多系统联合分析应用于复杂亲缘关系鉴定

男性，同胞６—８为女性。对上述ｌＯ份血液样本采用 ｃｈｅｌｅｘｌ００法抽提ＤＮＡ。委托人声称的与死者及死者 父母的遗传关系（见图１）。
因座不符合由同一对父母所生的遗传规律；同胞６或
７在Ｐｅｎｔａ Ｄ基因座也发现与全同胞遗传基因相矛盾
的数据。 ２．２常染色体１９个必检ＳＴＲ基因座分型系统全同 胞关系状态一致性评分 兄弟姐妹同胞８人的生物学全同胞关系累计状 态一致性（ＩＢＳ，Ｉｄｅｎｔｉｔｙ
（ｉ＝１，２，３，…，ｎ） １．５累积祖孙亲权指数的计算 累积祖孙亲权指数的计算按照规范进行【２】。其中 对于未能重建的“不确定或空白”等位基因视为非生 父基因，似然率计算公式『３】中分子概率以“零”赋值。
被检女孩亲生祖母的遗传基因条件。
２结果与分析
２．１
常染色体ＳＴＲ基因分型 兄弟姐妹同胞８人常染色体ＳＴＲ基因座分型结
Ｂｙ
Ｓｔａｔｅ）评分结果见表２。同
胞３、４与其他６个同胞的ＩＢＳ评分低于２２，无法认定 他们和其他６人之间存在全同胞关系。同胞７与８之 间ＩＢＳ也低于２２。
图１ 委托人声称的遗传关系
２．３性染色体ＳＴＲ基因分型 男性同胞的１７个Ｙ—ＳＴＲ基因座分型结果见表
１．２
ＳＴＲ扩增 常染色体的ＳＴＲ扩增采用Ｇｏｌｄｅｎｅｙｅ ２０Ａ系统
ＳＴＲ基因座
女孩生母
女孩
女孩生父基因
重建祖父母基因型
重建祖母基因型
・６４・
万方数据
中国司法鉴定２０１４年第２期（，ｆｌＡｇ ７３期）
续表５
３讨论
在亲子鉴定技术中，如果被检父缺失，可以考虑 用被检父的父母来进行祖孙关系鉴定，从而间接证明 父子亲子关系。但本案被检父的父母已过世，只能通 过他们尚还健在的亲生子女的基因型检验来推测重 建其父母基因型。本案在合同评审阶段强调了“全同 胞”参与这一前提条件。即作为用于重建缺失父母 ＤＮＡ数据的参照，参与鉴定的人员必须是这对父母 所亲生的同父同母全同胞。但实际检验结果表明，８ 份声称为死者全同胞的兄弟姐妹血样在多个ＳＴＲ基 因座上存在着与全同胞遗传规律相互矛盾的基因型 数据．因此无法推测重建其父母基因型。 生物学全同胞关系累计状态一致性（ＩＢＳ，Ｉｄｅｎｔｉ—
收稿日期：２０１３—１２—１８ 基金项目：国家十二五科技支撑计划课题（２０１２ＢＡＫｌ６８０１）
胡某与死者王某的非婚生亲生女儿．向法院主张自己 的遗产继承权。王某的兄弟姐妹对该女孩是否为王某 所亲生提出了质疑，遂向法院申请对女孩进行亲子鉴 定。介于王某和其亲生父母均已过世，关键遗传数据 缺失，只能通过王某全同胞兄弟姐妹的遗传数据来重 建部分关键遗传数据进而问接证明王某与女孩的亲 子关系。在此不利情形下，若将常染色体ＳＴＲ基因分 型、性染色体ＳＴＲ基因分型、生物学全同胞关系累计 状态一致性评分标准等多种分析系统联合协同应用． 将有利于获得更接近真实的案件结论。
中国司法鉴定２０１４年第２期（总第７３期） 鉴定实践
Ｆｏｒｅｎｓｉｃ Ｐｒａｃｔｉｃｅ
多系统联合分析应用于复杂亲缘关系鉴定
柳燕，赵珍敏，李莉，朱如心
（司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室，上海２０００６３）
摘 要：目的探讨多种检测系统用于祖孙、同胞等复杂亲缘关系鉴定的效能。方法采用常染色体、性染色体ＳＴＲ检测
ＩＤｖ３．２ Ａｒｇｕｓ
Ｘ一１２试剂盒（德国ＱＩＡｇｅｎ公司）。所有系统的扩增条
１．４常染色体ＳＴＲ基因座分型系统累计状态一致
性（ＩＢＳ）评分的计算川 两名个体在同一基因座上可出现相同的等位基 因，这些等位基因的“一致性”即称为状态一致性。该 等位基因称为状态一致性等位基因。相应地，在１个 ＳＴＲ基因座上．两名被鉴定人间的状态一致性等位基 因个数称之为ＩＢＳ评分（Ｉｎｄｅｎｔｉｔｙ
