木通属植物的同工酶研究
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冷 冻离 心机 下 以 １ ０ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ， 取 上 清
反之越远 Ｊ ． 同工酶与植物体 内许多生理代谢活动 有关 ， 进行植物的同工酶分析不仅可 以了解其遗传 差异 ， 还可以很好地 了解其 生理活动状态． 同时， 同 工酶分析方法简便快速 ， 结果准确 ， 并具有 良好的重 现性 和稳 定性 ， 实验成本低廉 ， 应 用 性 强 ．目前 ，
１ ． ２ ． １ Ｐ Ｏ Ｄ同工酶 电泳 （ ｉ ） 样 品制备
分别称
止痛 、 舒肝益肾、 抗菌消炎 的药用价值 ， 还有降压 、 抗 肿瘤 、 抗 衰老等作 用 引．
同工酶 是基 因表 达 的 产 物 ， 同工 酶 酶 谱 差 异 主 要来 源 于基 因差 异 ． 同工 酶 酶 谱 差 异 大 小 可 以确 定 物种 间 的亲缘 关 系 ， 酶谱 差 异 越 小 ， 亲缘 关 系越 近 ，
Ｖ０ １ ． ３ ７ Ｎｏ ． ６ ＮＯ Ｖ． ２ ０１ ３
文 章编 号 ： １ ０ ０ ０ － ５ ８ ６ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ － ０ ６ １ ７ － ０ ４
木 通 属 植 物 的 同工 酶研 究
黄佩蓓 ， 陈世 华 ， 王
（ 江西 中医药大学基础医学院 ， 江西 南昌
飞
３ ３ ０ ０ ０ ４）
摘要 ： 以３ 种药用木通属植物为研究对象， 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术， 对其进行同工酶的比较研究．
结果表 明 ： ３种木通 的 Ｐ Ｏ Ｄ以及 Ｓ Ｏ Ｄ同工酶酶谱分 别具有 一些共 有带 ， 但 酶带数 量与 活性强度 有差异 ； 木通与 三叶木通及 白木通酶谱 差异较 大 ， 亲缘 关系较远 ； 三叶木 通与 白木 通酶谱 差异 较小 ， 亲缘 关 系较
联 苯胺 贮 液 ＋１ ８ ｍＬ Ｈ２ ０＋ ２滴 Ｈ ０ ： ） 染色 ， 常温 下 染色 ３ ｍ ｉ ｎ左右 ， 水 冲洗 后照 相 ． 结果 见 图 １和 图 ２ ．
１ ． ２ ． ２ Ｓ Ｏ Ｄ同工酶电泳
（ ｉ ） 样品制备
分别称
究未 见 报道 ． 本文 以木通 、 三 叶木 通 和 白木 通 为 材
近． 此 与形态方面 的分类 相一致．
关 键词 ： 木通属 ； 同工酶； 相似系数
中图分 类号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． １ ９
文 献标 志码 ： Ａ
缘关系， 以期为生理生化研究和资源开发利用提供
０ 引言
木通属 （ ４ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ） 是木 通科 （ Ｌ ａ ｒ ｄ ｉ ｚ ａ ｂ ａ ｌ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ） 的
第３ ７ 卷 第６ 期 ２ ０ １ ３年 １ １ 月
江西 师 范大学 学 报 （ 自然科 学版 ） Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ Ｎ ｏ ｒ ｍ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ （ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ）
取木通 、 三 叶木 通 、 白 木 通 ３种 样 品 的 新 鲜 叶 片 ０ ． ５ ｇ ， 除 叶柄剪 碎置 于研 钵 中 ， 加入 １ ｍ Ｌ ４ ｏ Ｃ预 冷 的 电极 缓 冲 液 （ ｐ Ｈ值 为 ８ ． ３ ） ， 在 冰 浴 上 研 磨 成 匀 浆， 再 加缓 冲液 ２ ｍＬ ， 冰浴 中放 置 ３ ０ ｍ ｉ ｎ后 ， 在 高速
理 论依 据 ．
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材料
落叶或半常绿藤本植物 ， 全世界共有 ４种 ， 我 国有 ３ 种 和 ２个 变 种 … ， 其 中 ３种 ： 木通 （ Ａ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ｑ ｕ ｉ ｎ ａ ｔ ａ
