毛细血管特意性抗体

我想做猪心肌毛细血管密度测定,用VIII因子作为评价指标，

请各位高手指点找不到猪的VIII因子抗体情况下,用哪种动物的抗体代替比较好

APP(氨基肽酶P),FLT1(血管内皮生长因子受体1)

cd31、cd34 、还有因子八，但文献中cd34较多，比较起来，特异性较高，背景低。你可以看看文献

1 使用CD31、CD34以及八因子来代表毛细血管密度，在前些年的国外实验和目前部分国内实验中，经常看到。在找不到八因子时，不推荐CD31、CD34；因为，国外实验已经证实，在淋巴管内皮细胞发现了它们的表达；所以，再用来代表毛细血管的特异性标志物，难免会受到专家以及同行们的质疑。

2 我推荐JG12，这是个目前国内做的比较少的指标，经常可以在国外权威杂志上看到用它来代表血管内皮细胞。因为它仅由血管内皮细胞合成，可以作为毛细血管的特异性标志物。很多公司有的卖，很容易买到。

3. 我用的JG12，反应组织间质的毛细血管密度。效果还不错。热修复，后面的用的即用型试剂盒。DAB显色。

抗猪的VIII因子抗体有卖的，abcam公司有，号：ab6349

CD31 通过免疫组化染色显示毛细血管内皮细胞,进一步完成微血管计数,方法简单,实用性

强,作为判估肿瘤转移预后的一项新指标有着重要的实际意义。FRAg是最常用的内皮细

胞标志物。CD31又称血小板内皮细胞粘附分子,是一种新的内皮细胞标志物,对新生毛细血

管内皮细胞标记率比FRAg高,更适合研究肿瘤血管生成。

VEGF (血管内皮生长因子). 是血管就必然有内皮,尤其有利于新生小血管的检测.推荐一用.

课题需要检查大鼠心肌新生毛细血管密度，查了查文献，发现免疫组化VIII因子对毛细血管的检查方法有两种：1 把染色阳性的内皮细胞作为毛细血管计数；2 把管腔<20微米（25微米）的血管认为是毛细血管，有的还附加管腔至少>一个红细胞直径的条件。

问题：这两种计数方法到底哪个更好一些？为什么？谢谢

请问你的八因子在哪个公司定得。可以标记大鼠的微血管吗？

我也准备做微血管密度方面的研究，但苦于找不到合适的抗体，烦心呀！

以前用的是CD34，但效果不好，做人的还可以，但做大鼠的就不行。

楼上的如果做出来了，请告知我一声，用的什么方法，在下感激不尽！

我用的博士德的，兔抗人VIII,抗大鼠的不好找，抗人的也可以做

微血管计数在肿瘤研究中非常常见，一般用组化的方法对于组织切片的毛细血管进行特异性染色。之后，选择你要观察的区域进行血管计数。流行的抗体有RECA，CD34，CD31，8因子，LN等。祝你顺利。

肿瘤组织血管内皮细胞有许多相对特异的抗原，如CD34,CD31等。我是做肝癌血管生成方面的研究，用CD34作为肿瘤血管的标志（免疫组化），在正常肝血窦内皮细胞是不表达的。然后再显微镜下计算肿瘤内微血管密度(MVD, microvessels density).

你可以用angiogenesis, endothelium cells, tumor 等关键词查阅一些文献。

人准备培养大鼠的血管内皮细胞，血管内皮细胞检测除了第八因子抗体外，可不可以用VEGF或者VEGFR？谢谢！

VEGFR有好几种，其中VEGFR－3是标记淋巴管，其他的像CD34,CD105也可以用。

我的课题是有关血管生成方面的，有一个关键问题解决不了，就是：血管内皮细胞的特异性标记物，用以鉴别上皮性肿瘤细胞和血管内皮细胞，请大家帮忙，谢谢！！

你可以检测以下两者：

1.第Ⅷ因子关连抗原（von willebrand factor,VWF），可以由全身所有血管内皮细胞产生，检测这一因子主要用相应抗体。VWF有其特异性，人的VWF抗体对牛的内皮细胞没有交叉反应。免疫荧光间接法测定该因子，阳性细胞出现细长的荧光颗粒，在核周围的颗粒较密，细胞边缘颗粒较少。

2.Weibel-Palade小体，该小体是血管内皮细胞又一特异性的标志。电子显微镜下，呈现0.1～0.3μm,长0.5～5μm的椭圆形棒状结构。上述的VWF就是该小体产生的。

PECAM-1 血小板内皮黏附分子又称CD31，可以鉴定血管内皮效果好

我要在免疫组化片子上鉴别血管内皮细胞和卵巢癌细胞，是有关血管生成的，但我看过一些文献，大家所说的CD31、VWF，不仅仅在血管内皮细胞上表达，在肿瘤细胞上也有表达，本来开题报告中我选用的是这两个因子，但被导师给否了，让我在查新的因子，要不然就的重新选题了。

CD34，我们这标记血管内皮细胞最好的标记。此外CD31、Ⅷ因子、vWF等也是常用的标记。

CD34、CD31、vWF、FLK-1、FLT-1、Weibel-Palade小体，以及放免功能分析！试剂公司有以下几个：中山/杉、博士德、罗氏、santru、chemokon等公司。

应该有吧，我们这作人的免疫比较多。

国内常用的是中杉和迈新公司的，这两家公司是分装国外抗体，做过实验后销售的。搏士德公司是用相关因子直接免疫人、鼠或其他动物，抗体比较全，但稳定性一般。

如果有条件可以买国外抗体，价格比较贵，一般在3000元左右，中杉代理santa cruz公司，迈新代理labvision（neomarker）公司产品，产品抵运速度较快，此外，国外还有R&D，chemicon，novus，等试剂大公司。推荐一个查试剂的好网站

兔的抗体较少，自己打电话问一下吧。

血管内皮细胞八因子相关抗原鉴定的过程

本人实验急需解决血管内皮细胞八因子相关抗原鉴定的过程.我培养的是人血管内皮细胞.用兔抗人八因子相关抗原抗体鉴定.一抗是兔抗人,二抗是羊抗兔.具体过程不是很清楚.请各位高手指点!(具休步骤)谢谢!

将细胞接种到明胶包被的盖玻片上,24小时后取出，用PBS洗涤后，放入4%丙酮固定10min，室温干燥后，于3%过氧化氢中室温孵育10min（除内源性过氧化物酶），蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min，以正常山羊血清工作液封闭，室温孵育15min，倾去血清（勿洗），滴加1：50八因子兔抗人（对照加PBS），37度孵育1hr，后用PBS洗，滴加生物素标记二抗（羊抗兔），室温孵