（北京基点认知公司）、性染色体的ＳＴＲ扩增分别应 用Ｙｆｉｌｅｒ试剂盒（美国ＡＢ公司）和Ｉｎｖｅｓｔｉｇｃｔｉｏｎ 件均按各试剂盒说明书进行。 １．３扩增产物的检测和数据分析 扩增后产物用３１３０ＸＬ遗传分析仪（美国ＡＢ公司） 进行毛细管电泳．用基因分析软件ＧｅｎｅＭａｐｐｅｒ 检测各基因座基因型。
３。结果表明同胞１，２和５具有完全相同的Ｙ—ＳＴＲ单 倍型．符合同一父系遗传特征；而同胞３、４则不具备 与他们相同的Ｙ—ＳＴＲ单倍型，不符合同一父系遗传 特征。 兄弟姐妹同胞８人的１２个Ｘ—ＳＴＲ基因座分型 结果见表４。除同胞６在ＤＸＳｌ０１３４基因座出现了不 符合母源遗传规律的矛盾数据外，其他同胞均符合同 母所生的遗传基因条件。 ２．４多种分析系统联合协同应用推断被鉴定人遗 传关系
ｔｈｅ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｍｕｌｔｉ—ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ ｔｅｓｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｔｏ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔ
ａｓｓｅｓｓ
ＩＢＳ（ｉｄｅｎｔｉｔｙ
ｂｙ ｓｔａｔｅ）ｓｃｏｒｅ ｆｏｒ ｃｏｍｐｌｅｘ ｋｉｎｓｈｉｐ
Ｔｈｅ ｅｌｉｇｉｂｌｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｂｙ
１５ １３ ２４ ３０１’ １６ １５ １２－１９ １４ １０
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１５
，
谢
１３ ２４ ２９ １６ １５ １２一１９ １４ １０
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ＤＹ￥３９１
・６３・
万方数据
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｒｅｎｓｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１４，Ｎｏ．２ Ｔｏｔａｌ Ｎｏ．７３ 续表３
果（见表１）。同胞３、４与其他兄弟姐妹在多个ＳＴＲ基
．６２・
图２多系统联合分析推断的遗传关系
万方数据
中圊司法鉴定２０１４年第２期（总第７３期）
表１ 兄弟姐妹同胞八人常染色体ＳＴＲ基因座分型结果
ＤＹＳ４５６ ＤＹ￥３８９１ ＤＹＳ３９０
１５ １３ ２４ ２９ １６ １５ １２－１９ １４ １０
１５ １３ ２４ ２９ １６ １５ １２—１９ １４ １０
ａ
ｍｕｌｔｉ—ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ
ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ＩＢＳ Ｓｃｏｒｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｄａｔａ ｗａｓ ｕｓｅｄ
ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｐｅｒｓｏｎｓ ｗｈｏ ｗｅｒｅ ａｂｓｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｓｏｍｅ ｋｉｎｄ ｏｆ ｒｅａｓｏｎｓ．Ｔｈｅ ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｏｓｅ ａｌｌｅｌｅｓ ｔｈａｔ
１材料与方法
１．１样本和ＤＮＡ提取 女孩血样和女孩生母血样各１份：死者王某的兄 弟姐妹８人血样，标记为同胞１～８，其中同胞１～５为
．６１．
作者简介：柳燕（１９６３一），女，主任法医师，副研究员，主要从
