第三章毛细管电泳法讲述介绍
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
是现代微柱分离技术和经典电泳技术结合的产物，
是气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)等常用分
离技术的重要补充，在诸多研究领域得到了人们 广泛的接受和认可。
一、毛细管电泳发展历程
1808年，俄国物理学家 Pence 发现电泳现象。 1937年，瑞典Tiselius将蛋白质混合液放在两段缓冲溶 液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，发现样品的 迁移速度和方向由其电荷和淌度决定,第一次从人血清 提取的蛋白质混合液中分离出白蛋白和α、β、γ球蛋 白，但分离效率低； 1981年，Jorgenson在75μm毛细管内施加300 V/cm的高 强度电场，获得了理论塔板数超过400,000 plates/m的 高分离效率，轰动了整个分离界，成为CE划时代里程碑 1989年，毛细管电泳仪问世。 1989年，第一届CE国际会议的召开，标志着一门新的分 析技术的产生。
+
CE中电渗流的作用：
可一次完成阳离子、阴离子、中性粒子的分离； 改变电渗流的大小和方向可改变分离效率和选择性
电渗流的微小变化影响结果的重现性；
在CE中，控制电渗流非常重要。
4.CE中影响电渗流的因素
（1）电场强度的影响
电渗流速度和电场强度成正比，当毛细管长度一
定时，电渗流速度正比于工作电压。
加入有机溶剂如甲醇、乙腈，使电渗流增大。
三、CE中的参数与关系式
1.迁移时间（保留时间） CE兼具有电化学的特性和色谱分析的特性。有关色谱理 论也适用。 ldet ldet ldet ltot t ap ap E ap V
Vap是表观迁移速度；μap是表观淌度；ldet 是毛细管有效长度； ltot 是毛细管总长度
四、影响分离效率的因素—区带展宽
1. 纵向扩散的影响 在CE中，纵向扩散引起的峰展宽：σ2=2Dt
由扩散系数和迁移时间决定。大分子的扩散系数小， 可获得更高的分离效率。
2. 进样的影响
当进样塞长度太大时，引起的峰展宽大于纵向扩散。 分离效率明显下降；理想情况下，进样塞长度：
Winj= (24D t )1/2
μ
ef
ef
E
q 6 πr
由此可知，球形带电离子的迁移率，主要取决于自身状态，即与其所带电 量成正比，与其半径及介质粘度成反比。电泳过程中正是利用带电离子电 泳迁移速度或迁移速率的差异来实现分离的。
二、电渗流
石英毛细管柱，内壁大约有8.31 mol/m2的硅醇基
（Si-OH），其等电点约为1.5，内充液pH>3时，表
电场强度：与所施加的电压成正比，与两电极间的距离（L）成反比
E=V/L
电场力：在溶液中，电场对带电离子作用力（F）的大小等于带电离子所带
的净电荷（q）与电场强度的乘积：
F=q· E
在电泳迁移过程中，介质粘滞力（F’）必然会阻碍离子的迁移。 粘滞力的大小与离子大小、形状、缓冲液粘度、甚至电泳介质孔径均有关系， 与带电离子的移动速度更是直接相关。对于球形分子F’的大小服从Stokes 定律：
(5)高度自动化：CE是目前自动化程度最高的分离分析
方法之一；
(6)洁净：通常用水溶性缓冲液，对人体和环境无害；
(7)多分离模式：可根据需要在同一仪器上选用不同的
样品分离模式；
(8)应用范围广：具有“万能”分析的功能和潜力，既 可以分析无机离子、氨基酸、药物等小分子，又可以 分析蛋白质等生物大分子,甚至整个细胞和各种微粒。
二、毛细管电泳的特点
CE是现代微柱分离和经典电泳技术有机结合的产物，具有较
HPLC和平板凝胶电泳更多的优点：
(1)高效：每米理论塔扳数低则十几万，高则几百万甚 至上千万；
(2)快速：可在十几分钟甚至几十秒内完成分离； (3)低样品消耗：只需纳升甚至皮升级样品量； (4)低成本分析：只需低廉的分离毛细管和少量的运行 缓冲液；
（ eof ep )Vπ r 2 ct 进样量 t L
