药敏试验ppt课件
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③ 提供所选择药物的依据;
C
② 指导临床医生合理选择抗生 B 素,AST的结果为“耐药”,则
应更换药物。
④ 监测耐药性,分析耐药菌变 迁,掌握耐药菌感染病流行病学,
D
控制和预防耐药菌感染发生和流 行。
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第二章
药敏试验常用方法
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第一节 药敏试验常用方法
01
纸片扩散法
Kirby-Bauer法(K-B 纸片琼脂扩散法)和
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一、纸片扩散法
试验原理
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸 片中所含的药物吸收琼脂中水分,溶解后不断向纸片周围扩散形成递 减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从 而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测 定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系,即抑菌圈 愈大,MIC值愈小
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第三章
医院获得性感染
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医院感染的定义
医院感染(Nosocomial Infection,Hospital Infection)的概念 指住院病人在医院内获得的感染,包括 在住院期间发生的感染和在医院内获得出 院后发生的感染;但不包括入院前已开始 或入院时已存在的感染。医院工作人员在 医院内获得的感染也属医院感染。(2001, MOH)
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二、稀释法
试验原理
将药物混匀于琼脂培养基中,配制含不同浓度药物平板,使用多 头接种器接种细菌,经孵育后观察细菌生长情况,以抑制细菌生长的 琼脂平板所含药物浓度测得MIC。 MIC:稀释法所测得的某抗菌药物能抑制被检菌肉眼可见生长的最低浓 度
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三、抗生素浓度梯度法-E 试 验
试验原理
E试条是一条 5mm×50mm的无孔试剂载体,一面固定有预先制备的, 浓度呈连续指数增长稀释抗生素,另一面有读数和判别的刻度。将E试 条放在细菌接种过的琼脂平板上,经孵育过夜,围绕试条明显可见椭 圆形抑菌圈,圈的边缘与试条交点的刻度浓度即为抗生素抑制细菌的 最低浓度。
对菌下药
与此同时,“对菌下药”又难以 获得满意效果。耐药菌尤其是 多重耐药菌的出现,使临床医 师按照抗生素的作用机制选择 1~2种抗菌药物不能覆盖常见 的病原菌。因此,药敏试验成 为临床工作的重要手段之一。
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第三节 药敏试验的意义
① 可பைடு நூலகம்测抗菌药物治疗的效 果, “敏感”治疗可能有效;
A
“耐药” 可能失败;
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结果判断和报告 读取椭圆形抑菌 圈与E试验试条 的交界点值,即 为MIC值
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三种方法的比较
纸片扩散法
稀释法
E-Test
操作简单,重复性好;
标准化方法,结果可靠;
成本较低;无需特殊设备; 检测菌的范围更广;
优点
灵活选择抗菌药物;
定量检测;
结果容易理解
更好地反映菌株耐药程度
操作简单; 定量检测
正常定植菌与感染的关系不明确时; 污染菌; 已知细菌对某种抗生素天然耐药; 已知细菌对某种抗生素全部敏感。
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第三节 安康检验微生物检测
药敏
目前我中心开展的微生物检测主 项目众多,比较常见的有血培养 (需氧、厌氧)、幽门螺旋杆菌培 养、骨髓培养、中段尿+菌落计数、 大便常规培养、霍乱弧菌培养、咽 拭子、痰培养、脑脊液培养、穿刺 液培养、胸腹水培养、浓汁及创伤、 眼耳分泌物、前列腺液培养、念珠 菌培养、一般细菌培养、肥达氏反 应、外斐氏反应等数十种。
抗菌药物敏感性试验
Antimicrobial Sensitivity Test
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第一章
药敏试验的概述
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第一节 药敏试验的定义
药敏试验简称药物敏感试验(或耐药试验)。 旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或 耐受)程度,以指导临床合理选用抗生素药物 的微生物学试验。一种抗生素如果以很小的剂 量便可抑制、杀灭致病菌,则称该种致病菌对 该抗生素“敏感”。反之,则称为“不敏感” 或“耐药”。
不适用于生长较慢
缺点 或生长速率不同的菌株
以及某些苛养菌
操作费时费力
成本太高,常规试验 很难应用; 局限性,主要用于苛 养菌或厌氧菌
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第二节 哪些细菌需要做药敏试 验?
对任何分离的可疑病原菌,若不能从该 菌的种属特征可靠地推知其对抗菌药物 的敏感性,就需要进行药敏试验。
以下情况不必进行药敏试验:
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判定标准
一、药敏实验的结果,应按抑菌圈直径大小作为判 定敏感度高低的标准。
表一 药敏试验判定标准
抑菌圈直径(毫米)
敏感度
20以上
极敏
15~20
高敏
10~14
中敏
10以下
低敏
具体对于0 不同的菌株,不敏及不同的抗生素纸片需参
照NCCLs的标准或者CLSI标准。
二、药物敏感实验判定标准参考表1,多黏菌素抑 菌圈;在9毫米以上为高敏,6—9毫米为低敏,无 抑菌圈为不敏。
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第二节 还能轻松对症下药吗?
对症下药
当前,“对症下药”已经变得难以奏效。 首先,致病菌的种类发生了改变,一种 疾病可以由多种病原菌所引起,包括致 病菌和条件致病菌;其次,感染人群发 生变化,从健康人群到老年人、长期使 用激素、免疫抑制剂及放疗、化疗的人 群,临床症状常常不典型;最后,早期 不规范使用抗生素,也会导致临床症状 不典型。
直接纸片药敏法
02
稀释法
03
抗生素浓度梯度法
琼脂稀释法和肉 汤稀释法。
抗生素浓度梯度法E 试 验(E-test)
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第二节 药敏试验大致方法
YAO MIN SHI YAN DA ZHI FANG FA
为了解致病菌对哪种抗菌素敏感,以合理用药,减少盲目 性,往往应进行药物敏感试验。其大致方法是:从病人的 感染部位采取含致病菌的标本,接种在适当的培养基上, 于一定条件下培养;同时将分别沾有一定量各种抗生素的 纸片贴在培养基表面(或用不锈钢圈,内放定量抗生素溶 液),培养一定时间后观察结果。由于致病菌对各种抗生 素的敏感程度不同,在药物纸片周围便出现不同大小的抑 制病菌生长而形成的“空圈”,称为抑菌圈。抑菌圈大小 与致病菌对各种抗生素的敏感程度成正比关系。于是可以 根据试验结果有针对性地选用抗生素。
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小结
药物敏感实验后,应选择高敏药物进行治疗,也可选用两种 药物协助使用,以减少耐药菌株。在选择高敏药物时应考虑药 物的吸收途径,因为我们药敏实验是药液直接和细菌接触,而 在给患者用药的时候,必须通过机体的吸收才能使药物达到一 定的效果,所以在给患者用药时,高敏药物一定要配合适宜的 给药方法,这样才会达到好的治疗效果。