事法医物证学鉴定和研究工作。Ｅ—ｍａｉｌ：ｑｌｉｕｙａｎ＠１６３．ＣＯｒｎ。
万方数据
Ｃ——ｈ——ｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒ—ｎ—ａｌ——ｏ．一ｆ—Ｆｏ—ｒ—ｅ．—ｎ—ｓ———ｉ．—ｃ。——Ｓ———ｃｉｅｎｃｅｓ，。．．．．．２．．．．．０．．．．．１．．４．．．．．，．．．．。Ｎ．——ｏ．。２ Ｔｏｔａｌ Ｎｏ．７—３—
ｓｃｏｒｅ），若
采用包含ｎ个相互独立的常染色体遗传标记分型系 统对两名被鉴定人进行检测，各个遗传标记上的ＩＢＳ 评分之和即为累计状态一致性评Байду номын сангаас，记作ＩＢＳ。
／ＢＳ＝ｉｂｓｌ＋ｉｂｓ２＋ｉｂｓ３＋…＋ｉｂｓ。＝∑ｉｂｓ。
ｎ＝Ｊ
的概率。经计算，累积祖孙亲权指数为１４８３６５９．９６。并 且，推测出的母亲可能的Ｘ—ＳＴＲ基因型也符合作为
系统以及常染色体ＳＴＲ基因座累计状态一致性评分方法筛选符合要求的参照样本．分析复杂亲缘关系鉴定中缺失被鉴 定人的等位基因，对无法重建的“空白”等位基因，以最不利于“认定亲缘关系”的假设取概率值计算似然率。结果在一复 杂亲缘关系鉴定案例中，从８个声称的全同胞中筛选出５个符合同父同母遗传条件的全同胞作为参照样本用于重建缺 失被鉴定人等住基因，重建的父母相关基因型符合作为被检女孩亲生祖父母的遗传基因条件．祖孙亲缘关系似然率为 １４８３６５９．９６。结论在复杂亲缘关系鉴定中联合协同应用常染色体ＳＴＲ基因分型、性染色体ＳＴＲ基因分型、生物学全同胞 关系累计状态一致性评分标准等多种分析系统有利于获得更接近真实的案件结论。 关键词：法医遗传学；复杂亲缘关系；ＳＴＲ分型；全同胞；似然率 中图分类号：ＤＦ７９５．４ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－２０７２．２０１４．０２．０１５ 文章编号：１６７１—２０７２一（２０１４）０２—００６１—０６
ｃｏｕｌｄ ｎｏｔ ｂｅ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ｆｏｒ ｃａｌｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ “ｐｏｓｉｔｉｖｅ”．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｉｎ ｐｌｅｓ
ｔｏ
ａ
ｒａｔｉｏ（ＬＲ）ｏｆ
ｋｉｎｓｈｉｐ ｗａｓ ａｓｓｉｇｎｅｄ
ｏｎ
ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ａｇａｉｎｓｔ ｔｈｅ ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ ｏｆ
Ｃｏｍｐｌｅｘ Ｋｉｎｓｈｉｐ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｂｙ Ｍｕｌｔｉ－ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ＩＢＳ Ｓｃｏｒｅ
ＬＩＵ Ｙａｈ，ＺＨＡ ０ Ｚｈｅｎ—Ｍｉｎ，ＬＩ Ｌｉ，ＺＨＵ Ｒｕ－ｘｉｎ
（Ｓｈａｎｇｈａｉ
Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｔｏ
ｏｆＦｏｒｅｎｓｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＦｏｒｅｎｓｉｃ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆＪｕｓｔｉｃｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００６３，Ｃｈｉｎａ）
