2020年猪流行性腹泻病毒(最新课件)

b. ORF3蛋白：ORF3蛋白是编码分子质量为25.3 ku的非结构 蛋白，通过限制性片段长度多态性分析适应Vero细胞的弱 毒PEDV和野毒PEDV的ORF3，发现ORF3与病毒毒力有关 .
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（2）PEDV结构蛋白及其功能
a.S蛋白：S蛋白是由1 383个氨基酸组成、分子质量为180 ku～ 220 ku、位于病毒粒子表面的纤突糖蛋白，在病毒粒子与细胞表 面受体结合后通过膜融合侵入宿主细胞和在感染宿主体内介导 中和抗体产生的过程中发挥重要生物学作用。目前，PEDV S蛋 白中和表位在以烟草花叶病毒为载体的无烟碱烟草植物中得到 了成功表达，表达蛋白免疫接种后，对仔猪具有良好的保护作 用，为PEDV转基因植物疫苗研究奠定了物质基础 。
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• 流行性腹泻有两种临床表现类型，PED I型只影响生长猪，而PED II型则影 响各年龄阶段的猪只，包括哺乳仔猪和成熟母猪。本病潜伏期为2 d，腹泻症 状持续7～14 d。哺乳仔猪当中病情可能较轻微，也可能很严重，死亡率最高 可达40％。 在规模较大的猪群，尤其是集约化猪场当中，母猪群第一波不会 被全部感染，而会反复感染。没有母源抗体保护的仔猪会出现散发的临床症 状。
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4.PEDV的临床症状
• 猪流行性腹泻的病原是一种冠状病毒，与传染性胃肠炎的病原相似。病 毒破坏小肠茸毛，减小营养吸收面积，还导致体液损失，造成脱水。易 感群遭病毒侵入2～3周内即可产生很强的免疫，病毒就会从猪群消失， 尤其是较小的猪群（<300头母猪）。仔猪也可通过初乳获得免疫。易感 群初次接触病原时会爆发急性腹泻，这种情况下母猪发病率可达100％， 有的表现为轻微的腹泻，有的则呈现水样下痢。
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d. E蛋白 ： E蛋白是由76个氨基酸组成、预测分子质量为8.8 ku、位于病毒囊膜上的小 包膜蛋白，对病毒的组装和出芽是必要的。目前，研究者将PEDV的E基因和M基因 导入甲病毒载体(pSFV)，在BHK-21细胞中得到了成功的表达，为进一步探讨E蛋白和 M蛋白在抗病毒中的作用奠定了基础 。
(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus) 。感染动物之后主要 以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染 病 。它是引起10日龄仔猪100％死亡的传染病毒之一，每年给我国养猪业造成20～30 亿左右的经济损失。
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b.N蛋白 ：N蛋白是由441个氨基酸组成、分子质量为55 ku～58 ku、磷酸化的核衣壳蛋 白，与病毒基因组RNA相互缠绕形成病毒核衣壳 ，N蛋白有3个相对保守的结构域， 位于中间的是一个能与病毒RNA前导序列结合的RNA结合域 ，N蛋白在PEDV的结构 蛋白中所占比例最大，在感染的细胞中能得到大量表达。猪在感染PEDV的早期，体 内就能产生抗N蛋白的高水平抗体，又鉴于其冠状病毒N蛋白保守性强，所以利用N 蛋白来建立PEDV分子生物学诊断技术具有很好的应用前景 。
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C.M蛋白 ：M蛋白是由226个氨基酸组成、分子质量为27 ku～32 ku的膜糖蛋白，在病 毒粒子的组装和出芽过程中具有重要作用。在补体存在的条件下，抗M蛋白囊膜外抗 原表位的单克隆抗体能中和病毒的感染性。另外，M蛋白能介导机体产生α干扰素， 所以M蛋白可以作为PEDV基因工程疫苗的候选抗原 。
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3. PEDV的编码蛋白及其功能。
（1）非结构蛋白及其功能：
a.复制酶多聚蛋白1ab(pp1ab) 它是由基因1编码的一个多功能蛋白质，预测分 子质量为753ku，有13个预测蛋白酶切割位点的非结构蛋白，经共转译处理 后产生与病毒基因组复制相关的一系列蛋白质，主要功能包括负链RNA、前 导RNA、sgmRNA和子代病毒RNA的转录作用以及对多聚蛋白切割产生具有 功能产物的蛋白酶切割作用 。另外，ORF1a编码蛋白还含有3个转膜域(T M)。ORF1b主要编码RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)，同时有3个蛋白结构域 分别2020是-11-锌25 指蛋白域(Z)也称金属结合域、螺旋酶域(Hel)和保守序列域(C) 。 6
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N蛋白（Nucleoprotein)、M蛋白（Membrane protein)、SM蛋白（small membrane protein)和S蛋白（Spike protein)，位于SM基因与S基因之间 的ORF，命名为ORF3，编码未知功能且具有多态性的产物。
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2.猪流行性腹泻病毒的基因结构特征 PEDV基因组是单股正链具有感染性的RNA，与其他冠状病毒相似，其
基因组5′端有一个帽子结构(cap)，3′端有1个Poly(A)尾，基因组全长为28 033 nt 。基因组序列包括6个ORF，从5′～3′端依次为编码复制酶多聚蛋白 1ab(pp1ab)、纤突蛋白(S)即糖激化纤突蛋白、ORF3蛋白、小膜蛋白(E)、膜 糖蛋白(M)即糖激化囊膜和核衣壳蛋白(N)的基因 。
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பைடு நூலகம்
• 具体表现为：（1）母猪：腹泻，可能较轻微，泻出牛粪样稀粪，也可能呈 水样下痢；（2）仔猪：腹泻、脱水。死亡率可能会很高；（3）断奶猪与生 长猪：急性水样下痢，无血液或粘液。死亡率通常较低，但发病率可能很高。 病毒首次侵入猪场后，可在包括生长群和繁殖群在内的所有猪只当中迅速传 播，造成腹泻、呕吐，5～10 d内发病率可达100％。潜伏期为2～4 d，呕吐。
2020年猪流行性腹泻病毒（最新课件）
Dr.Feng
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猪流行性腹泻病毒
➢猪流行性腹泻毒 一般概况以及 国内外研究进展
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➢猪流行性腹 泻病毒的分离
➢分离猪流行性腹泻 病毒的讨论
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一、猪流行腹泻病毒的一般概况及国内外研究进展
1.猪流行性腹泻病毒一般概况。 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus， PEDV) ，属于尼多病毒目