进样不均：电歧视现象，淌度大的离子比淌度大的进样量大； 离子丢失：淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去； 特别适合黏度大的试样。
3. 扩散进样
试样通过扩散作用进入分离柱端口处。
第四节 毛细管电泳类型
常用的六种电泳分离模式；
根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同；
实际操作时进样塞长度小于或等于毛细管总长度的 1%～2%。
3.焦耳热与温度梯度的影响
电泳过程产生的焦耳热可由下式计算：
Q
V I π r2L
Λm cb E 2
m：电解质溶液的摩尔电导；I：工作电流：cm：电解质浓度；
散热过程中，在毛细管内形成温度梯度（中心温度高），破 坏了塞流，导致区带展宽。
第二节 毛细管电泳基础理论
+
—
一、电泳流
电泳：在电解质溶液中，位于电场中的带电离子
在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷
相反的电极方向迁移的现象。
—
+பைடு நூலகம்
电泳时，不同离子在电场中具有不同的定向迁移 速度，迁移速度与哪些因素有关？
淌度(μ）：单位电场下的电泳速度。 绝对淌度：在无限稀释溶液中测得的淌度。 有效电泳淌度：在实际溶液中测得的淌度。
常数有关，某一电泳体系内电渗流的具体数值可以 用Helmholtz-Smoluchowski 公式计算：
eof
ε V ε V ( )( ) eof E ltot ltot
eof为电渗速度； eof 为电渗淌度（EOF mobility）； 为双 式中， 电层的Zeta电位； 为缓冲液介电常数；η为电解液粘度；V 为所施加的电压； ltot 为毛细管总长度。
在具体实验中，可根据需要选用不同的中性组分作为标
记物（N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、甲酰胺、苯酚、 丙酮等），测定不同缓冲条件下中性标记物的迁移时间， 按下述公式计算出电渗率：
eof
ldet ldetltot E tE t V
eof
其中，t：中性标记物的迁移时间，ldet为毛细管电泳有 效长度， ltot为毛细管电泳有效长度。
面电离成SiO-，管内壁带负电荷，形成双电层。
在高电场的作用下，带 正电荷的溶液表面及扩 散层向阴极移动，由于 这些阳离子实际上是溶 剂化的，故将引起柱中 的溶液整体向负极移动， 形成电渗流。
1. CE中电渗流的大小与方向
电渗流的大小可用电渗速度和电渗淌度表示。
（1）电渗流的大小
电渗流的大小与电场强度、Zata电势及缓冲液介电
灵敏度高，样品需衍生
灵敏度极高，样品需衍生 离子灵敏，需专用的装置；
二、毛细管电泳的进样方式
进样量：毛细管长度的1%-2%；纳升级、非常小；
1.流体力学进样方式
（1）进样端加压 （2）出口端抽真空 （3）虹吸进样
Pd 4 π 进样体积 t 128 L
2.电动进样方式
毛细管一端插入样品瓶，加电压；
一、毛细管区带电泳
（Capillary zone electrophoresis , CZE） 带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出；
阴离子：两种效应的运动方向相
反；ν电渗流 >ν电泳时,阴离子在负极 最后流出,在这种情况下,不但可以 按类分离,同种类离子由于差速迁移 被相互分离。 CZE是最基本、应用广的分离模式；
稳定并调控pH。
② 阴离子的影响
在其它条件相同，缓冲液浓度相同而阴
离子不同时，毛细管中的电流有较大差别，
产生的电渗流不同。
（4）温度的影响
毛细管内温度升高，使溶液的黏度下降，电渗流增大。
温度变化来自于“焦耳热”；
焦耳热：毛细管溶液中有电流通过时，产生的热量； CE中的焦耳热与背景电解质的摩尔电导、浓度及电场 强度成正比。 温度每变化1度，将引起背景电解质溶液黏度变化 2%～3%；
（2）毛细管材料的影响 不同材料毛细管的表面电荷 特性不同，产生的电渗流大小不 同。