ｓｃｏｒｅ
ｃｏｕｌｄ ｈｅｌｐ ｔｏ ａｄｄｒｅｓｓ ｍｏｒｅ ｃｏｍｐｌｅｘ ｋｉｎｓｈｉｐ ｔｅｓｔｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｆｏｒｅｎｓｉｃ ｇｅｎｅｔｉｃｓ ｃｏｍｐｌｅｘ ｋｉｎｓｈｉｐ；ＳＴＲ ｇｅｎｏｔｙｐｅ；ｆｕｌｌ ｓｉｂ；ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ
ｒａｔｉｏ（ＬＲ）
在亲子鉴定实践活动中，经常有父或（和）母已 亡，或因某种原因不能参与检验，为了认亲、移民、继 承财产，人户等，要求进行亲子鉴定。这种亲子鉴定案 例由于一些关键被鉴定人的缺失．必须根据案件实际 情况要求隔代、全同胞或旁系人员参与鉴定，用于关 键被鉴定人数据的参照推测。形成了复杂亲缘关系鉴 定。近期笔者受理的一例交通事故赔偿纠纷案即属于 本情形。在某大城市打工的王某死于上班途中一场意 外的交通事故，其在家乡的兄弟姐妹作为家属（王某 未婚．其父母均已过世）与车祸责任方达成赔偿协议 后将王某火化。其后，一女孩作为原告，称自己是母亲
ａｓ
ｃｏｍｐｌｅｘ ｋｉｎｓｈｉｐ ｔｅｓｔ。５ ｆｕｌｌ ｓｉｂｓ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｏｕｔ ｆｒｏｍ ８ ａｌｌｅｇｅｄ ｆｕｌｌ ｓｉｂｓ
ｗａｓ
ｅｌｉｇｉｂｌｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓａｍ—
ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔ ｔｈｅ ａｂｓｅｎｔ ｐａｒｅｎｔｓ’ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｗｈｉｃｈ
ｍａｔｃｈｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｇｒａｎｄｐａｒｅｎｔｓ’ｏｆ
Ｂｙ Ｓｔａｔｅ
根据常染色体ＳＴＲ基因分型、性染色体ＳＴＲ基
因分型、生物学全同胞关系累计状态一致性评分标 准【１】等多种分析系统联合应用，推断出被鉴定人遗传 关系（见图２）。在此前提条件下根据被检女孩及其生 母常染色体和Ｘ染色体ＳＴＲ基因座分型结果以及根 据全同胞１、２、５、６、８重建的父母相关基因型比对结 果见表５。结果表明推测出的父母可能的常染色体基 因型符合作为被检女孩亲生祖父母的遗传基因条件。 对未推测出的“空白”等位基因，在祖孙亲缘关系似然 率计算中根据最不利于被检女孩与“推测出的父母” 存在祖孙亲缘关系的原则推定祖父母传递生父基因
ａ
ａｌｌｅｇｅｄ ｇｒａｎｄｄａｕｇｈｔｅｒ ｉｎ ｔｈｅ
ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ＬＲ ｏｆ ｇｒａｎｄｐａｒｅｎｔｓ ａｎｄ ｇｒａｎｄｃｈｉｌｄ ｗａｓ １４８３６５９．９６．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉ－ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ＩＢＳ
ｔｙ Ｂｙ
ＳＴＲ基因座为必检基因座，其判定标准为：ＩＢＳ≥２２， 倾向于认为两名被鉴定人为全同胞；ＩＢＳ≤１３，倾向 于认为两名被鉴定人为无关个体。１３＜ＩＢＳ＜２２．无法给 出倾向性意见。用该标准对本案例中８个声称的全同 胞兄弟姐妹进行筛选，其中同胞３、４与其他６个同胞 的ＩＢＳ评分介于２２与１３之间．无法认定他们和其他 ６同胞之间存在全同胞关系。同胞７与同胞８之间 ＩＢＳ也低于２２。为严格“全同胞”参与这一前提条件。 除剔除同胞３、４的数据参与分析外，考虑同胞７在