GSH和过氧化氢对小鼠早期胚胎体外发育的影响
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低 于对 照 组 和 其 它 组 （ ＜ Ｏ ０ ） 以 ｍＳ Ｆ液 为 基 础 液 ， 添加 ０ １ ／ Ｏ Ｐ ．５ ； Ｏ 在 ． ４ｍｇ Ｌ Ｈｚ 的基 础 上 分 别 添 加不 同浓 度 的 Ｇ Ｈ， Ｓ 阳性 对 照 组 的 囊 胚 发 育率 显 著 高 于 阴 性 对 照 组 （ ＜ Ｏ ０ ） 在 添 加 外 源 性 Ｈｚ ２ Ｏ １ ｇＬ） Ｐ ．５ ； ０ （． ４ｒ ／ 的情 况 ａ 下 ， 着 Ｇ Ｈ 浓 度 的增 加 其 囊 胚 发 育 率也 显 著 增 加 ． 果 表 明 ， ０ 可 诱 导 小 鼠 ２ 细 胞 期 胚 胎 体 外 发 育 的 随 Ｓ 结 Ｈ。 ： 一
在离 体培养 哺乳类 （ 括人 ） 包 着床前 早 期胚 胎 的 时候 ， 遍 发 现这 样 的 事实 ： 化 学组 分 确定 的培 养基 普 在 中， 早期胚 胎往往不 能完成 从受精 卵到囊胚 的发 育完 全过程 ， 而停 顿在 某个 特定 的 发 育时期 ， 这种 现 象称 把
作“ 发育停滞 （ｌｃ ｆ ｅｅｏ ｍｅ ｔ” 小 鼠受精 卵在体 外培 养 时 ， 发 育 常停 滞 于 ２ ｂｏｋｏ ｖ ｌｐ ｎ ） ． ｄ 其 一细胞 期 ， 此现 象 称 为 “ 一细胞 停滞 （ 一ｃｌｂｏｋ ”［ ３ ２ ２ ｅｌ ｌｃ ） １ ． —
试 动物．
１２ 小 鼠 ２ ． 一细 胞 期 胚 胎 的 收 集
为 获得更 多的受精 卵 ， 一般 使用 Ｐ Ｇ—ＨＣ ＭＳ Ｇ法进 行超 排处理 ． 射 ＨＣ ６ ６ｈ后 冲卵 ， 注 Ｇ ３ ～４ 得到 ２ 一
细胞期胚 胎． 雌 鼠用 颈椎脱 臼法致死 ， 将 打开腹 腔取 下输卵 管 ， 入培 养液 中． 放
活性 氧（ ＯＳ 来 自氧 的新 陈代 谢 ， 新发 现的一类 信号 分子 ， 们 化学性 质 活 泼 ， 易 引发 氧化 还 原反 Ｒ ） 是 它 容
应． 外源性 ＲＯ Ｓ的加入或 细胞受刺 激后 Ｒ ＯＳ的产生 常常会 引起细胞 内某 些蛋 白激酶 活性 的变化 ， 而激发 从
一
系列磷 酸化 、 去磷 酸化反应 的信 号传 递过 程 ． ｏ２ Ｈ 可作 为各 种 细胞 刺 激 和调 节 系统 中的第 二 信使 ， 果 如 体外培养期 间谷胱 甘肽 的合成对 卵母 细胞及胚 胎 的发 育 有很 重 要 的作 用． Ｈ 属 于含 巯基 的 、 ＧＳ 小分 子
第 ３ ２卷 第 ４ 期 ２１ ０ ０年 １ ２月
Ｖｏ ． ２ ． １ ３ ＮＯ ４
Ｄｅ ． ２ １ ｃ Ｏ Ｏ
ＧＳ 和 过 氧 化 氢 对 小 鼠早 期 胚 胎 体 外 发 育 的 影 响 Ｈ
柳 海 星
（ 边 大 学 农 学 院 动 物 科 学 系 ， 林 延 吉 １ ３０ ） 延 吉 ３ ０ ２
脏器 的损 害 ， 卵母 细胞 中 ＧＳ 浓度 可作为衡 量 哺乳 动物 卵母 细胞 质 和核 成熟程 度 的标 志 ， 助 于早 期 胚胎 Ｈ 有
发育 ５ ４１ ・．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 供 试 动 物 ．
昆 明小 鼠购 于延 边大 学 医学 院实验 动物室 ， Ｒ小 鼠购于北 京维通 利华 实验 动物技术 有 限公 司． 鼠群 Ｉ Ｃ 母 养 ， 鼠单 笼 饲 养 ， 粒 饲 料 ，自由 饮 水 ． ： Ｏ ２ ： ０光 照 ， ０ Ｏ ～ ８ ０ 公 颗 ８ Ｏ～ ＯＯ ２ ：ｏ ： ０黑 暗． 养 室 温 度 控 制 在 饲 １ ￣２ ８ ４℃． 选用 体成 熟 的健康 的 ４ ～６ 龄 、０ ０ｇ 右 的 １ ７只 昆明母 鼠和 ６ 周 ２ ￣３ 左 ４ ～８周 龄的 Ｉ Ｒ公 鼠作 供 Ｃ
