枸杞色素提取

韩山师范学院
生物技术专业实验论文
枸杞红色素的提取及性质鉴定指导老师：杨永利职称：教授
答辩组成员
莫东宗 2011235110
巫季俞 2011235117
何青枚 2011235118
吴瑾 2011235127
张培杰 2011235118
肖漫萍 2011235132
张文浩 2011235144
完成时间：2012年6月5日星期二
摘要：本实验通过改变单一变量确定了枸杞红色的最佳提取条件，并分析了枸杞红色素的
稳定性。

结果表明最佳提取条件为40℃下采用无水乙醇浸取，料液比为1:10，提取时间为2.5h ；
关键词：枸杞红色素 提取 性质鉴定
前言：枸杞红色素是存在于枸杞浆果中各种呈色物质的总称，现代药物学研究表明，枸杞
红色素是枸杞中的重要生物活性成份之一，主要包括类胡萝素和少量叶黄素及其它有色物质。

枸杞子色素为暗红色，略带黄色的粉末状或极易松散的块状，稍有正常的枸杞味。

乙醚提取液为黄色，水（PH>7）或乙醇的提取液则黄中透红。

易溶于乙醚，溶于碱性水溶液、乙醇、不溶于丙酮、酸性水溶液。

低于45℃时色素稳定，高于70℃时色素极为不稳定。

色素对光敏感。

枸杞色素本身安全无毒，安全性能好，可用于维生素A 的前体、预防癌症、通过抗氧化作用以减少自由基对细胞遗传物质和细胞膜的损伤、提高免疫力及减弱放疗和化疗对机体的毒副作用。

1. 材料与试剂
1.1实验材料：市售枸杞
1.2实验试剂：0.1mol/L 氢氧化钠溶液；85%乙醇；5%盐酸；5%氢氧化钠；甲醇；无水乙醇；乙醚；0.1mol/L 碳酸钠；0.1mol/L 碳酸氢钠；丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、石油醚、蒸馏水
1.3实验仪器：干燥箱；电热恒温水浴锅；722分光光度计；粉碎机
2.实验方法
2.1最佳提取剂的确定
称取0.5g 枸杞粉末，分别用无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、石油醚、蒸馏水各50ml 浸提2h ，抽滤，取1ml 滤液稀释至10ml ，在350~600nm 波长段扫描，测定其吸光度，记录曲线，进行对比，选取最佳提取溶剂。

2.1.1实验结果与分析
2.1.
3.分析：实验结果表明，红色素在无水乙醇，三氯甲烷，石油醚，乙醚溶液中都有较大的吸收值，但是考虑到三氯甲烷，石油醚，乙醚溶液均有毒，所以本实验选用无水乙醇作为提取剂。

2.2最佳料液比的确定
称取 0.5g 枸杞，分别加入 5、10、15、20、25ml 无水乙醇，浸提 2h
，抽滤，分别定容到原始体积，各取1ml 滤液分别稀释至5ml ，在 450nm 波长段扫描，测定其吸光度，选取最佳料液比。

2.2.1实验结果与分析 分析：实验结果表明，当提取剂用量为5ml 时，色素提取液吸光度最大，因此确定料液比为1：10g/ml 。

2.3最佳提取温度的确定
取0.5g 枸杞粉末于锥形瓶里，按1:10分别加入5ml 无水乙醇，然后分别在25，35，45，
55,65℃下浸泡2h 后，抽滤，定容到5ml，各取1ml 滤液分别稀释至5ml，在450nm 波长段扫描，测定滤液吸光度，选择最佳提取温度。

2.3.1实验结果与分析
温度30℃40℃50℃60℃70℃吸光度0.351 0.621 0.350 0.526 0.467
分析：由上表可见，当浸取温度为65℃时色素提取液吸光度最大，但是乙醇的挥发点为76℃，65℃接近其挥发点，而且在70℃时色素很不稳定，所以确定45℃为最佳提取温度。

2.4最佳提取时间确定
分别取六份0.5g枸杞粉末于锥形瓶中，加入5ml无水乙醇，在45℃下分别浸提0.5 、1 、1.5、2 、2.5、3h ，抽滤，定容到5 m l ，各取1ml 滤液分别稀释至5ml，在450nm 波长段扫描，测定其吸光度，选取最佳浸提时间。