（ Ｔ ｈ ｕ ｎ ｂ ． ）Ｄ ｅ ｃ ｎ ｅ ． ） 、三 叶 木 通 （ Ａ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ｔ ｒ ｆ ｉ ｏ ｌ ｉ ａ ｔ ａ （ Ｔ ｈ ｕ ｎ ｂ ． ） Ｋ ｏ ｉ ｄ ｚ ． ） 及 其 变 种 白木 通 （ Ａ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ｔ ｒ ｆ ｉ ｏ ｌ ｉ ａ ｔ ａ
的磷酸缓冲液 （ ｐ Ｈ值 为 ７ ． ８ ） ， 在冰浴 上研磨成匀
基金项 目： 江 西省 科技厅科技计划 （ ２ ０ ０ ９ Ｂ Ｓ Ｂ ０ ９ ４ ０ ） 资助项 目． 通信作者 ： 陈世华 （ １ ９ ６ ４ ． ） ， 男， 江西南 昌人 ， 副教授 ， 主要从事运动生化研究
木通 、 三 叶木 通 、 白木 通 新 鲜 叶 片 ， 同 时采 集 于 江 西 中医学 院神 农 园 ， 均 由江 西 中医学 院赖 学 文 教
授 鉴定 ．
１ ． ２ 方法
（ Ｔ ｈ ｕ ｎ ｂ ． ） Ｋ ｏ ｉ ｄ ｚ ． ｖ ａ ｒ ． Ａ ｕ ｓ ｔ ｒ ａ ｌ ｉ ｓ （ Ｄ ｉ ｅ ｌ ｓ ） ） 为《 中华 人 民 共和国药典） ） ２ ０ ０ ５版规定的正 Fra Baidu bibliotek“ 木通” 来源 ， 是“ 龙 胆泻肝丸” 等３ Ｏ 余种经典中成药的主要原料． 现代药 理学研究 证 明其不 仅 具 有清 热 利 尿 、 活血通脉、 理 气
木通 属植 物 的 同工 酶 研 究 报 道 不 多 ， 木通 、 三 叶
木通 和 自木 通 ３种 药用 木通 属植 物 的 同工酶 比较 研
液， 分别加入等体积的 ４ ０ ％蔗糖溶液 ， 摇匀 ， 置冰箱 冷藏备用． （ ｉ ｉ ） 电泳与染色 采用 ４ ． ０ ％浓缩胶与 ７ ． ５ ％分 离胶制备凝胶板． 采用抗坏血酸一 联苯胺染色法４ ｍ Ｌ
取木 通 、 三 叶木 通 、 白 木 通 ３种 样 品 的 新 鲜 叶 片
料， 对其过氧化 物 同工酶 （ Ｐ Ｏ Ｄ ） 、 超 氧化物歧 化酶 同工酶 （ Ｓ Ｏ Ｄ ） 进行 比较研究 ， 探讨其酶谱特征及亲
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ － ０ ９ — １ ６
０ ． ５ ｇ ， 除 叶柄剪 碎置 于研 钵 中 ， 加入 １ ｍ Ｌ ４℃预 冷
反之越远 Ｊ ． 同工酶与植物体 内许多生理代谢活动 有关 ， 进行植物的同工酶分析不仅可 以了解其遗传 差异 ， 还可以很好地 了解其 生理活动状态． 同时， 同 工酶分析方法简便快速 ， 结果准确 ， 并具有 良好的重 现性 和稳 定性 ， 实验成本低廉 ， 应 用 性 强 ．目前 ，
１ ． ２ ． １ Ｐ Ｏ Ｄ同工酶 电泳 （ ｉ ） 样 品制备
分别称
止痛 、 舒肝益肾、 抗菌消炎 的药用价值 ， 还有降压 、 抗 肿瘤 、 抗 衰老等作 用 引．
同工酶 是基 因表 达 的 产 物 ， 同工 酶 酶 谱 差 异 主 要来 源 于基 因差 异 ． 同工 酶 酶 谱 差 异 大 小 可 以确 定 物种 间 的亲缘 关 系 ， 酶谱 差 异 越 小 ， 亲缘 关 系越 近 ，
Ｖ０ １ ． ３ ７ Ｎｏ ． ６ ＮＯ Ｖ． ２ ０１ ３
文 章编 号 ： １ ０ ０ ０ － ５ ８ ６ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ － ０ ６ １ ７ － ０ ４
木 通 属 植 物 的 同工 酶研 究
黄佩蓓 ， 陈世 华 ， 王
（ 江西 中医药大学基础医学院 ， 江西 南昌
飞
３ ３ ０ ０ ０ ４）
摘要 ： 以３ 种药用木通属植物为研究对象， 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术， 对其进行同工酶的比较研究．
结果表 明 ： ３种木通 的 Ｐ Ｏ Ｄ以及 Ｓ Ｏ Ｄ同工酶酶谱分 别具有 一些共 有带 ， 但 酶带数 量与 活性强度 有差异 ； 木通与 三叶木通及 白木通酶谱 差异较 大 ， 亲缘 关系较远 ； 三叶木 通与 白木 通酶谱 差异 较小 ， 亲缘 关 系较
联 苯胺 贮 液 ＋１ ８ ｍＬ Ｈ２ ０＋ ２滴 Ｈ ０ ： ） 染色 ， 常温 下 染色 ３ ｍ ｉ ｎ左右 ， 水 冲洗 后照 相 ． 结果 见 图 １和 图 ２ ．
１ ． ２ ． ２ Ｓ Ｏ Ｄ同工酶电泳
（ ｉ ） 样品制备
