超声微泡在乳腺癌靶向治疗中的作用机制研究进展_姜矜君
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
理想的超声微泡应具备安全无毒、粒径小而均 匀、载药量高，包封率高、靶向性好、体内稳定性好且 易被超声击破。目前所采用的超声微泡均由外膜和 包裹的惰性气体组成，直径均小于 8 μm，可以通过 肺毛细血管，在超声的作用下被激发，产生较强的回 波性能，增 强 肿 瘤 组 织 的 回 声，提 高 肿 瘤 组 织 显 影 度。超声刺激下的微泡可产生微射流、冲击波、流体 喷射波，崩裂时可产生高温、高压，超声刺激微泡产 生振荡、膨胀、坍塌的各种机械力使血管破裂来增加 大分子，基因和细胞的穿透力［1，2］。 1． 1 提高肿瘤细胞膜的通透性 超声微泡可提高 肿瘤细胞膜的通透性，促进微泡内容物吸收。Jenne 等［3］报道，超 声 微 泡 可 增 加 细 胞 膜 通 透 性，且 不 损
106
Baidu Nhomakorabea
制剂，双修饰脂质体（ CL-Ｒ8-LP） 有良好的肿瘤靶向 传递能力，将 CL-Ｒ8-LP 作为化疗药物和 P-gp 抑制 剂的载体，化疗药物在 P-gp 抑制剂的协同作用下， 可有效地蓄积于胞内进而抑制并杀死肿瘤细胞。超 声微泡携带药物不仅降低了药物的毒副作用，且提 高药物在肿瘤局部的浓度，增强了对肿瘤组织的杀 伤作用。 2． 2 超声微泡靶向递送基因 超声微泡作为载体 不但可以在体循环中减少药物的副作用提高病变区 域的药物浓度，还可以保护药物和基因片段不被核 酸酶降解和内皮网状系统清除。基因治疗作用即用 基因工程技术，将外源基因导入靶细胞，以纠正靶细 胞功能缺陷或者为其提供一个新功能。超声靶向微 泡破坏（ UTMD） 技术是一种靶向、高效的基因输送 方法，能有效促进基因的转染和表达，是一种安全有 效的基因传输方式。基因载体包括病毒载体和非病 毒载体，病 毒 载 体 虽 然 转 染 效 率 高，但 存 在 免 疫 原 性，潜在的致肿瘤性和低携带能力； 而非病毒载体转 染效率低。如何制备转染效率高的非病毒载体成为 基因治疗的新方向。超声微泡属于一种非病毒载 体，具 有 制 备 简 单、转 染 效 率 高、无 免 疫 原 性 等 优 势［18］。目前超声微泡 作 为 基 因 的 载 体 已 经 广 泛 应 用到肿瘤、干 细 胞 移 植、心 血 管 疾 病 等 的 基 础 研 究 中，具有广阔的应用前景。
基金项目： 湖北省重点实验室开放基金资助项目（ 2016KZL09） 。 通信作者： 赵云（ E-mail： zhaoyun@ ctgu． edu． cn）
伤中性粒细胞的活性。Taniyama 等［4］研究也发现， 微泡破裂可明显提高肿瘤细胞膜的通透性，甚至使 细胞产生暂时、可逆性小孔。
多数肿瘤中，与临床诊断相关的特征性分子标 记物都位于肿瘤实质细胞上或者血管外基质内。微 泡对肿瘤的靶向显影大多集中在血管内皮上血管内 皮生长因子受体（ VEGFＲ2） 、整合素 αvβ3、血管细 胞黏附分子 （ VCAM-1） 、P 选择素等靶点［5］。传统 的微米级微泡造影剂相对粒径较大（ 2 ～ 10 mm） ，难 以穿过肿瘤新生血管（ 380 ～ 780 nm） ，不能渗透到 血管外组织，使其对肿瘤实质和血管外基质分子的 血管靶向分子显影受到限制。