植物常规染色体制片-染色和镜检

实验三植物常规染色体制片Ⅲ
染色和镜检
--染色和镜检
（综合性实验）
遵义师范学院生命科学学院韦若勋
实验目的
1掌握植物根尖染色体制片过程中染色的方
一、实验目的
1、掌握植物根尖染色体制片过程中染色的方
法；
2、观察各分裂时期染色体形态,测量典型染
察时期染,染色体长臂和短臂；
3、熟悉染色液的配制；
4、了解植物染色体核型分析的标准。

二实验原理
二、实验原理
主缢痕
二、实验原理
2、核型分析原理
因着丝粒在染色体上的位置差异导致了各染色
因着丝粒在染色体上的位置差异导致各染色体形态差异。

Denver将人体染色体划分成四大类型请问：Denver划分如下4类染色体的臂比临界
请问D
值标准是多少？
三实验器具及试剂
三实验器具及试剂
(二)实验试剂
1、45%醋酸
量取45ml冰醋酸，蒸馏水定溶至100ml。

2姬姆萨母液
2、姬姆萨母液
姬姆萨3.8g与甘油250ml研磨15分钟，60℃水浴2小时，加60℃预热甲醇250m1，混匀、过滤，棕色瓶室温长期保存。

3磷酸缓冲液
3、磷酸缓冲液
称Na
2HPO
4
4.735g，少许蒸馏水溶解后，定溶500ml；
称KH
2PO
4
5.35g ，少许蒸馏水溶解后，定溶500ml，等量混
合。

四实验材料
四、实验材料
涂片法得到的蚕豆或其它植物根尖制片。

五
实验方法与步骤
1、染色
实（1）方法
①Giemsa母液︰缓冲液= 1 ︰7，配成稀释液；浸没全部材料室温染色1530i
②浸没全部材料，室温染色15-30min；③染色后,用小流量自来水冲洗玻片至无色，晾干。

（2）注意事项
染色前材料要定要干否则着色不佳①染色前材料要一定要干，否则着色不佳；②植物固定时间长易着色,反之则反。

第一部分植物染色体标本制备
物种：蚕豆根尖
细胞有丝分裂
.
2014.6.5
姓名：×××
五、实验方法与步骤
五实验方法与步骤
2、镜检观察
（1）分裂细胞观察
低倍镜找分裂细胞区,高倍镜观察染色体形态。

估计染色体数目。

40倍下观察，记录3个视野的细胞总数、分裂细胞和典型染色体细胞数；计算出分裂细胞及典型染色体图象细胞频率。

五实验方法与步骤
五、实验方法与步骤
尽量寻找下列分裂期染色体图像。

五、实验方法与步骤
2、镜检观察
（3）典型染色体标本进行显微照相
六、植物染色体核型分析
六植物染色体核型分析
（一）简述
核型分析包括
①核型：核内染色体原图及其序排图分析
②组型：许多细胞染色体相对长度均值绘
制的模式图分析；
③染色体长度、臂指数和着丝粒指数等参数
描述及其分析。

植物核型分析标准是1984年8月我国第
一次植物染色体学术会陈瑞阳等人制定的建
议标准。

已经成为我国及其他部分国家动、
植物染色体分类的约定标准。

六植物染色体核型分析六、植物染色体核型分析
（二）植物染色体核型分析的约定标准
1、染色体基数确定：30个细胞中染色体数目恒定率达85%以上；
2、染色体绝对长度μm = 放大染色体长度(mm)/放大倍数×10003染色体相对长度(%)绝对长度()/()×100
3、染色体相对长度(%)= 绝对长度(μm)/染色体组总长度(μm)×100
4、臂比= 染色体长臂／短臂；着丝粒指数= 短臂/该染色体长度
5、染色体形态分类：引用Denver 国际染色体命名标准。

1、染色体数目及倍性的确定
（三）植物染色体核型分析的主要内容
30个细胞染色体数目稳定率达85%时定数目；完全相同的染色体数定倍性。

如绿豆2n=2x=22。

2、确定染色体类型、建立核型公式
用染色体绝对长度计算臂比定染色体类型。

2n=22=8m+3sm
六、植物染色体核型分析
、
10
5
5
10
六、植物染色体核型分析
七、实验作业
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Th k Thank you！。