番茄中番茄红素检测方法的改进

Abstract: The chloroform and petrolem ether as extraction agent for testing the lycopene were compared w ith Toluene. The results showed that there was no significant difference w ithin the three kinds of agents. Therefore, it was comp letely workable for using chloroform , petrolem ether to rep lace the Strong carcinogenic reagent toluene of current national standard method. Key words:Lycopene; Detection ; Imp rovement
收稿日期 : 2009 - 10 - 20 作者简介 :杨定清 (1964 - ) ,女 ,四川彭州 ,副研究员 ,从事食品
及环境分析技术研究 。
对实现绿色分析 ,保障检测人员身体健康具有重要 意义 。
1 材料与方法
111 试验材料 新鲜番茄约 500 g,用匀浆机捣碎备用 。
112 主要仪器与试剂 实验所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 , 水 为 去 离 子 水 ;
2003, 32 ( 6) : 760 - 763. [ 6 ]荣廷昭. 田间试验与统计分析 [M ]. 北京 :中国农业科技出版社 ,
1998. [ 7 ]环境科学大辞典编委会. 环境科学大辞典 [M ]. 北京 : 环境科学
出版社 , 1991.
(责任编辑 陈 虹 )
为了比较不同浸提液测定结果差异显著性 ,以 甲苯为对照 ,对平均值进行了经统计学 DLSD[ 6 ] 法 检验 ,比较了平均值之间的差异水准 (表 3) ,结果表 明 ,氯仿与对照甲苯比较 ,平均值较接近 , DLSD 值 为 1. 40,大大小于 DLSD0. 05 = 5. 25,该两种方法间差 异不显著 ,置信度为 95 % ;石油醚与对照甲苯比较 , 平均值偏低 ,但 DLSD 值为 5. 20,也小于 DLSD0. 05 = 5. 25,该 2种方法间差异也不显著 ,置信度为 95 %。
2010 年 Vo l123
23卷 1期 No11
Sou
西 南 农 业 学 报 thwest China Journal of Agricultural
Sciences
277
文章编号 : 1001 - 4829 (2010) 01 - 0277 - 03
番茄中番茄红素检测方法的改进
杨定清 1 ,谢永红 1 ,王 棚 1 ,周 娅 1 ,代晓航 1 ,孙力军 2
(1. 四川省农科院分析测试中心 ,四川 成都 610066; 2. 四川省产品质量监督检验检测院 ,四川 成都 610072)
摘 要 :通过对比实验 ,以三氯甲烷 、石油醚作检测番茄红素的提取剂 ,与提取剂甲苯作比较 ,结果差异性不显著 ,因此以较低毒性 的三氯甲烷 、石油醚代替目前国标法中强致癌试剂甲苯完全可行 。 关键词 :番茄红素 ; 检测 ; 改进 中图分类号 : S641. 2 文献标识码 : A
果见表 2,国标方法推荐的甲苯为浸提剂 , 5 次测定 结果平均为 55. 2 mg / kg, RSD %为 3. 03;用氯仿为 浸提剂 , 5 次测定结果平均为 56. 6 mg / kg, RSD % 为 3. 65;用石油醚为浸提剂 , 5 次测定结果平均为 50. 0 m g / kg, RSD %为 1. 58。 RSD %来自百度文库小于 5,符 合一般微量分析的要求 。 213 不同浸提液测定结果差异显著性检验 (DLSD 法)
W FJ27200分光光度计 ,上海仪器有限公司 ; 甲醇 : GB / T 683;甲苯 : GB / T 684; 三氯甲烷 : GB / T682; 石 油醚 : GB / T15894; 无水乙醇 : GB / T 678; 苏丹 Ⅰ色 素 :符合 Q / ss. J02290292。 113 试验方法 1. 3. 1 工作曲线配制 称取 0. 025 g苏丹 Ⅰ色素 , 精确到 0. 001 g,用少量无水乙醇溶解 ,定量移入 50 mL 容量瓶中 ,并用无水乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,此溶 液含苏丹 Ⅰ色素 500 mg /L。准确吸取上述溶液 0、 0. 26、0. 520. 78、1. 04、1. 30 mL ,分别注入 50 mL 容 量瓶中 ,用无水乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,即相当于 0、 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5 mg /L 番茄红素标准溶液浓
表 3 不同浸提液测定结果差异显著性检验 ( DL SD ) Table 3 D ifference significance exam ination of results from different
leaching solution (DLSD method)
提取液 甲苯 (对照 ) Toluene (CK)
样品中番茄红素浓度 5次测定值 (mg/ kg)
54
55
57
59
51
57
61
59
54
52
51
52
49
48
50
平均值 A ve rage (mg/ kg)
55. 2
56. 6
50. 0
RSD ( % )
3. 03 3. 65 1. 58
