相思子毒素单克隆抗体的制备纯化及鉴定
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论 获得 了特 异 性 的 相思 子毒 素 单 克 隆 抗体 ， 建立 相 思 子 毒 素 的检 测 及 纯 化 方法 奠 定 了基 础 ， 中 ４ ６的 效 价最 为 其 Ｅ 『 键 词１ 相 思 子 毒素 ； 克 隆抗 体 ； 关 单 制备
『 图 分 类 号 １ Ｒ３ ２ １ 中 ９ ．１ 『 献 标 识 码 ］ Ａ 文
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高 ． 作 为 检 测相 思 子 毒 素 的 核 心试 剂 。 可
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【 摘 要】 目的 制备 相 思 子 毒 素 单 克 隆抗 体 并 鉴定 其特 性 。 法 以 甲醛 处 理 的 相 思子 毒 素 毒 蛋 白为 抗 原 免 方
疫 Ｂ Ｌ ／ 小 鼠 ； 免 疫 小 鼠的 脾 细胞 与 Ｓ ２０骨 髓 瘤 细 胞 融 合 ， 间接 Ｅ ＩＡ 法 筛 选 、 合 细 胞 有 限稀 释 法 克 隆 、 Ａ Ｂｅ 取 ｐ／ 经 ＬＳ 融
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克 隆 化 杂交 瘤 细 胞 株 的 亚类 鉴 定 等 方 法 筛选 出单 克 隆 抗 体杂 交 瘤 细 胞 株 ， 杂 交瘤 细胞 株 诱 生 小 鼠腹 水 ． 用 蛋 白 用 应 Ａ亲 和 层 析 法进 行 单 抗 的 纯化 ， 对单 克 隆抗 体 的 特 异性 进 行 鉴 定 。 果 获得 了 ４株 可稳 定 分 泌 单 克 隆抗 体 的 杂 并 结
・
８ ２８・
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箜２ ２鲞 筮 塑
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基 础 研 究
・
论
Байду номын сангаас
著・
相思子毒素单 克隆抗体 的制备纯化及鉴定
张 立营 ， 怀龙 ， 凤龙 ， 兴伦 ， 英姿 ， 赵 马 傅 孙 高 波
ｄｌｔ ｎ ｉ ｉ ｍｅｈ ｄ ｕｏ ｔ ｏ ．Ｒｅ ｕ ｔ Ｆ ｕ ｈ ｂ ｉｏ ｅ ｌ ｉｅ ｗｅ ｅ ｂ ａｎ ｄ Ｔ ｅ ｓｌ ｓ ｏ ｒ ｙ ｒ ｍａ ｅｌ ｎ ｓ ｄ ｌ ｒ ｏ ｔ ｉｅ ． ｈ ｍｏ ｏ ｌｎ ｌ ｎ ｉ ｏ ｉ ｓ Ｄ３ ｅｏ ｇ ｄ ｏ ｎ ｃｏ ａ ａ ｔ ｄｅ ２ ｂ ｌｎ ｅ ｔ ｂ Ｉ Ｇｌ ｕ ｃａ ｓ Ｅ６ １ ８ ｎ １ ５ ｂ ｌｎ ｅ ｔ ｇ ｂ ｕ ｃａ ｓ ｈ ｉ ｒ ｆ ｈ ｂ ｉ ｏ ｅｌ ｎ ｕ ｅ ａ ｃｔ ｓ ｅ ｅ ｇ ｓ ｂ ｌｓ ，４ ， Ｃ ａ ｄ Ｅ ｅｏ ｇ ｄ ｏ Ｉ Ｇ２ ｓ ｂ ｌｓ ．Ｔ ｅ ｔ ｅ ｓ ｏ ｙ ｒ ｍａ ｃ ｌ ｄ ｃ ｄ ｓ ｉ ｗ ｒ ｔ ｄ ｉ ｅ
交 瘤 细 胞 ２ ３ ４ ６ １ ８和 １ ５ Ｄ 、Ｅ 、Ｃ Ｅ ，诱 生 的 腹 水 效 价 分 别 为 １１ ｌ １ｌ ｌ １ｌ ｌ １１ ｌ ： Ｏ 、 ： Ｏ 、 ：ｘ Ｏ 、 ：ｘ Ｏ ．亚 类 鉴 定 表 明 ２ ３为 ｘ ｘ Ｄ
ＩＧ ， ｇ １ 其余 ３株 均 为 ＩＧ ｂ 特 异 性 鉴 定 显 示 它们 与 多种 毒 索 均 无 交 叉 反 应 ， 过 亲 和层 析 ， 得 了纯 化 的单 抗 。 结 ｇ２； 经 获
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