（3）电解质溶液性质的影响
① 溶液pH的影响
对于石英毛细管，溶液pH增高时，
表面电离多，电荷密度增加，管壁zeta 电势增大，电渗流增大。pH在4-7之间， 电渗流增大显著；pH>8时电渗流增大速 度渐缓。 当pH<3，毛细管内壁离解的硅醇基 被氢离子中和，表面接近电中性，电渗 流接近零。分析时，可采用缓冲溶液来
3.CE中电渗流的作用
电渗流的速度一般约等于离子电泳速度的5～7倍； 各种电性粒子在毛细管柱中的迁移速度为：
阳离子迁移速度 =电渗流+电泳流，阳离子运动速度快于电渗流；
阴离子迁移速度 =— 电渗流–电泳流，阴离子运动速度慢于电渗流； 中性粒子迁移速度 =电渗流，中性粒子运动速度与电渗流一致。
毛细管内径一般为20～100μm。
3.缓冲液池
化学惰性，机械稳定性好；
4.检测器
要求：具有极高灵敏度，可柱端检测； 检测器、数据采集与计算机数据处理一体化； 类型 紫外-可见 检测限/mol 10-13～10-15 特点 加二极管阵列，光谱信息
荧光
激光诱导荧光 电导
10-15～10-17
10-18～10-20 10-18～10-19
F’=6πηrνef
η：缓冲液粘度；r：球形分子的半径；νef：离子在电场中的迁移速度。
当带电离子以速度ν 在电场中移动时，受到大小相等、方向相反的电场驱 动力和平动摩擦阻力的作用，此时
F=F’
故：
q· E= 6πηrνef
则离子在电场中的迁移速度：
ef
qE 6πr
即带电离子的电泳迁移速率（或称电泳淌度） :
改善方法：
（1）减小毛细管内径； （2）控制散热；
4.溶质与管壁间的相互作用
蛋白质、多肽带电荷数多，吸附问题特别严重，是目前分 离分析该类物质的一大难题。 细内径毛细管柱，一方面有利于散热，另一方面比表面积 大，又增加了溶质吸附的机会。
减小吸附的方法和途径：加入两性离子代替强电解质，两
性离子一端带正电，另一端带负电，带正电一端与管壁负电中 心作用，浓度约为溶质的100-1000倍时，抑制对蛋白质吸附， 又不增加溶液电导，对电渗流影响不大。
2.分离效率（塔板数） 在CE中，仅存在纵向扩散，σ2=2Dt
n
apVldet
2DL
ap Eldet
2D
;
tR n 5.54 W 1/ 2
2
扩散系数小的溶质比扩散系数大的分离效率高，这是分离 生物大分子的依据。
3.分离度
2(t 2 t1 ) R W2 W1
（2）CE中电渗流的方向
石英毛细管带负电荷，溶液带正电荷，电渗流 流向阴极；
改变电渗流方向的方法：
毛细管改性：表面键合阳离子基团； 加电渗流反转剂:
内充液中加入大量的阳离子表面
活性剂，将使石英毛细管壁带正电荷，溶液表面带 负电荷。电渗流流向阳极。
2.CE中电渗流的流形
液相色谱中的溶液流动为层流，抛物线流型，管壁 处流速最慢，管中心处的速度为平均速度的 2倍（引 起谱带展宽较大）。 在毛细管电泳中，电荷均匀分布，整体移动，电渗 流的流动为平流，塞式流动（谱带展宽很小），故 柱效较高。
第三节 毛细管电泳仪
一、仪器主要部件
1.高压电源
（1）0～30 kV 稳定、连续可调的直流电源；
（2）具有恒压、恒流、恒功率输出；
（3）电场强度程序控制系统；
（4）电压稳定性：0.1 %；
（5）电源极性易转换；
2. 毛细管
毛细管是CE分离的心脏。
理想的毛细管必须是电绝缘、 紫外/可见光透明且富有弹性 的，目前可以使用的有玻璃、 熔融石英或聚四氟乙烯塑料等。
第三章 毛细管电泳法
Capillary Electrophoresis
第一节 毛细管电泳概述 第二节 毛细管电泳基础理论 第三节 毛细管电泳仪
第四节 毛细管电泳类型
第五节 毛细管电泳的应用和进展
第一节 毛细管电泳概述
毛细管电泳（CE），又称高效毛细管电泳，是近
年来发展最快的高效分离分析技术之一。该技术
（5）添加剂的影响
加入浓度较大的中性盐，如K2SO4，溶液离子强度
增大，使溶液的黏度增大，电渗流减小。
加入表面活性剂，可改变电渗流的大小和方向；
加入不同阳离子表面活性剂来控制电渗流。