Anderson 等［6］将能与 αvβ3 特异性结合的物质连接到微泡上，对 Met-1 原 位乳腺癌移植瘤进行超声显像，发现靶向微泡组的 对比信号较非靶向组提高了 33 倍。Willmann 等［7］ 利用生物素-链亲和素相互作用制成携 VEGFＲ2 的 单克隆抗 体 靶 向 微 泡 造 影 剂，体 外 实 验 显 示 其 与 VEGFＲ2 阳性细胞的结合率显著高于非靶向微泡造 影剂，且显著高于 VEGFＲ2 阴性细胞的结合率。
关键词： 微泡； 超声微泡； 乳腺肿瘤； 乳腺癌 doi： 10． 3969 / j． issn． 1002-266X． 2017． 19． 033 中图分类号： Ｒ737． 9 文献标志码： A 文章编号： 1002-266X（ 2017） 19-0105-04
化疗是乳腺癌的常用治疗方法，但普通抗肿瘤 药物无法实现在肿瘤部位的靶向聚集并渗透到肿瘤 内部，治疗乳腺癌效果不佳。超声微泡携带药物或 基因靶向治疗肿瘤是近年来超声分子影像学的研究 领域的热点，在肿瘤早期的检测和疗效评价方面具 有可观的应用前景。超声微泡靶向治疗是将超声微 泡作为药物或基因载体，在靶组织区域给予一定强 度的超声辐 照 导 致 微 泡 破 裂，产 生“击 破 效 应 ”，使 其携带的药物或基因定向释放到肿瘤组织，提高肿 瘤组织的药物浓度，达到靶向治疗肿瘤的目的。现 将相关研究进展综述如下。 1 超声微泡在乳腺癌治疗中的作用机制
山东医药 2017 年第 57 卷第 19 期
2． 3 超声微泡靶向递送单克隆载体 免疫治疗即 调动机体的免疫系统，增强抗肿瘤能力，从而抑制和 杀伤肿瘤细胞。将单克隆抗体通过化学连接法与微 泡连接，制备出靶向超声微泡，并对微泡表面进行修 饰，实现微泡携带抗体主动寻靶，在一定强度的超声 辐照下靶向击破微泡，释放出抗体从而作用于机体 的免疫系统，使免疫系统活化而达到增强免疫和抗 肿瘤的效果。
105
山东医药 2017 年第 57 卷第 19 期
障后，将 HEＲ2 阳性的脑转移人乳腺癌细胞（ MDAMB-361） 接种到裸鼠上，结果显示治疗期间，超声联 合抗体组处理后的肿瘤平均体积显著小于单独使用 超声治疗组和单独使用抗体治疗组。目前针对肿瘤 实质及血管外基质的特征性标志物方面的研究很 多［12，13］，但是超声微泡针对肿瘤实质及血管外基质 的特征性标志物的药物治疗方面的研究尚少，因此 制备出携带有肿瘤实质特征性标志物的超声微泡具 有可观临床应用前景。 1． 2 对血管内皮和邻近肿瘤组织的机械损伤 超 声微泡在血管壁内流动时，由于超声的空化效应，可 导致血管壁和邻近肿瘤组织发生机械损伤，甚至使 微血管破裂出血，血管通透性增加，增加内皮间隙。 促进周围细胞氧化应激，启动局部炎症反应，同时促 进巨噬细胞、T 淋巴细胞等炎症细胞浸润。超声微 泡可使肿瘤组织微小血管破裂，阻断肿瘤组织血管 新生； 促进基质细胞衍生因子-1α（ SDF-1α） 、血管细 胞 黏 附 附 分 子 （ ICAM-1 ） 、血 管 内 皮 生 长 因 子 （ VEGF） 的表达，有助于内皮细胞和损伤组织修复。 Wood 等［14］用静脉注射微泡联合低频率超声作用于 小鼠移植性黑色素瘤，发现超声辐照后肿瘤血流灌 注下降，无灌注区域面积较治疗前增大 82% 。 2 超声微泡靶向递送的物质在乳腺癌治疗中的作 用机制 2． 