2.4.1实验结果与分析
时间10min 1h 1.5h 2h 2.5h 3h
吸光度0.131 0.170 0.202 0.193 0.279 0.223
分析：实验数据表明，当浸取时间为2.5h色素提取液吸光度最大，因此确定最佳提取时间为2.5h。

3.性质鉴定
3.1氧化剂对枸杞色素稳定性的影响
由于实验中可见光分光光度计要参照管，但是要考虑因素较多，数据难以说明，为避免各种因素影响，减少误差，因此我们另辟蹊径，采取保存率测试法探究还原剂与氧化剂对枸杞红色素的影响。

枸杞红色素保存率( %) = ( 测定吸光度值/初始吸光度值) × 100%
用1ml 色素原液以H2O2作为氧化剂，配制不同浓度的H2O2溶液0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%，稀释至50ml。

室温放置1h，之后测各自在450nm的吸收光谱。

3.2.还原剂对枸杞色素稳定性的影响
用1ml 色素原液以Na2SO3作为还原剂，配制不同浓度的Na2SO3溶液0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%，稀释至50ml。

室温放置1h，之后测各自在2步骤测定的最大吸收波长吸收光谱。

结论：氧化剂作用下枸杞红色素保存率较小，还原剂作用下保存率较大，所以，有氧化剂存在的情况下枸杞红色素不稳定，而还原剂存在的情况下枸杞红色素相对稳定，因此枸杞红色素可与还原剂在食品中同时添加，而尽量避免与氧化剂接触。

3.3光稳定性
分别取量色素水溶液10ml于六支试管中，在室温自然光下放置5、10、15、20、25、30 小时, 在450nm下测量各时间段后的吸光度
光照时间/h 30 25 20 15 10 5
结论：实验结果表明，当光照时间为10小时，色素溶液的吸光度越大，则溶液中色素含量最高，所以，保存枸杞红色素时应避免光照时间长于10小时。

3.4金属离子对色素的影响
取1ml 的色素原液加入50ml 容量瓶，分别加入 Cu 2+、Na +、Mg 2+、K +、Zn 2+、Mn 2+等离子至刻度，每组的摩尔浓度分别为0.01mol/L ，之后振摇，静置 24h ，在450nm 波长处测其吸光度
很大，Na +、Mg 2+、Mn 2+、K +对色素的影响较之前两种不大，但提取时还是要避免这几种离子的加入。

3.5枸杞色素的热稳定性
取1ml 量色素水溶液液5mL, 分别置于 20、40、60、、80、100℃等不同水浴温度下,30min 后,冷却至室温, 将红色素水溶液在室温下测定其光谱吸收特性。

不同处理的实验结果如下表，根据下表的实验结果作图。

不同温度对色素稳定性的影响
40℃ 45℃ 50℃ 60℃ 65℃ 70℃ 0.955
1.185 0.962 0.843 0.799 0.745
由图可见，浸提温度在40~45℃，提取的色素溶液吸光度随浸提温度的升高而增大，即随着
浸提温度的升高，色素的提取量增加；在45~70℃范围内，提取的色素溶液吸光度随温度的升高而减小，即随着浸提温度的升高，色素的提取量减少。

由此说明，浸提温度对色素的稳定性有较大的影响。

3.6 PH值对枸杞色素稳定性的影响
相同浓度的枸杞色素溶液在不同PH条件下处理相同的时间，不同处理的色素溶液吸光度见下表，根据下表的实验结果作图如下。

不同PH对色素稳定性的影响
1.33
2.88 4.13 6.44 7.12 8.38 11.35 1
3.11 0.48 0.557 0.578 0.621 0.655 0.712 0.895 0.917
由图可知，在酸性条件下，随着酸度的增大，色素溶液的吸光度值降低较平缓；在碱性条件下，随着碱性的增大，色素溶液的吸光度值增加明显。

色素容易被酸破坏，在碱性条件下能稳定存在。

参考文献
〈1〉惠贤民枸杞红色素的提取及稳定性的探讨
〈2〉李金梅，杨秋林，赵智宏枸杞红色素的稳定及其在食品中的应用研究
〈3〉伍明，王杰，闪春霞，任仲皎，宋锡瑾，詹国庆枸杞子中红色素的提取及稳定性〈4〉刘咏，罗建平枸杞子红色素的提取及稳定性研究。