青蒿素的物理提取及胆红素的化学提取

青蒿素的物理提取及胆红素的化学提取
天然产物常用的提取方法用如下几种，
1.浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。

2.渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中，用适当的溶剂润湿膨胀24h～48h，然后不断地添
加新溶剂。

煎煮法煮法是我国最早使用的传统的提取方法
3.回流提取法：应用有机溶剂加热提取时，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。

4．连续提取法：应用挥发性有机溶剂提取天然药物有效成分，不论小型实验或大型生产，均以连续提取法为好，而且需用溶剂量较少，提取成分也较完全。

实验室常用
脂肪提取器或称索氏提取器。

物理法提取有机物的有点是操作简单，使用时候方便，快速，节约成本！化学方法的有点是加快反应速度，提取物相比较而言，要纯度更高！但是价格上来讲，要费用高些！在提取纯度更高的有机物，或者量较少的有机物时候，采用化学方法提取，较为适宜！
青蒿素的物理提取
青蒿素最佳提取工艺研究
青蒿素为菊科植物青蒿中的主要活性成分之一,具有抗疟疾作用。

目前由于提取工艺不成熟,提取率较低,导致成本偏高。

从而导致每年有大量的青蒿材料被浪费,为了充分利用资源,我公司组织对青蒿素的提取工艺进行研究验证,为工业化生产探索道路。

该母液中所含杂质主要为低极性成分，故宜选用极性较大且对青蒿素有较好溶解性的溶剂。

根据青蒿素易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯和苯，可溶于乙醇、乙醚，微溶于冷石油醚，几乎不溶于水的性质，结合文献[5]，最终选用有强渗透能力、对青蒿素有较好溶解性、且能与萃取剂建立良好液-液平衡且价廉低毒的乙醇作提取溶剂。

1仪器与试药
紫外选用日本岛津紫外分光光度仪;万分之一天平(上海);青蒿素标准品购自中国药品生物制品检定所;青蒿药材购自重庆市酉阳县,有效成份含量为4·15%;所用试剂均为分析纯。

2试验方法与结果
2·1提取工艺称取青蒿叶粗粉1 000 g置10 000
mL圆底烧瓶中,加5 000 mL的70%乙醇,回流提取4次,每次1 h,趁热滤过, 80℃回收溶剂至约1 000 mL,用乙酸乙酯萃取至完全,萃取液浓缩成浸膏,用70%乙醇热溶,加2·5%活性碳脱色,趁热滤过,回收乙醇至无
醇味,静置,得黑色柏油状黏液。

称取青蒿叶粗粉1 000 g置10 000mL渗漏瓶中,加70%乙醇刚过药材面,浸泡过夜,以每分钟3 mL的速度收取渗漏液, 80℃回收溶剂至约1 000mL,静置,滤过,沉淀用70%乙醇热溶,加2·5%活性碳脱色,趁热滤过,滤液浓缩至不含醇味,静置,析出结晶。

称取青蒿叶粗
粉1 000 g置10 000mL圆底烧瓶中,加5 000 mL的石油醚,回流称取青蒿叶粗粉1 000 g置10 000mL 圆底烧瓶中,加5 000 mL的120#汽油,回流提取4次,每次1 h,趁热滤过, 80℃回收溶剂至约1 000 mL,静置,滤过,沉淀用70%乙醇热溶,加2·5%活性碳脱色,趁热滤过,滤液浓缩至不含醇味,静置,析出结晶。

乙醇热溶,加2·5%活性碳脱色,趁热滤过,滤液浓缩至不含醇味,静置,析出结晶。

2·2精制方法取粗结晶,加适量70%乙醇热溶,静置,析出结晶。

2·3检测方法照分光光度法,分别取上述供试品溶液、对照品溶液及空白对照溶液,在292 nm 的波长处分别测定吸收度,以对比法计算含量。

270%乙醇回流提取法未析出结晶渗漏提取法
胆红素的化学提取工艺
胆红素是一种直链吡咯化合物，属于二烯胆素类，化学式为I,,L,+R’S+
主要存在于动物的胆和肝脏中，为血红蛋白分解代谢后还原产物。

人体每天可分解形成胆红素)M-(,M-J:。

胆红素在肝内与葡萄糖醛酸结合形成胆红素酯，它在胆汁中约占*-T，其中U-T(*-T 为二葡萄糖醛酸酯，)-T(,-T为单葡萄糖醛酸酯及微量的胆红素与葡萄糖或木糖的结合物。