1 超声微泡靶向递送化疗药物 肿瘤的化疗效 果取决于化疗药物在肿瘤局部的有效浓度及持续时 间。采用化疗药物可延长乳腺癌患者的生存期，但 不良反应一直是限制其临床应用的主要问题。紫杉 醇是一种脂溶性药物，是常用的临床乳腺癌化疗药 物，但其导致的化疗不良反应较多。将紫杉醇包载 于微泡中既降低了药物毒副作用，同时提高肿瘤局 部的药物浓度。目前超声微泡载紫杉醇、阿霉素用 于治疗乳腺癌的研究已经非常广泛，制备技术已经 十分成熟，但都处于动物和细胞实验阶段，尚有待于 进一步临床研究进一步应进行应用于临床研究是亟 待解决的问题。Yan 等［15］制备出载紫杉醇脂质体 微泡复合物，在体内外实验证实该复合物较紫杉醇 能更有效的 抑 制 肿 瘤 生 长。 有 学 者［16］ 制 备 共 载 阿 霉素（ DOX） 和维拉帕米（ VEＲ） 双修饰脂质 CL-Ｒ8LP（ DOX + VEＲ） ，考察其对人乳腺癌 MCF-7 细胞的 增殖抑制作用，结果发现将 DOX 和 VEＲ 共同包载 于共修饰脂质体中可显著提高对 MCF-7 细胞的杀 伤力。P-糖蛋白（ P-gp） 在肿瘤细胞膜上过度表达是 其耐药性的主要机制之一［17］，最常用的解决方法是 将 P-gp 抑制剂和化疗药物联用，VEＲ 作为 P-gp 抑
肿瘤的免疫治疗有多年的历史，但一直未成为 主要的治疗手段。近几年，针对免疫检点的单抗治 疗不断在癌症治疗中取得突破性进展，尤其是在黑 色素瘤、肾癌、肺癌和膀胱癌等多种肿瘤治疗中显示 出很好的疗效。PD-1 作为重要的共刺激抑制分子， 在免疫系统中扮演着类似“刹车”的角色［21］，主要在 激活的 T 细胞和 B 细胞中表达，其配体包括 PD-L1 和 PD-L2，PD-L1 主要在免疫细胞（ 如肿瘤浸润淋巴 细胞） 和 上 皮 细 胞 （ 如 肿 瘤 细 胞） 上 诱 导 表 达，而 PD-L2 主要在抗原提呈细胞上表达。机体的肿瘤微 环境会诱导浸润的 T 细胞高表达 PD-1 分子，肿瘤细 胞高表达 PD-L1，导致肿瘤微环境中 PD-1 通路持续 激活，PD-1 和 PD-L1 连接后，T 细胞的功能被抑制， 因此 PD-1 / PD-L1 抑制 T 细胞活化在肿瘤微环境中 发挥重要的作用［22，23］。MPDL3280A（ ＲG7446） 是抗 PD-L1 的单克隆抗体，适用于 PD-L1 阳性患者。有 学者［24］在 2015 美国癌症协会（ AACＲ） 的年会上指 出，MPDL3280A 在晚期三阴性乳腺癌中表现出了持 久的疗效。PD-1 / PD-L1 免疫疗法，是当前抗肿瘤治 疗的热点，但尚未有将抗 PD-L1 的单克隆抗体与微 泡连接用于治疗乳腺癌的研究报道。
基因转染成功的关键是如何将外源基因成功 的、高效的转入靶组织，并调控基因的表达。基因转 染的理想条件是提高细胞膜的通透性而对周围组织 的伤害减少到最低，微泡的空化效应很好的体现了 这一优点。有学者［19］将靶向超声微泡与 CD / TK 双 自杀基因质粒联合前药转染到具有 KDＲ 启动子乳 腺癌 MCF-7 细胞中，给予超声辐照，结果显示 KDＲ 启动子可以驱使 CD / TK 双自杀基因在 MCF-7 细胞 中靶向表达，KDＲP-CD / TK 基因在体外对 MCF-7 细 胞具有靶向杀伤作用。