阻滞 ， Ｓ 可 阻 止 Ｈ ０ 对 小 鼠 ２ ＧＨ 。ｚ 一细 胞 期 胚 胎 的 抑制 效 果 ．
关 键词 ：过氧 化 氢 ； 胎 ； 外 发 育 阻 滞 ； 胱 甘 肽 胚 体 谷 中 图分 类 号 ： ８ ５ １ ￥ ６ ． 文 献标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１０ —７ ９ （０ ０ ０ — ０ ８ —０ ０ ４ ９９ ２ １ ）４ ２ １ ４
Hale Waihona Puke 摘 要 ：研究 活 性 氧 （ ＯＳ 一 过 氧 化 氢 和抗 氧 化 剂 一还 原 型 谷 胱 甘肽 （ Ｓ 对 小 鼠 ２ Ｒ ） Ｇ Ｈ） 一细 胞 期 胚 胎 体 外 发 育 的
影 响． 用含 有 不 同浓 度 Ｈ Ｏ。 ｍＳ 的 ＯＦ液 培 养 小 鼠胚 胎 ， Ｈ ０ 从 。浓 度 ０ １ ／ ． ４ｍｇ Ｌ组 开 始 的 囊 胚 发 育 率 显 著
收稿 １期 ： Ｏ Ｏ ｌ 一 １ 基 金 项 目 ： 家 自然科 学 基 金 资 助 项 目（ ０７ ９４ ． ３ ２１— ｌ Ｏ 国 ３２０５）
作 者 简 介 ： 海 星 （ ９ ９ ） 男 （ 鲜 族 ） 吉 林 梅 河 口人 ， 柳 １ ７一 ， 朝 ， 延边 大学 农 学 院动 科 学 系讲 师
２２ ８
１ ３ 胚 胎 的 培 养 ．
延
边
大
学
农
学
学
报
第 ３ 卷 ２
每个 培养液滴 约 ２ Ｌ大小 ， Ｏ 放人 １ 受 精 卵． 它们 放 在 饱 和湿 度 、 Ｃ ９ 空 气 的气 相 条 ｏ枚 把 ５ Ｏ 和 ５ 件， 在 ３ 并 ７℃恒温 的二氧化碳 培养箱 内培养 ． 隔 ２ 每 ４ｈ更换 １次新 鲜培养 液 ， 并观察 记 录胚 胎的发育 情况．
其含 量失控 ， 则可能通 过对类 脂物 和蛋 白质 的过度 过氧化 反应 而危 害细胞 ， 导致 发育阻 断． 肽类物质 ， 具有抗 氧化 和整合解 毒作用 ［ ． Ｓ 能参 与体 内氧化 还 原 过程 ， 和过 氧 化物 及 自由基 结 合 ， ３Ｇ Ｈ ］ 能 以
对抗 氧化 剂对巯 基 的破 坏 ， 护细胞膜 中含 巯基 的蛋 白质 和含巯 基酶 不被破 坏 ， 保 同时还 可对 抗 自由基 对重 要
在离 体培养 哺乳类 （ 括人 ） 包 着床前 早 期胚 胎 的 时候 ， 遍 发 现这 样 的 事实 ： 化 学组 分 确定 的培 养基 普 在 中， 早期胚 胎往往不 能完成 从受精 卵到囊胚 的发 育完 全过程 ， 而停 顿在 某个 特定 的 发 育时期 ， 这种 现 象称 把
作“ 发育停滞 （ｌｃ ｆ ｅｅｏ ｍｅ ｔ” 小 鼠受精 卵在体 外培 养 时 ， 发 育 常停 滞 于 ２ ｂｏｋｏ ｖ ｌｐ ｎ ） ． ｄ 其 一细胞 期 ， 此现 象 称 为 “ 一细胞 停滞 （ 一ｃｌｂｏｋ ”［ ３ ２ ２ ｅｌ ｌｃ ） １ ． —
试 动物．
１２ 小 鼠 ２ ． 一细 胞 期 胚 胎 的 收 集
为 获得更 多的受精 卵 ， 一般 使用 Ｐ Ｇ—ＨＣ ＭＳ Ｇ法进 行超 排处理 ． 射 ＨＣ ６ ６ｈ后 冲卵 ， 注 Ｇ ３ ～４ 得到 ２ 一
细胞期胚 胎． 雌 鼠用 颈椎脱 臼法致死 ， 将 打开腹 腔取 下输卵 管 ， 入培 养液 中． 放
活性 氧（ ＯＳ 来 自氧 的新 陈代 谢 ， 新发 现的一类 信号 分子 ， 们 化学性 质 活 泼 ， 易 引发 氧化 还 原反 Ｒ ） 是 它 容
应． 外源性 ＲＯ Ｓ的加入或 细胞受刺 激后 Ｒ ＯＳ的产生 常常会 引起细胞 内某 些蛋 白激酶 活性 的变化 ， 而激发 从
一
系列磷 酸化 、 去磷 酸化反应 的信 号传 递过 程 ． ｏ２ Ｈ 可作 为各 种 细胞 刺 激 和调 节 系统 中的第 二 信使 ， 果 如 体外培养期 间谷胱 甘肽 的合成对 卵母 细胞及胚 胎 的发 育 有很 重 要 的作 用． Ｈ 属 于含 巯基 的 、 ＧＳ 小分 子
