3.定量测量方法的线性评估

• 随机测量方法
软件 EXCEL
评估
• 样本要求 ✓数量：5个以上（7-11） ✓每个水平：2-4次（重复性） ✓上限：高于预期值20% ✓是否等距：不要求
• 基质效应 ✓与临床常规样本基质类似 ✓样本中应不出现干扰 ✓标本处理：尽可能不处理，如
处理则应考虑基质或其干扰
评估
• 可接受样本
✓混合血清：理性条件是使用高值 和低值混合血清进行，量值可能 需要调整
y = b0+ b1x
直线的拟合方式 是否具有线性
y = b0+ b1x + b2x2
y = b0+ b1x + b2x2+ b3x3
响应呈上升趋势 响应呈下降趋势
响应不断变化 一般为”S”型
确定线性
系数： • 回归系数指什么？ • 非线性系数指什么？ • 各个系数使用t检验进行显著性
检验，自由度的计算：
体外诊断产品性能评估-
定量测量方法的线性评估
2020年8月31日
术语和定义
线性？
LOQ、LLR、LMR
• 给出与样品中被测量的值直
定义 接成比例的测得量值的能力
• 测量结果/示值，指定结果
线性 • 符合直线的能力
• 测量偏倚
非线性 • 没有单一统计量代表
• LMR是规定所有特性条
1
件下的低值
• LLR是规定线性指标下
用低纯度物质，常规化学分析
中水溶液可以作为校准物，配
制浓度可以作为目标值使用
评估
• 分析顺序 ✓应使用随机化原则，如出现交
叉污染或漂移，分析要受影响
• 分析物浓度
✓使用高于区间20%-30%的分析物 稀释7-11个浓度进行，最后可按 照统计分析结果，剔除非线性浓 度点
评估
• 样本准备及其分配值
✓编码：每个样本编码，如是等 距样本，则可分配连续数字， 如不是等距，至少应知道各样 本之间的关系
✓进行数据核对：如因传输、打印 或其他原因造成
✓对误差较大者进行分析研究：如 原因已知或技术原因造成，可对 整个样本集重复来解决
数据评价
绘图：
可以点对点、也可以用平均值 （连线），目测是否有出现重大 线性偏差、位置互换或有明显抄 写以及故障造成的点
趋势检验：
可以通过趋势分析对每个样本序号 和结果进行趋势分析，如发现趋势 应纠正，不要使用多次重复试验结 果均值而忽略异常值的存在，可能 异常值是真实的
• 可接受样本
✓盐水或其他稀释液稀释：应注意 不同基质对结果的影响，慎用
✓稀释不够或过度稀释的质控物： 应注意不同基质对结果的影响， 可能与浓度有关，慎用
评估
• 可接受样本
• 可接受样本
✓水溶液：最好使用高纯度物质， ✓其他溶剂中的溶液：可能会产生
可以降低影响解释结果的交叉
基质效应
干扰的可能性，但不是说不能
df = L • R - Rdf（n次方）
非线性的度量：
• Sy.x最小为最佳拟合
• 线性目标比较：
✓ 计算不同浓度点的DL，都在范围内，虽存 在统计上非线性，但仍声称符合线性
✓ 如有DL超标：1.发现并解决问题（样本、 干扰、仪器），2.剔除数据、缩小线性区间
确定线性
回归中的RE： • 估计RE（A、R）：
DL声称值： • 线性目标应该源自于偏差目标，
并且应该小于或等于这些目标 • 偏差目标应该小于或等于测量
误差目标
线性评价中的其它影响因素
可接受结果可能受： • 程序上的错误 • 仪器、试剂或校准 • 环境因素 • 基质效应（含干扰）
主要原因分析： • 出现干扰等技术方面的问题
• 样本的交叉污染和测量漂移 • 分析不精密度 • 偏倚
2
的低值
• LOQ规定U下的低值 3
测得量值是否考虑报告?目前做法不支持
区间和范围的区别
线性
评估线性程序
给
定量
出 线
性
区
间
是否包括定性
的 方
法
定量方法的线性 可以使用内插法 竞争性免疫测定
方案设计
评估重点
• 评估线性的前提：重复性 • 评估样本基质问题 • 需要制定非线性误差目标 • 最佳拟合问题：证明 • 减少变量：如时间
线性评价中的假设
示例
线性评价举例
内容 5 6 7 8 9 10 11
推荐的不同稀释样本数量稀释方法
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
L
3/4:1/4
2/4:2/4
1/4:3/4
H
L
4/5:1/5
3/5:2/5
2/5:3/5
1/5:4/5
H
L
5/6:1/6
4/6:2/6
3/6:3/6
2/6:4/6
1/6:5/6
数据评价
斜率确认：
查看临近两水平之间斜率是否近 似，如果某一值不能被剔除，而 图示目测异常，应确认后剔除
异常值个数： 出现两个以上无法解释原因的异常 值时，应及时查找并解决
确定线性
非线性： 应使用一元一次、二次、三次方 程分别拟合，确定非线性指标是 否有统计学意义。从而确定使用 线性的适用性
确定线性
✓稀释液稀释：使用厂家或证明的 实验室用稀释液稀释混合高值血 清，应有稀释液相关研究资料
• 可接受样本
✓添加样本：不含有干扰物时，不 要求添加物的纯度，如有干扰应 说明；如使用浓缩液，应尽可能 少的稀释血清(不超过10%，溶剂)
✓经处理的血清稀释：注意基质效 应
评估
• 可接受样本
✓质控、校准或线性物：适当时 可混合使用，需确保分析物具 有正常生理形式（如蛋白结合 物、代谢物）
存在SD恒定与否，CV恒定与否
考虑： • RE只能降低，不可避免 • 加大倍数，RE降低约40% • 不同水平重复性差别较大时，
可采用加权回归
线性的声称
图示法：
优势： • 可明显的判别好的线性区域和非
线性区域 • 同时对非线性水平能做DL图，更
直观显示
线性声称值的验证
数量： • 推荐7-9个，2次重复 • 常规做法：5个水平，3次重复 • DL声称值：推荐不同水平不同 • 相关系数
H
L
6/7:1/7
5/7:2/7
4/7:3/7
3/7:4/7
2/7:5/7
1/7:6/7
H
L
7/8:1/8
6/8:2/8
5/8:3/8
4/8:4/8
3/8:5/8
2/8:6/8
1/8:7/8
Hቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
L
8/9:1/9
7/9:2/9
6/9:3/9
5/9:4/9
• 数据收集（表格或电子）
不同用途的样本数： ✓建立线性：9-11稀释，2-4重复 ✓验证线性：7-9稀释，2-3重复 ✓确认线性：5-7稀释，2重复 次数应完全按照方法重复性来定
评估及数据评价
• 临床重要的评估浓度 ✓最低分析浓度或线性下限 ✓各种医学决定范围 ✓最高分析浓度或线性上限
• 数据评价