加入阴离子表面活性剂，如十二烷基硫酸钠
（SDS），可以使壁表面负电荷增加，zeta电势 增大，电渗流增大；
是气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)等常用分
离技术的重要补充，在诸多研究领域得到了人们 广泛的接受和认可。
一、毛细管电泳发展历程
1808年，俄国物理学家 Pence 发现电泳现象。 1937年，瑞典Tiselius将蛋白质混合液放在两段缓冲溶 液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，发现样品的 迁移速度和方向由其电荷和淌度决定,第一次从人血清 提取的蛋白质混合液中分离出白蛋白和α、β、γ球蛋 白，但分离效率低； 1981年，Jorgenson在75μm毛细管内施加300 V/cm的高 强度电场，获得了理论塔板数超过400,000 plates/m的 高分离效率，轰动了整个分离界，成为CE划时代里程碑 1989年，毛细管电泳仪问世。 1989年，第一届CE国际会议的召开，标志着一门新的分 析技术的产生。
+
CE中电渗流的作用：
可一次完成阳离子、阴离子、中性粒子的分离； 改变电渗流的大小和方向可改变分离效率和选择性
电渗流的微小变化影响结果的重现性；
在CE中，控制电渗流非常重要。
4.CE中影响电渗流的因素
（1）电场强度的影响
电渗流速度和电场强度成正比，当毛细管长度一
定时，电渗流速度正比于工作电压。
加入有机溶剂如甲醇、乙腈，使电渗流增大。
三、CE中的参数与关系式
1.迁移时间（保留时间） CE兼具有电化学的特性和色谱分析的特性。有关色谱理 论也适用。 ldet ldet ldet ltot t ap ap E ap V
Vap是表观迁移速度；μap是表观淌度；ldet 是毛细管有效长度； ltot 是毛细管总长度
四、影响分离效率的因素—区带展宽
1. 纵向扩散的影响 在CE中，纵向扩散引起的峰展宽：σ2=2Dt
由扩散系数和迁移时间决定。大分子的扩散系数小， 可获得更高的分离效率。
2. 进样的影响
当进样塞长度太大时，引起的峰展宽大于纵向扩散。 分离效率明显下降；理想情况下，进样塞长度：
Winj= (24D t )1/2
μ
ef
ef
E
q 6 πr
由此可知，球形带电离子的迁移率，主要取决于自身状态，即与其所带电 量成正比，与其半径及介质粘度成反比。电泳过程中正是利用带电离子电 泳迁移速度或迁移速率的差异来实现分离的。
二、电渗流
石英毛细管柱，内壁大约有8.31 mol/m2的硅醇基
（Si-OH），其等电点约为1.5，内充液pH>3时，表
电场强度：与所施加的电压成正比，与两电极间的距离（L）成反比
E=V/L
电场力：在溶液中，电场对带电离子作用力（F）的大小等于带电离子所带
的净电荷（q）与电场强度的乘积：
F=q· E
在电泳迁移过程中，介质粘滞力（F’）必然会阻碍离子的迁移。 粘滞力的大小与离子大小、形状、缓冲液粘度、甚至电泳介质孔径均有关系， 与带电离子的移动速度更是直接相关。对于球形分子F’的大小服从Stokes 定律：
(5)高度自动化：CE是目前自动化程度最高的分离分析
方法之一；
(6)洁净：通常用水溶性缓冲液，对人体和环境无害；
(7)多分离模式：可根据需要在同一仪器上选用不同的
样品分离模式；
(8)应用范围广：具有“万能”分析的功能和潜力，既 可以分析无机离子、氨基酸、药物等小分子，又可以 分析蛋白质等生物大分子,甚至整个细胞和各种微粒。
二、毛细管电泳的特点
CE是现代微柱分离和经典电泳技术有机结合的产物，具有较
HPLC和平板凝胶电泳更多的优点：
(1)高效：每米理论塔扳数低则十几万，高则几百万甚 至上千万；
(2)快速：可在十几分钟甚至几十秒内完成分离； (3)低样品消耗：只需纳升甚至皮升级样品量； (4)低成本分析：只需低廉的分离毛细管和少量的运行 缓冲液；
（ eof ep )Vπ r 2 ct 进样量 t L