结合的胆红素呈弱酸性，溶于水，分子大，带电荷，不能通过生物膜，而非结合胆红素的KL 值多为*$,，在体内的酸碱度（ KLVU$)）范围内，不溶于水，溶于脂肪，能透过生物膜进入细胞。

哺乳动物不能排泄非结合胆红素，这种脂溶性的非结合胆红素经肠道后变为尿胆原排出体外。

从猪胆汁中提取的胆红素是珍贵的中药“人工牛黄”的主要原料，目前市场上非常紧缺。

胆红素在药理学上具有镇静、镇惊、促进红血球新生的作用，对乙型脑炎病毒和W256癌细胞有抑制作用
第一种方法:生产工艺:破胆一胆汁加抓仿一加温加碱，再加温一加亚硫酸氢钠和抓仿一加盐酸一分层一回收抓仿，过滤~烘干~装瓶一密封。

1.破胆:取新鲜或冷冻猪胆化冻后，用不锈钢刀破开胆皮，过滤后制得纯胆汁。

2.胆汁加氛仿:按1000ml胆汁加人sml的抓仿计算，加人氯仿，边加边搅拌。

3.加温加碱:加温到50一70℃时停止，按每1000ml胆汁加4%的氢氧化钠60一80ml，慢慢加人，搅拌均匀后，测定pH为11一12即
可。

4再加温:再继续加温到98一100℃，沸腾3分钟，降温至20一30℃。

5.加亚硫酸氢钠和氛仿:按每1000克胆汁加1.5克亚硫酸氢钠的比例加人，边加边搅拌均匀，再加人30%的氛仿，搅拌均匀。

6.加盐酸:按胆汁量的10%加人20%稀盐酸，边加边搅拌，pH值3一4为止。

7.分层:取酸化的胆汁，装人层析柱或分液漏斗中静止，完全分层为止。

取最下层的胆红素氯仿液，慢慢放人蒸馏瓶或烧瓶中。

8.回收氯仿:将蒸馏瓶加热(80℃以内)，
待瓶中氯仿蒸干后，再加人少量无水乙醇继续加温蒸馏，直至将残余氯仿完全蒸干为止。

趁热抽滤至干，再用50一70℃热酒精冲洗一次抽干，再加少量乙醚冲洗抽干即可。

9.装瓶，密封。

第二种方法:生产工艺:制取钙盐一酸化一酒精沉淀~水洗一氯仿抽提~冲洗与保存。

1.制取钙盐
先配好石灰乳(石灰:水=1:12)或石灰水(石灰:水=1:30)，取其澄清溶液。

取新鲜胆汁称重，在胆汁中加人0.4倍的石灰乳或4倍的石灰水，放人搪瓷盆内加温到60一70℃时除去白沫，加温到95℃时，保温2分钟，冷却至60一65℃时过滤，取其钙盐。

2.酸化
将过滤后的钙盐称重，加人0.5%的亚硫酸氢钠，再加人稀盐酸，至pH值为1一2，滤出酸液。

3.酒精沉淀
将酸化的钙盐称重，加人0.5%亚硫酸氢钠。

用钙盐等量的酒精将钙盐溶解呈糊状，再加人9倍量的酒精，并搅拌均匀。

取用酒精配制的稀盐酸(1:1)加人，调PH值至3，静置沉淀2.5小时后，倒出上面的废酒精，保留沉淀物。

4.水洗
在沉淀的钙盐中加人其重量0.5%的亚硫酸氢钠和10倍量的60一65℃的热水，并搅拌均匀，封闭溶解半小时。

溶解后，用120目筛过滤出钙盐。

5.氯仿抽提
将水洗后的钙盐称重，加人0.3%的亚硫酸氢钠和10倍量的氯仿抽提3小时，提取第一次抽提液置三角烧瓶中;再加人钙盐重量0.3%的亚硫酸氢钠和10倍量的抓仿抽提1小时，取其第二次抽提液;再将滤渣加人0.3%的抗氧化剂和5倍量的氯仿，制得第三次抽提液。

将三次抽提液合并置于三角烧瓶中，称重，并加人0.3%的亚硫酸氢钠。

将三角烧瓶置于80℃的热水盆中回收氯仿。

在回收过程中，若有胆红素结晶析出，可加人少量酒精，使其溶解，继续回收氯仿，直至收净氯仿。

过滤出呈橘红色较纯净的胆红素。

6.冲洗与保存
将滤出的胆红素用酒精冲滤3一4次。

再用蒸馏水、无水酒精、乙醚等各冲洗两次。