 田 间 种 植 鉴 定 分 析 . .
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3 2 、多 抗 3 l —3 一2
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严 慧玲 等 利 用 S A R P分 子标 记 技 术鉴 定 大 白菜种 子 纯度 到规 定 的要 求 .才 能发 挥其 品种在 抗逆 性 、品质 和 产 量 等诸 多方 面 的优 良特性 。建立 快 速 、 确 、 准 实
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收 稿 E 期 :2 1 4 2 l 0 卜0 — 5;责 任 编 辑/ 小 玲 ;编 辑 部 E m i :r n  ̄ 6 . o 。 古 - a l d k 1 3c m
② 严 慧 玲 (98 ) 17  ̄ ,女 ,湖北 武 汉 人 ,博 士 。
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3 ℃ 退 火 1m n 7 ℃ 延 伸 15m n 5个 循 环 ; 5 i. 2 . i , 9 ℃ 变 性 lm n 0 退 火 1m n 2 延 伸 15 4 i .5 ℃ i ,7 ℃ .
1 材 料 与 方 法
1 1 材 料 .
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