进样不均：电歧视现象，淌度大的离子比淌度大的进样量大； 离子丢失：淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去； 特别适合黏度大的试样。
3. 扩散进样
试样通过扩散作用进入分离柱端口处。
第四节 毛细管电泳类型
常用的六种电泳分离模式；
根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同；
实际操作时进样塞长度小于或等于毛细管总长度的 1%～2%。
3.焦耳热与温度梯度的影响
电泳过程产生的焦耳热可由下式计算：
Q
V I π r2L
Λm cb E 2
m：电解质溶液的摩尔电导；I：工作电流：cm：电解质浓度；
散热过程中，在毛细管内形成温度梯度（中心温度高），破 坏了塞流，导致区带展宽。
第二节 毛细管电泳基础理论
+
—
一、电泳流
电泳：在电解质溶液中，位于电场中的带电离子
在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷
相反的电极方向迁移的现象。
—
+பைடு நூலகம்
电泳时，不同离子在电场中具有不同的定向迁移 速度，迁移速度与哪些因素有关？
淌度(μ）：单位电场下的电泳速度。 绝对淌度：在无限稀释溶液中测得的淌度。 有效电泳淌度：在实际溶液中测得的淌度。
常数有关，某一电泳体系内电渗流的具体数值可以 用Helmholtz-Smoluchowski 公式计算：
eof
ε V ε V ( )( ) eof E ltot ltot
eof为电渗速度； eof 为电渗淌度（EOF mobility）； 为双 式中， 电层的Zeta电位； 为缓冲液介电常数；η为电解液粘度；V 为所施加的电压； ltot 为毛细管总长度。
在具体实验中，可根据需要选用不同的中性组分作为标
记物（N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、甲酰胺、苯酚、 丙酮等），测定不同缓冲条件下中性标记物的迁移时间， 按下述公式计算出电渗率：
eof
ldet ldetltot E tE t V
eof
其中，t：中性标记物的迁移时间，ldet为毛细管电泳有 效长度， ltot为毛细管电泳有效长度。
面电离成SiO-，管内壁带负电荷，形成双电层。
在高电场的作用下，带 正电荷的溶液表面及扩 散层向阴极移动，由于 这些阳离子实际上是溶 剂化的，故将引起柱中 的溶液整体向负极移动， 形成电渗流。
1. CE中电渗流的大小与方向
电渗流的大小可用电渗速度和电渗淌度表示。
（1）电渗流的大小
电渗流的大小与电场强度、Zata电势及缓冲液介电
灵敏度高，样品需衍生
灵敏度极高，样品需衍生 离子灵敏，需专用的装置；
二、毛细管电泳的进样方式
进样量：毛细管长度的1%-2%；纳升级、非常小；
1.流体力学进样方式
（1）进样端加压 （2）出口端抽真空 （3）虹吸进样
Pd 4 π 进样体积 t 128 L
2.电动进样方式
毛细管一端插入样品瓶，加电压；
一、毛细管区带电泳
（Capillary zone electrophoresis , CZE） 带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出；
阴离子：两种效应的运动方向相
反；ν电渗流 >ν电泳时,阴离子在负极 最后流出,在这种情况下,不但可以 按类分离,同种类离子由于差速迁移 被相互分离。 CZE是最基本、应用广的分离模式；
稳定并调控pH。
② 阴离子的影响
在其它条件相同，缓冲液浓度相同而阴
离子不同时，毛细管中的电流有较大差别，
产生的电渗流不同。
（4）温度的影响
毛细管内温度升高，使溶液的黏度下降，电渗流增大。
温度变化来自于“焦耳热”；
焦耳热：毛细管溶液中有电流通过时，产生的热量； CE中的焦耳热与背景电解质的摩尔电导、浓度及电场 强度成正比。 温度每变化1度，将引起背景电解质溶液黏度变化 2%～3%；
（2）毛细管材料的影响 不同材料毛细管的表面电荷 特性不同，产生的电渗流大小不 同。
（3）电解质溶液性质的影响
① 溶液pH的影响