分别称
究未 见 报道 ． 本文 以木通 、 三 叶木 通 和 白木 通 为 材
近． 此 与形态方面 的分类 相一致．
关 键词 ： 木通属 ； 同工酶； 相似系数
中图分 类号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． １ ９
文 献标 志码 ： Ａ
缘关系， 以期为生理生化研究和资源开发利用提供
０ 引言
木通属 （ ４ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ） 是木 通科 （ Ｌ ａ ｒ ｄ ｉ ｚ ａ ｂ ａ ｌ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ） 的
第３ ７ 卷 第６ 期 ２ ０ １ ３年 １ １ 月
江西 师 范大学 学 报 （ 自然科 学版 ） Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ Ｎ ｏ ｒ ｍ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ （ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ）
取木通 、 三 叶木 通 、 白 木 通 ３种 样 品 的 新 鲜 叶 片 ０ ． ５ ｇ ， 除 叶柄剪 碎置 于研 钵 中 ， 加入 １ ｍ Ｌ ４ ｏ Ｃ预 冷 的 电极 缓 冲 液 （ ｐ Ｈ值 为 ８ ． ３ ） ， 在 冰 浴 上 研 磨 成 匀 浆， 再 加缓 冲液 ２ ｍＬ ， 冰浴 中放 置 ３ ０ ｍ ｉ ｎ后 ， 在 高速
理 论依 据 ．
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材料
落叶或半常绿藤本植物 ， 全世界共有 ４种 ， 我 国有 ３ 种 和 ２个 变 种 … ， 其 中 ３种 ： 木通 （ Ａ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ｑ ｕ ｉ ｎ ａ ｔ ａ
（ Ｔ ｈ ｕ ｎ ｂ ． ）Ｄ ｅ ｃ ｎ ｅ ． ） 、三 叶 木 通 （ Ａ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ｔ ｒ ｆ ｉ ｏ ｌ ｉ ａ ｔ ａ （ Ｔ ｈ ｕ ｎ ｂ ． ） Ｋ ｏ ｉ ｄ ｚ ． ） 及 其 变 种 白木 通 （ Ａ ｋ ｅ ｂ ｉ ａ ｔ ｒ ｆ ｉ ｏ ｌ ｉ ａ ｔ ａ
的磷酸缓冲液 （ ｐ Ｈ值 为 ７ ． ８ ） ， 在冰浴 上研磨成匀
基金项 目： 江 西省 科技厅科技计划 （ ２ ０ ０ ９ Ｂ Ｓ Ｂ ０ ９ ４ ０ ） 资助项 目． 通信作者 ： 陈世华 （ １ ９ ６ ４ ． ） ， 男， 江西南 昌人 ， 副教授 ， 主要从事运动生化研究
木通 、 三 叶木 通 、 白木 通 新 鲜 叶 片 ， 同 时采 集 于 江 西 中医学 院神 农 园 ， 均 由江 西 中医学 院赖 学 文 教
授 鉴定 ．
１ ． ２ 方法
（ Ｔ ｈ ｕ ｎ ｂ ． ） Ｋ ｏ ｉ ｄ ｚ ． ｖ ａ ｒ ． Ａ ｕ ｓ ｔ ｒ ａ ｌ ｉ ｓ （ Ｄ ｉ ｅ ｌ ｓ ） ） 为《 中华 人 民 共和国药典） ） ２ ０ ０ ５版规定的正 Fra Baidu bibliotek“ 木通” 来源 ， 是“ 龙 胆泻肝丸” 等３ Ｏ 余种经典中成药的主要原料． 现代药 理学研究 证 明其不 仅 具 有清 热 利 尿 、 活血通脉、 理 气
木通 属植 物 的 同工 酶 研 究 报 道 不 多 ， 木通 、 三 叶
木通 和 自木 通 ３种 药用 木通 属植 物 的 同工酶 比较 研
液， 分别加入等体积的 ４ ０ ％蔗糖溶液 ， 摇匀 ， 置冰箱 冷藏备用． （ ｉ ｉ ） 电泳与染色 采用 ４ ． ０ ％浓缩胶与 ７ ． ５ ％分 离胶制备凝胶板． 采用抗坏血酸一 联苯胺染色法４ ｍ Ｌ
取木 通 、 三 叶木 通 、 白 木 通 ３种 样 品 的 新 鲜 叶 片
料， 对其过氧化 物 同工酶 （ Ｐ Ｏ Ｄ ） 、 超 氧化物歧 化酶 同工酶 （ Ｓ Ｏ Ｄ ） 进行 比较研究 ， 探讨其酶谱特征及亲
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ － ０ ９ — １ ６
０ ． ５ ｇ ， 除 叶柄剪 碎置 于研 钵 中 ， 加入 １ ｍ Ｌ ４℃预 冷