转基因食品检测技术剖析

17日，在武汉举行的全球转 基因农作物发展现状和未来 展望国际研讨会上，来自中 国、美国、巴西等10个国家 的19位生物技术科学家联名 发表“八点共识”，支持转 基因技术用于农作物种植以 确保农业可持续发展，呼吁 包括中国在内的多个国家， 依法推进转基因作物的产业 化。
央视记者武汉转基因水稻调查： 随机买5袋米3袋有转基因 农业部官员：18年来无一起转基 因食品安全问题
此种方法主要检测报告基因、启动子和 终止子，是当前转基因产品检测的重要手段。
核 酸 水 平 检 测 3.1.2定性检测 3.1.3定量检测
3.1.2定性检测
每一次实验均需要设有阴性及 阳性对照以确保实验结果可靠 性。在样品采集及处理过程中 也需要注意防止污染。
聚合酶链式 反应(PCR)
以特定的基因片段( DNA 片断)为模板, 利用人工合成的一对寡聚核苷酸为 引物, 以4种脱氧核苷酸( dNTP)为底物, 在耐高温聚合酶的作用下, 通过 DNA 模板的变性、退火及引物的延伸3个阶段的多次循环, 使模板扩增。转 基因细胞转入的基因成分一般包括启动子( Promotor)、报告基因( Reporter G ene )、目的基因( Target Gene)、终止子( Term inator) , 其中启动子和终 止子为表达目的基因所必需的[ 13] 。至今, 转基因植物常用的是花椰菜花 叶病毒启动子( CaMV 35S )和根癌农杆菌终止子( NOS)。通过PCR 扩增这 些特殊的启动子和终止子序列, 是目前最常用的鉴定食品中有无转基因成分 的方法。
中国暂停转基因大豆进口审批 因是接受度低
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2.主要的转基因上市公司
3. 转基因食品的检测方法
检测主要从两 个方面入手
一是核酸水平，即检测遗传 物质中是否含有插入的外源 基因
二是蛋白质水平，即通过插入外 源基因表达的蛋白质产物或其功 能进行检测，或者是检测插入外 源基因对载体基因表达的影响
3.1核酸水平
转基因食品检测技术
厦门食品科技研发检测中心
1.关于转基ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ作物安全性的争论
黄金大米(右)与 普通大米(左)的 比较。黄金大米 (英语:Golden Rice)是一种转 基因稻米品种， 由美国先正达种 子公司参与研发。
1.1你会接受GMF吗？
2008年，美国塔夫茨大学研究人 员在湖南省衡南县江口镇中心小 学25名儿童中，开展了“黄金大 米”烹制米饭的人体试验。
生 物 传 感 器 技 术
生物传感器(biosensor)对生物物质敏感并将其浓度转换为电 信号进行检测的仪器。是由固定化的生物敏感材料作识别元 件（包括酶、抗体、抗原、微生物、细胞、组织、核酸等生 物活性物质）与适当的理化换能器（如氧电极、光敏管、场 效应管、压电晶体等等）及信号放大装置构成的分析工具或 系统。生物传感器具有接受器与转换器的功能。
总
结
转基因食品的检测方法多种多样，各有其优缺点。在实际的检测中，并非任 何一种检测方法对某种转基因食品的检测都行之有效。应该根据食品种类和加 工类型的不同，以及食品中可能含有的转基因片段的不同，选择最有效的检测 方法。同时，现有的检测方法也在不断的改进中，随着各国有关转基因成分标 签法的建立和不断完善，对转基因成分的准确定量检测显得日趋重要。这就要 求，转基因食品的检测方法向着高质量、高灵敏度、高准确性、自动化和低成 本的方向发展。
3.2蛋白质水平
蛋白质印迹法(Western blot):将电泳较高的分离能 力、抗体的特异性和显色酶反应的灵敏性结合起来, 是检测复杂混合物中特异蛋白质最有力的工具之一, 普遍用于分离、检测特异的目的蛋白质 酶联免疫吸附法(enzymelinked immuno sorbent assay， ELISA) 试纸法 ：主要将特异的抗体交联到试纸条 上和有颜色的物质上, 当纸上抗体和特异抗原结合 后, 再和带有颜色的特异抗体进行反应, 就形成了 带有颜色的三明治机构, 并且固定在试纸条上, 如 果没有抗原, 则没有颜色。
3.1.3定量检测
竞争性PCR
实时荧光定量PCR (Real-time Fluorescence Quantitative PCR)
生物传感器(Bio -sensor)技术
定量检测
多重荧光PCR
基因芯片(Microar -ray) 技术
PCR—ELISA定量
具有PCR方法的相同 优点，可以精确地进 行 GMO的定性检测。 不同之处为可在固体 表面固定上千个特定 的探针，能够一次单 独分析样品中的大量 的不同种类的GMO， 进行筛查、定性、定 量，具有高通量、集 成化和自动化的特点。 此外，微阵列技术非 常灵活，当有新的 GMO出现时可以在阵 列中增加布点，将新 的基因序列包括在筛 查程序中。
蛋 白 质 水 平 检 测
3.2.1酶联免疫吸附法(ELISA)
3.2.2ELISA的各种试验方法
3.2.3双抗夹心法的试验原理
4.发展趋势
（1）加工转基因产品DNA 提取技术不成熟，缺乏检验机构急需的成品试 剂盒，因此真正切实可行的检测体系并没有建立起来； （2）从事转基因产品检测的实验室缺乏内部质量控制机制； （3）与国际接轨、高灵敏度、低成本的检验方法尚未形成。目前应用较 多的两种方法：PCR 检测技术和ELISA 检测技术。
核酸印记法 (southern blot)
以放射性或荧光标记的外源目的基因的同 源序列作为探针与该食品原料农产品的总 DNA进行杂交。首先用限制酶消化受体总 DNA，通过琼脂糖凝胶电泳按大小分离所 得的片断，随后使DNA在原位发生变性， 并从凝胶转移至一固相支持体上。DNA转 移至固相支持体的过程中，各个DNA片断 的相对位置保持不变，用放射性或荧光标 记的探针与各个DNA片断杂交，经放射自 显影确定与探针互补的电泳条带的位置。 核酸印记法技术用于食品外源基因的检测 可检测出外源基因与内源基因有高度同源 性的DNA片断，且准确可靠，但对样品的 纯度要求较高，费用也较高。