Survivin 是凋亡抑制蛋白家 族的成员，可促进肿瘤分裂增殖，通过抑制 survivin 基因表达，干扰 survivin 的 Thr34 磷酸化可使处于有 丝分裂中的癌细胞发生凋亡并增加化疗药物诱导癌 细胞凋亡的作用。有学者［20］构建沉默人 survivin 基 因的 siＲNA 真核表达载体，采用反相蒸发-机械振荡 法制备出 siＲNA 真核表达载体的脂质微泡，体外实 验显示，载 基 因 靶 向 微 泡 可 特 异 性 结 合 到 高 表 达 HEＲ-2 的乳腺癌细胞上并诱导癌细胞凋亡。微泡 作为基因的载体的安全性、有效性及稳定性已在国 内外许多学者的实验中得到证实，但是其应用于临 床仍有诸多挑战。
山东医药 2017 年第 57 卷第 19 期
超声微泡在乳腺癌靶向治疗中的作用机制 研究进展
姜矜君，赵云 （ 三峡大学医学院，肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室，湖北宜昌 443002）
摘要： 超声微泡携带药物或基因靶向治疗肿瘤是目前的研究热点。超声微泡可通过提高肿瘤细胞膜的通透 性、对血管内皮和邻近组织的机械损伤作用，对肿瘤细胞产生杀伤作用。超声微泡可靶向递送紫杉醇等化疗药物， 降低药物毒副作用，提高肿瘤局部的药物浓度，增强化疗药对肿瘤细胞的杀伤力。超声微泡可将外源基因导入乳 腺癌细胞，以纠正靶细胞的功能缺陷，促进细胞凋亡。超声微泡可通过靶向递送单克隆载体进行免疫治疗，活化免 疫系统，增强机体免疫能力，抑制肿瘤的发生发展。
随着相变型氟碳纳米粒子、纳米级脂质微泡等 纳米级微泡的成功研制，超声微泡在分子显像、药物 传送、基因转染及多学科交叉等领域得到快速发展， 成为给肿瘤血管外显影的一项新方法，。肿瘤新生 血管内皮 细 胞 连 接 不 健 全，血 管 内 皮 间 隙 扩 大 到 380 ～ 780 nm，血管通透性增加，淋巴回流受阻，从而 导致肿 瘤 细 胞 的 高 通 透 性 和 滞 留 效 应。 EＲ［8，9］、 PＲ、HEＲ2［10］是乳腺癌组织 中 特 异 性 分 子 标 志 物。 有学者［11］用聚焦超声（ FUS） 联合微泡空化血脑屏
106
Baidu Nhomakorabea
制剂，双修饰脂质体（ CL-Ｒ8-LP） 有良好的肿瘤靶向 传递能力，将 CL-Ｒ8-LP 作为化疗药物和 P-gp 抑制 剂的载体，化疗药物在 P-gp 抑制剂的协同作用下， 可有效地蓄积于胞内进而抑制并杀死肿瘤细胞。超 声微泡携带药物不仅降低了药物的毒副作用，且提 高药物在肿瘤局部的浓度，增强了对肿瘤组织的杀 伤作用。 2． 2 超声微泡靶向递送基因 超声微泡作为载体 不但可以在体循环中减少药物的副作用提高病变区 域的药物浓度，还可以保护药物和基因片段不被核 酸酶降解和内皮网状系统清除。基因治疗作用即用 基因工程技术，将外源基因导入靶细胞，以纠正靶细 胞功能缺陷或者为其提供一个新功能。超声靶向微 泡破坏（ UTMD） 技术是一种靶向、高效的基因输送 方法，能有效促进基因的转染和表达，是一种安全有 效的基因传输方式。基因载体包括病毒载体和非病 毒载体，病 毒 载 体 虽 然 转 染 效 率 高，但 存 在 免 疫 原 性，潜在的致肿瘤性和低携带能力； 而非病毒载体转 染效率低。如何制备转染效率高的非病毒载体成为 基因治疗的新方向。超声微泡属于一种非病毒载 体，具 有 制 备 简 单、转 染 效 率 高、无 免 疫 原 性 等 优 势［18］。目前超声微泡 作 为 基 因 的 载 体 已 经 广 泛 应 用到肿瘤、干 细 胞 移 植、心 血 管 疾 病 等 的 基 础 研 究 中，具有广阔的应用前景。