度 。在 485 nm 下 ,以无水乙醇为空白溶液校零 ,分 别测定其吸光度 ,建立一元线性回归方程 [ 4 ] 。 1. 3. 2 用甲苯提取番茄中的番茄红素 称取匀浆 后的番茄试样 5 g左右 ,精确至 0. 001 g,置于 50 mL 烧杯中 。在烧杯中加入少量甲醇 ,立即用玻璃棒充 分搅拌 ,抽取番茄中的黄色素 ,将抽提液移入带滤纸 的玻璃漏斗中过滤 ,烧杯里残渣再加入少量甲醇 ,重 复上述操作 ,直到滤液无色 ,弃去滤液 。在残渣中分 数次用少量甲苯提取残渣中的番茄红素 ,直到滤液 无色为止 ,将滤液收集于 50 mL 容量瓶中 ,并用提取 液甲苯定容 ,摇匀 ,即为番茄红素提取液 。 1. 3. 3 用三氯甲烷提取番茄中的番茄红素 方法 同 1. 3. 2,番茄红素提取溶剂改为三氯甲烷 。 1. 3. 4 用石油醚提取番茄中的番茄红素 方法同 1. 3. 2,番茄红素提取溶剂改为石油醚 。 1. 3. 5 测定 吸取上述 3种提取液 1～2 mL 分别 注入 10 mL 比色管中 ,用乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,此 为样品上机液 ,同时分别吸取同样体积的浸提剂 ,用 乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,此为空白液 。然后分别注入 比色皿中 ,在 485 nm 下 ,以相应的空白溶液校零 ,用 分光光度计测定其吸光度 ,用线性回归方程计算试 样提取液中番茄红素的浓度 (表 2) 。
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西 南 农 业 学 报 23卷
表 1 标准曲线 Table 1 Standard curves of lycopene
番茄红素浓度 (mg/L) C Concentration of lycopene
0. 00
0. 50
吸光度 A
回归方程 Regression equation 相关系数 Correlation coefficient
2 结果与分析
211 标准工作曲线 由表 1可见 ,番茄红素浓度在 0～2. 50 mg /L 范
围内 ,浓度与吸光度之间有较好的线性关系 ,其相关 系数为 0. 9999。 212 不同浸提液测定结果精确度比较
为了比较不同浸提液对测定结果精确度的影 响 ,对同一样品采用 3种不同浸提方法进行测定 ,结
0. 00
0. 113
1. 00
1. 50
2. 00
0. 238
0. 354
A = 0. 2372C - 0. 0024 r = 0. 9999
0. 474
2. 50 0. 588
浸提剂
甲苯 Toluene 氯仿 Chloroform 石油醚 Petrolem ether
表 2 不同浸提液测定结果精确度比较 Table 2 Precision comparison of results from different leaching solution
测定结果 平均值 (mg / kg)
55. 2
与对照的差数 及显著性
-
氯仿 Chloroform
56. 6
1. 40 < 5. 25 不显著
石油醚 Petrolem ether 注 : DLSD0. 05 = 5. 25。
50. 0
5. 20 < 5. 25 不显著
1期
杨定清等 :番茄中番茄红素检测方法的改进
目前 ,番茄红素检测方法主要有液相色谱法 [ 3 ] 和比色法 [ 4 ] ,前者由于仪器昂贵难以普及 ,后者为 比色法 ,但所用试剂之一为强致癌试剂甲苯 ,严重威 胁操作人员的身体健康 ,对环境也造成极大的危害 。 为此依据番茄红素的理化特性 [ 2, 5 ] ,本研究以甲苯 、 三氯甲烷 、石油醚作为检测番茄红素的浸提溶剂 ,参 照 GB / T1421522008[ 4 ] ,以期找出一种或两种毒性较 小 ,能替代剧毒甲苯的试剂 ,用于番茄红素的测定 ,
番茄红素 (Lycopene)是成熟番茄的主要色素 , 是一种不含氧的类胡萝卜素 ,具有很强的抗氧化剂 , 有极强清除自由基的能力 ,对防治前列腺癌 、肺癌 、 乳腺癌 、子宫癌等有显著效果 ,还有预防心脑血管疾 病 、提高免疫力 、延缓衰老等功效 ,被称为植物黄金 , 誉为“21世纪保健品的新宠 ”[ 1 ] 。随着人们生活水 平的提高 ,保健意识逐渐增强 ,番茄红素越来越受到 重视 ,国家也将番茄红素列为绿色食品茄果类蔬菜 营养指标加以规定 [ 2 ] 。
[ 2 ]NY / T655 - 2002,绿色食品茄果类蔬菜 [ S ].
[ 3 ] GB / T22249 - 2008,保健食品中番茄红素的测定 [ S ]. [ 4 ] GB / T14215 - 2008,番茄酱罐头 附录 A [ S ]. [ 5 ]李雪雁. 番茄红素的生产与检测研究 [ J ]. 电子科技大学学报
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目前国家标准方法无显著差异 ,从毒害性看来 ,甲苯 最大 ,三氯甲烷次之 ,石油醚最小 [ 7 ] ,因此 ,在实验 室环境抽风设备较好的条件下 ,可选三氯甲烷 ,一般 的实验室选石油醚作番茄红素的提取剂也能满足检 测要求 。 参考文献 :
[ 1 ]邓 宇 , 杨 燕 , 陆海燕 , 等. 番茄红素提取工艺的初步研究 [ J ]. 化工科技 , 2002, 10 ( 1) : 11 - 14.
Im provem en t of D etection of L ycopene from Toma to
YANG D ing2qing1 , X IE Yong2hong1 , WANG Peng1 , ZHOU Ya1 , DA I Xiao2hang1 , SUN L i2jun2 ( 1. Testing Center of Sichuan Academy of Agricultural Sciences, Sichuan Chengdu 610066, China; 2. Product Quality Supervision, Inspection and Testing Institute of Sichuan Province, Sichuan Chengdu 610072, China)
3 结 论
GB / T1421522008 要求平行测定结果的绝对差 值为 ≤20 mg / kg即合格 ,从 3种方法的测量平均值 来看 ,最高值与最低值之间的绝对差值小于 20 mg / kg,那么 , 3种方法的测定值都是可以接受的 。三氯 甲烷 ,石油醚作浸提剂测定番茄中番茄红素 ,结果与