对于石英毛细管，溶液pH增高时，
表面电离多，电荷密度增加，管壁zeta 电势增大，电渗流增大。pH在4-7之间， 电渗流增大显著；pH>8时电渗流增大速 度渐缓。 当pH<3，毛细管内壁离解的硅醇基 被氢离子中和，表面接近电中性，电渗 流接近零。分析时，可采用缓冲溶液来
3.CE中电渗流的作用
电渗流的速度一般约等于离子电泳速度的5～7倍； 各种电性粒子在毛细管柱中的迁移速度为：
阳离子迁移速度 =电渗流+电泳流，阳离子运动速度快于电渗流；
阴离子迁移速度 =— 电渗流–电泳流，阴离子运动速度慢于电渗流； 中性粒子迁移速度 =电渗流，中性粒子运动速度与电渗流一致。
毛细管内径一般为20～100μm。
3.缓冲液池
化学惰性，机械稳定性好；
4.检测器
要求：具有极高灵敏度，可柱端检测； 检测器、数据采集与计算机数据处理一体化； 类型 紫外-可见 检测限/mol 10-13～10-15 特点 加二极管阵列，光谱信息
荧光
激光诱导荧光 电导
10-15～10-17
10-18～10-20 10-18～10-19
F’=6πηrνef
η：缓冲液粘度；r：球形分子的半径；νef：离子在电场中的迁移速度。
当带电离子以速度ν 在电场中移动时，受到大小相等、方向相反的电场驱 动力和平动摩擦阻力的作用，此时
F=F’
故：
q· E= 6πηrνef
则离子在电场中的迁移速度：
ef
qE 6πr
即带电离子的电泳迁移速率（或称电泳淌度） :
改善方法：
（1）减小毛细管内径； （2）控制散热；
4.溶质与管壁间的相互作用
蛋白质、多肽带电荷数多，吸附问题特别严重，是目前分 离分析该类物质的一大难题。 细内径毛细管柱，一方面有利于散热，另一方面比表面积 大，又增加了溶质吸附的机会。
减小吸附的方法和途径：加入两性离子代替强电解质，两
性离子一端带正电，另一端带负电，带正电一端与管壁负电中 心作用，浓度约为溶质的100-1000倍时，抑制对蛋白质吸附， 又不增加溶液电导，对电渗流影响不大。
2.分离效率（塔板数） 在CE中，仅存在纵向扩散，σ2=2Dt
n
apVldet
2DL
ap Eldet
2D
;
tR n 5.54 W 1/ 2
2
扩散系数小的溶质比扩散系数大的分离效率高，这是分离 生物大分子的依据。
3.分离度
2(t 2 t1 ) R W2 W1
（2）CE中电渗流的方向
石英毛细管带负电荷，溶液带正电荷，电渗流 流向阴极；
改变电渗流方向的方法：
毛细管改性：表面键合阳离子基团； 加电渗流反转剂:
内充液中加入大量的阳离子表面
活性剂，将使石英毛细管壁带正电荷，溶液表面带 负电荷。电渗流流向阳极。
2.CE中电渗流的流形
液相色谱中的溶液流动为层流，抛物线流型，管壁 处流速最慢，管中心处的速度为平均速度的 2倍（引 起谱带展宽较大）。 在毛细管电泳中，电荷均匀分布，整体移动，电渗 流的流动为平流，塞式流动（谱带展宽很小），故 柱效较高。
第三节 毛细管电泳仪
一、仪器主要部件
1.高压电源
（1）0～30 kV 稳定、连续可调的直流电源；
（2）具有恒压、恒流、恒功率输出；
（3）电场强度程序控制系统；
（4）电压稳定性：0.1 %；
（5）电源极性易转换；
2. 毛细管
毛细管是CE分离的心脏。
理想的毛细管必须是电绝缘、 紫外/可见光透明且富有弹性 的，目前可以使用的有玻璃、 熔融石英或聚四氟乙烯塑料等。
第三章 毛细管电泳法
Capillary Electrophoresis
第一节 毛细管电泳概述 第二节 毛细管电泳基础理论 第三节 毛细管电泳仪
第四节 毛细管电泳类型
第五节 毛细管电泳的应用和进展
第一节 毛细管电泳概述
毛细管电泳（CE），又称高效毛细管电泳，是近
年来发展最快的高效分离分析技术之一。该技术
（5）添加剂的影响
加入浓度较大的中性盐，如K2SO4，溶液离子强度
增大，使溶液的黏度增大，电渗流减小。
加入表面活性剂，可改变电渗流的大小和方向；
加入不同阳离子表面活性剂来控制电渗流。
加入阴离子表面活性剂，如十二烷基硫酸钠
（SDS），可以使壁表面负电荷增加，zeta电势 增大，电渗流增大；