基金项目： 湖北省重点实验室开放基金资助项目（ 2016KZL09） 。 通信作者： 赵云（ E-mail： zhaoyun@ ctgu． edu． cn）
伤中性粒细胞的活性。Taniyama 等［4］研究也发现， 微泡破裂可明显提高肿瘤细胞膜的通透性，甚至使 细胞产生暂时、可逆性小孔。
多数肿瘤中，与临床诊断相关的特征性分子标 记物都位于肿瘤实质细胞上或者血管外基质内。微 泡对肿瘤的靶向显影大多集中在血管内皮上血管内 皮生长因子受体（ VEGFＲ2） 、整合素 αvβ3、血管细 胞黏附分子 （ VCAM-1） 、P 选择素等靶点［5］。传统 的微米级微泡造影剂相对粒径较大（ 2 ～ 10 mm） ，难 以穿过肿瘤新生血管（ 380 ～ 780 nm） ，不能渗透到 血管外组织，使其对肿瘤实质和血管外基质分子的 血管靶向分子显影受到限制。Anderson 等［6］将能与 αvβ3 特异性结合的物质连接到微泡上，对 Met-1 原 位乳腺癌移植瘤进行超声显像，发现靶向微泡组的 对比信号较非靶向组提高了 33 倍。Willmann 等［7］ 利用生物素-链亲和素相互作用制成携 VEGFＲ2 的 单克隆抗 体 靶 向 微 泡 造 影 剂，体 外 实 验 显 示 其 与 VEGFＲ2 阳性细胞的结合率显著高于非靶向微泡造 影剂，且显著高于 VEGFＲ2 阴性细胞的结合率。
关键词： 微泡； 超声微泡； 乳腺肿瘤； 乳腺癌 doi： 10． 3969 / j． issn． 1002-266X． 2017． 19． 033 中图分类号： Ｒ737． 9 文献标志码： A 文章编号： 1002-266X（ 2017） 19-0105-04
化疗是乳腺癌的常用治疗方法，但普通抗肿瘤 药物无法实现在肿瘤部位的靶向聚集并渗透到肿瘤 内部，治疗乳腺癌效果不佳。超声微泡携带药物或 基因靶向治疗肿瘤是近年来超声分子影像学的研究 领域的热点，在肿瘤早期的检测和疗效评价方面具 有可观的应用前景。超声微泡靶向治疗是将超声微 泡作为药物或基因载体，在靶组织区域给予一定强 度的超声辐 照 导 致 微 泡 破 裂，产 生“击 破 效 应 ”，使 其携带的药物或基因定向释放到肿瘤组织，提高肿 瘤组织的药物浓度，达到靶向治疗肿瘤的目的。现 将相关研究进展综述如下。 1 超声微泡在乳腺癌治疗中的作用机制
山东医药 2017 年第 57 卷第 19 期
2． 3 超声微泡靶向递送单克隆载体 免疫治疗即 调动机体的免疫系统，增强抗肿瘤能力，从而抑制和 杀伤肿瘤细胞。将单克隆抗体通过化学连接法与微 泡连接，制备出靶向超声微泡，并对微泡表面进行修 饰，实现微泡携带抗体主动寻靶，在一定强度的超声 辐照下靶向击破微泡，释放出抗体从而作用于机体 的免疫系统，使免疫系统活化而达到增强免疫和抗 肿瘤的效果。
105
山东医药 2017 年第 57 卷第 19 期
