同等学力西医综合:简述鼠源单克隆抗体制备的原理和流程
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同等学力西医综合:简述鼠源单克隆抗体制备的原理和流程?
单克隆抗体(monoclonal antibody)
定义:由一个B淋巴细胞通过有丝分裂繁殖形成的细胞群称为“克隆”。针对一个抗原决定簇,由这一个克隆系产生的抗体称为单克隆抗体
特点:特异性强、性质均一、易于大量生产
单克隆抗体的制备:鼠源单克隆抗体制备
经典杂交瘤单克隆抗体技术
融合前的准备
动物免疫---ELISA法测定抗血清---分离脾细胞、制备骨髓瘤细胞-----饲养细胞----细胞融合—-HAT培养基筛选杂交瘤细胞---阳性孔克隆并扩大培养(细胞冻存)---饲养细胞---再次克隆化---克隆扩大培养(细胞冻存)---扩大培养收集上清、动物接种收集腹水---单克隆抗体纯化保存。