第 ３ ２卷 第 ４ 期 ２１ ０ ０年 １ ２月
Ｖｏ ． ２ ． １ ３ ＮＯ ４
Ｄｅ ． ２ １ ｃ Ｏ Ｏ
ＧＳ 和 过 氧 化 氢 对 小 鼠早 期 胚 胎 体 外 发 育 的 影 响 Ｈ
柳 海 星
（ 边 大 学 农 学 院 动 物 科 学 系 ， 林 延 吉 １ ３０ ） 延 吉 ３ ０ ２
脏器 的损 害 ， 卵母 细胞 中 ＧＳ 浓度 可作为衡 量 哺乳 动物 卵母 细胞 质 和核 成熟程 度 的标 志 ， 助 于早 期 胚胎 Ｈ 有
发育 ５ ４１ ・．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 供 试 动 物 ．
昆 明小 鼠购 于延 边大 学 医学 院实验 动物室 ， Ｒ小 鼠购于北 京维通 利华 实验 动物技术 有 限公 司． 鼠群 Ｉ Ｃ 母 养 ， 鼠单 笼 饲 养 ， 粒 饲 料 ，自由 饮 水 ． ： Ｏ ２ ： ０光 照 ， ０ Ｏ ～ ８ ０ 公 颗 ８ Ｏ～ ＯＯ ２ ：ｏ ： ０黑 暗． 养 室 温 度 控 制 在 饲 １ ￣２ ８ ４℃． 选用 体成 熟 的健康 的 ４ ～６ 龄 、０ ０ｇ 右 的 １ ７只 昆明母 鼠和 ６ 周 ２ ￣３ 左 ４ ～８周 龄的 Ｉ Ｒ公 鼠作 供 Ｃ
阻滞 ， Ｓ 可 阻 止 Ｈ ０ 对 小 鼠 ２ ＧＨ 。ｚ 一细 胞 期 胚 胎 的 抑制 效 果 ．
关 键词 ：过氧 化 氢 ； 胎 ； 外 发 育 阻 滞 ； 胱 甘 肽 胚 体 谷 中 图分 类 号 ： ８ ５ １ ￥ ６ ． 文 献标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１０ —７ ９ （０ ０ ０ — ０ ８ —０ ０ ４ ９９ ２ １ ）４ ２ １ ４
Hale Waihona Puke 摘 要 ：研究 活 性 氧 （ ＯＳ 一 过 氧 化 氢 和抗 氧 化 剂 一还 原 型 谷 胱 甘肽 （ Ｓ 对 小 鼠 ２ Ｒ ） Ｇ Ｈ） 一细 胞 期 胚 胎 体 外 发 育 的
影 响． 用含 有 不 同浓 度 Ｈ Ｏ。 ｍＳ 的 ＯＦ液 培 养 小 鼠胚 胎 ， Ｈ ０ 从 。浓 度 ０ １ ／ ． ４ｍｇ Ｌ组 开 始 的 囊 胚 发 育 率 显 著
收稿 １期 ： Ｏ Ｏ ｌ 一 １ 基 金 项 目 ： 家 自然科 学 基 金 资 助 项 目（ ０７ ９４ ． ３ ２１— ｌ Ｏ 国 ３２０５）
作 者 简 介 ： 海 星 （ ９ ９ ） 男 （ 鲜 族 ） 吉 林 梅 河 口人 ， 柳 １ ７一 ， 朝 ， 延边 大学 农 学 院动 科 学 系讲 师
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１ ３ 胚 胎 的 培 养 ．
延
边
大
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农
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报
第 ３ 卷 ２
每个 培养液滴 约 ２ Ｌ大小 ， Ｏ 放人 １ 受 精 卵． 它们 放 在 饱 和湿 度 、 Ｃ ９ 空 气 的气 相 条 ｏ枚 把 ５ Ｏ 和 ５ 件， 在 ３ 并 ７℃恒温 的二氧化碳 培养箱 内培养 ． 隔 ２ 每 ４ｈ更换 １次新 鲜培养 液 ， 并观察 记 录胚 胎的发育 情况．
其含 量失控 ， 则可能通 过对类 脂物 和蛋 白质 的过度 过氧化 反应 而危 害细胞 ， 导致 发育阻 断． 肽类物质 ， 具有抗 氧化 和整合解 毒作用 ［ ． Ｓ 能参 与体 内氧化 还 原 过程 ， 和过 氧 化物 及 自由基 结 合 ， ３Ｇ Ｈ ］ 能 以
对抗 氧化 剂对巯 基 的破 坏 ， 护细胞膜 中含 巯基 的蛋 白质 和含巯 基酶 不被破 坏 ， 保 同时还 可对 抗 自由基 对重 要