障后，将 HEＲ2 阳性的脑转移人乳腺癌细胞（ MDAMB-361） 接种到裸鼠上，结果显示治疗期间，超声联 合抗体组处理后的肿瘤平均体积显著小于单独使用 超声治疗组和单独使用抗体治疗组。目前针对肿瘤 实质及血管外基质的特征性标志物方面的研究很 多［12，13］，但是超声微泡针对肿瘤实质及血管外基质 的特征性标志物的药物治疗方面的研究尚少，因此 制备出携带有肿瘤实质特征性标志物的超声微泡具 有可观临床应用前景。 1． 2 对血管内皮和邻近肿瘤组织的机械损伤 超 声微泡在血管壁内流动时，由于超声的空化效应，可 导致血管壁和邻近肿瘤组织发生机械损伤，甚至使 微血管破裂出血，血管通透性增加，增加内皮间隙。 促进周围细胞氧化应激，启动局部炎症反应，同时促 进巨噬细胞、T 淋巴细胞等炎症细胞浸润。超声微 泡可使肿瘤组织微小血管破裂，阻断肿瘤组织血管 新生； 促进基质细胞衍生因子-1α（ SDF-1α） 、血管细 胞 黏 附 附 分 子 （ ICAM-1 ） 、血 管 内 皮 生 长 因 子 （ VEGF） 的表达，有助于内皮细胞和损伤组织修复。 Wood 等［14］用静脉注射微泡联合低频率超声作用于 小鼠移植性黑色素瘤，发现超声辐照后肿瘤血流灌 注下降，无灌注区域面积较治疗前增大 82% 。 2 超声微泡靶向递送的物质在乳腺癌治疗中的作 用机制 2． 1 超声微泡靶向递送化疗药物 肿瘤的化疗效 果取决于化疗药物在肿瘤局部的有效浓度及持续时 间。采用化疗药物可延长乳腺癌患者的生存期，但 不良反应一直是限制其临床应用的主要问题。紫杉 醇是一种脂溶性药物，是常用的临床乳腺癌化疗药 物，但其导致的化疗不良反应较多。将紫杉醇包载 于微泡中既降低了药物毒副作用，同时提高肿瘤局 部的药物浓度。目前超声微泡载紫杉醇、阿霉素用 于治疗乳腺癌的研究已经非常广泛，制备技术已经 十分成熟，但都处于动物和细胞实验阶段，尚有待于 进一步临床研究进一步应进行应用于临床研究是亟 待解决的问题。Yan 等［15］制备出载紫杉醇脂质体 微泡复合物，在体内外实验证实该复合物较紫杉醇 能更有效的 抑 制 肿 瘤 生 长。 有 学 者［16］ 制 备 共 载 阿 霉素（ DOX） 和维拉帕米（ VEＲ） 双修饰脂质 CL-Ｒ8LP（ DOX + VEＲ） ，考察其对人乳腺癌 MCF-7 细胞的 增殖抑制作用，结果发现将 DOX 和 VEＲ 共同包载 于共修饰脂质体中可显著提高对 MCF-7 细胞的杀 伤力。P-糖蛋白（ P-gp） 在肿瘤细胞膜上过度表达是 其耐药性的主要机制之一［17］，最常用的解决方法是 将 P-gp 抑制剂和化疗药物联用，VEＲ 作为 P-gp 抑
肿瘤的免疫治疗有多年的历史，但一直未成为 主要的治疗手段。近几年，针对免疫检点的单抗治 疗不断在癌症治疗中取得突破性进展，尤其是在黑 色素瘤、肾癌、肺癌和膀胱癌等多种肿瘤治疗中显示 出很好的疗效。PD-1 作为重要的共刺激抑制分子， 在免疫系统中扮演着类似“刹车”的角色［21］，主要在 激活的 T 细胞和 B 细胞中表达，其配体包括 PD-L1 和 PD-L2，PD-L1 主要在免疫细胞（ 如肿瘤浸润淋巴 细胞） 和 上 皮 细 胞 （ 如 肿 瘤 细 胞） 上 诱 导 表 达，而 PD-L2 主要在抗原提呈细胞上表达。机体的肿瘤微 环境会诱导浸润的 T 细胞高表达 PD-1 分子，肿瘤细 胞高表达 PD-L1，导致肿瘤微环境中 PD-1 通路持续 激活，PD-1 和 PD-L1 连接后，T 细胞的功能被抑制， 因此 PD-1 / PD-L1 抑制 T 细胞活化在肿瘤微环境中 发挥重要的作用［22，23］。