食用菌母种制作
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食用菌母种制作新方法
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(2003-11-18 10:49:00.0)
传统的食用菌母种制作工艺复杂,费工费时,非专业人员难以掌握,导致菌农无法制作而得不到购买母种或原种,既增加生产成本,又不利于灵活安排生产。笔者根据多年的食用菌制种经验和栽培实践,现介绍简易的食用菌母种制作新技术如下。
一、菌种瓶的选择
用100毫升医用盐水瓶代替试管作盛装培养基的容器。
二、培养基的配制
1、配方:马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
2、制作:马铃薯挖支芽眼,去皮洗净,切成薄片后加水,在铝锅中煮沸25~30分钟,用4层纱布过滤,取滤液放入铝锅中,加入琼脂,小火加热并不断搅拌,待琼脂溶化后加入葡萄糖,加开水补足1000毫升,搅匀,趁热装入盐水瓶中,每瓶装8~10毫升,塞上棉塞(棉塞要求干燥、松紧、长度合适),再用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分,用胶圈扎紧瓶口。
三、灭菌
采用高压灭菌,若没有专用高压锅,可因陋就简用家用高压锅进行灭菌,专用高压锅的种类较多,一般年产1万公斤菇的种植户,使用手提式高压锅就可满足生产需求。方法是:将装好培养基的菌种瓶放置在高压锅中,瓶间留有空隙,不可堆放过紧,以利蒸汽循环,灭菌彻底。当压力表指针指到0.05时,打开放气阀,集中排出冷空气,使压力降到零时,关闭排所阀进行升压灭菌,自动放气后保持30分钟(家用普通高压锅灭菌1.5小时),让其自然冷却,取出放置在接种箱中备用。
四、菌种分离
主要采用组织分离法。通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种,操作时,从子实体内切取一小块组织,放在培养基中培养可长出纯菌种,且菌丝萌发快,遗传性状稳定,后代不易发生变异。
1、种菇消毒:种菇采下后,切去菌柄,放入法净的盘内,在装有柴外灯的接种箱内照射20~30分钟,条件不具备的种植户,也可不对种菇消毒,因为所切取的是菇体内部组织,而菇体内部是无杂菌的。
2、接种块切取:在已消毒的接种箱内,撕开子实体,用经酒精灯火焰杀菌冷却的小刀,在菌柄与菌盖交接处内部切取黄豆大小组织块,放入菌种瓶内培养基上培养。
3、接种块选择部位:接种块选择部位因食用菌种类不同而异,菇体肥厚的种菇,在菌盖外缘菌盖皮和菌褶交接处切取组织块进行分离。
菌体小、盖薄、柄空的菌类(如金针菇),应快速击掉菌盖,用接种针钩取菌柄顶端生长点组织进行分离。
菌肉极薄菌柄中空孢子不易萌发的伞菌类,可采用子实层分离法,选取半破膜的子实体,移入培养基上,菌丝萌发后即转入新的培养基上。对子实体较大、质地结实的多孔菌类,应取子实体外缘菌肉组织块。
含水量低的子实体切取5平方厘米的小块,在酒精灯火焰上烘烤5~10秒钟,使子实体表面微焦,然后用无菌刀切取菌肉组织一小块,移入培养基上。
有些菌根菌(如松茸),取用靠近基部的菌柄组织。
胶质菌类如银耳、金耳、黑木耳等,由于耳片薄、表面杂菌多,分离比较困难,必须细心操作,应取新鲜肥大耳片,清水冼净、消毒,剪取半粒芝麻大小的组织块培养。
五、培养及管理
将放入组织块的菌种瓶竖放在室内架上或平台上,室内温度控制在20~28℃,经过1~2天组织块萌发。菌丝生长期间注意观察。发现污染及时挑出,经过10天左右菌丝长期瓶,母种制作成功。
本技术与传统母种制作方法相比,不用制作斜面培养基,不用购买试管,组织分离方便易行,操作程序容易掌握,且菌丝生长粗壮有力,用于生产栽培产量较高。