MPDL3280A（ ＲG7446） 是抗 PD-L1 的单克隆抗体，适用于 PD-L1 阳性患者。有 学者［24］在 2015 美国癌症协会（ AACＲ） 的年会上指 出，MPDL3280A 在晚期三阴性乳腺癌中表现出了持 久的疗效。PD-1 / PD-L1 免疫疗法，是当前抗肿瘤治 疗的热点，但尚未有将抗 PD-L1 的单克隆抗体与微 泡连接用于治疗乳腺癌的研究报道。
基因转染成功的关键是如何将外源基因成功 的、高效的转入靶组织，并调控基因的表达。基因转 染的理想条件是提高细胞膜的通透性而对周围组织 的伤害减少到最低，微泡的空化效应很好的体现了 这一优点。有学者［19］将靶向超声微泡与 CD / TK 双 自杀基因质粒联合前药转染到具有 KDＲ 启动子乳 腺癌 MCF-7 细胞中，给予超声辐照，结果显示 KDＲ 启动子可以驱使 CD / TK 双自杀基因在 MCF-7 细胞 中靶向表达，KDＲP-CD / TK 基因在体外对 MCF-7 细 胞具有靶向杀伤作用。Survivin 是凋亡抑制蛋白家 族的成员，可促进肿瘤分裂增殖，通过抑制 survivin 基因表达，干扰 survivin 的 Thr34 磷酸化可使处于有 丝分裂中的癌细胞发生凋亡并增加化疗药物诱导癌 细胞凋亡的作用。有学者［20］构建沉默人 survivin 基 因的 siＲNA 真核表达载体，采用反相蒸发-机械振荡 法制备出 siＲNA 真核表达载体的脂质微泡，体外实 验显示，载 基 因 靶 向 微 泡 可 特 异 性 结 合 到 高 表 达 HEＲ-2 的乳腺癌细胞上并诱导癌细胞凋亡。微泡 作为基因的载体的安全性、有效性及稳定性已在国 内外许多学者的实验中得到证实，但是其应用于临 床仍有诸多挑战。
山东医药 2017 年第 57 卷第 19 期
超声微泡在乳腺癌靶向治疗中的作用机制 研究进展
姜矜君，赵云 （ 三峡大学医学院，肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室，湖北宜昌 443002）
摘要： 超声微泡携带药物或基因靶向治疗肿瘤是目前的研究热点。超声微泡可通过提高肿瘤细胞膜的通透 性、对血管内皮和邻近组织的机械损伤作用，对肿瘤细胞产生杀伤作用。超声微泡可靶向递送紫杉醇等化疗药物， 降低药物毒副作用，提高肿瘤局部的药物浓度，增强化疗药对肿瘤细胞的杀伤力。超声微泡可将外源基因导入乳 腺癌细胞，以纠正靶细胞的功能缺陷，促进细胞凋亡。超声微泡可通过靶向递送单克隆载体进行免疫治疗，活化免 疫系统，增强机体免疫能力，抑制肿瘤的发生发展。
随着相变型氟碳纳米粒子、纳米级脂质微泡等 纳米级微泡的成功研制，超声微泡在分子显像、药物 传送、基因转染及多学科交叉等领域得到快速发展， 成为给肿瘤血管外显影的一项新方法，。肿瘤新生 血管内皮 细 胞 连 接 不 健 全，血 管 内 皮 间 隙 扩 大 到 380 ～ 780 nm，血管通透性增加，淋巴回流受阻，从而 导致肿 瘤 细 胞 的 高 通 透 性 和 滞 留 效 应。 EＲ［8，9］、 PＲ、HEＲ2［10］是乳腺癌组织 中 特 异 性 分 子 标 志 物。 有学者［11］用聚焦超声（ FUS） 联合微泡空化血脑屏