药物薄层色谱鉴别概述
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* 内蒙古通辽职业学院药学院（028000） 2012 年 8 月 16 日收稿
3.1 波长选用：丹皮酚对照液，在 200～400nm 波长范围内扫描测 定紫外吸收光谱。发现在 275nm 波长处有最大吸收，故本实验选 择在 275nm 处测定其含量。 3.2 溶剂提取方法的选择：通过大量实验考察了采用不同溶剂，不 同的提取方法对丹皮酚的提取无显著差别，但采用 70%乙醇超声 30min 的方法提取测得含量高。该方法操作简便，经济且节约资 源，故可选择此方法从金匮肾气丸中提取丹皮酚进行含量测定。 3.3 流动相的选择：参考文献所用流动相最初的比列为甲醇-水冰乙酸（80：20：1）。在与对照品出峰相同的时间内出现干扰，继 续调整流动相的比列为甲醇-水-冰乙酸（60：40：1），干扰仍未排 除。最后流动相的比列调整为甲醇-水-冰乙酸（50：50：1），此时无 干扰。最终选用此比例作为该实验的流动相。 参考文献 [1]寸时灿,等.HPLC 法测定金匮肾气丸中丹皮酚含量[J].中国中药 杂志,2004,24（4）：309-310. [2]中国药典[M].2005 版.化学工业出版社.492-493. [3]郭戎,狄留庆,谢辉,等.HPLC 法测定金匮肾气丸中丹皮酚的含 量[J].中国中药杂志,1998,23(3)：156-157.
2.1 色谱条件：色谱柱 BDS（4.6×250mm）柱温 30℃；流动相甲醇水-冰乙酸（50：50：1）[3]，流速 1.0ml·min-1；检测波长 275；灵敏度 0.15AUFS，进样量 10ul。在此条件下样品色谱中丹皮酚的峰达到 基线分离，且阴性对照无干扰。 2.2 标准曲线的制备：精密称取丹皮酚对照品（真空减压干燥置恒 重）20mg，置 100ml 量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照 品储备溶液。精密量取对照品溶液 1ml 置 10ml 容量瓶中，用甲醇 定容至刻度。制得丹皮酚标准溶液，取上述标准溶液，按文中的色 谱条件分别进样 5ul，10ul，15ul，20ul，25ul 测定，取三次峰面积的 平均值作图，得一良好直线，数据经回归处理,方程为 Y=2E+07X+ 35087.r=0.9997，丹皮酚在 0.01～0.05mg·ml-1 线性关系良好。 2.3 供试品溶液的的制备：取重量差异项下的大蜜丸适量，剪碎， 取约 1.0g，精密称定，加硅藻土 1.0g，研匀。精密加入 70％乙醇 50ml，称定重量，置超声仪中超声 30min，放冷，称定重量，用 70％ 乙醇补充减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.4 进样精密度考察：取对照品溶液（浓度为 0.0242mg·ml-1），连续
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内蒙古中医药
药物定性与定量研究
ＨＰＬＣ 法测定金匮肾气丸中丹皮酚的含量
吕文龙 *
摘 要：目的：建立中成药金匮肾气丸（大蜜丸）中丹皮酚的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法（HPLC法）色谱柱：大连中汇达 科学仪器BDS（4.6×250mm）；流动相：甲醇-水-冰乙酸（50：50：1）；检测波长275nm，流速：1.0ml·min-1。结果：丹皮酚在0.01326mg·ml-1～ 0.05525mg·ml-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0.9995，回收率99.2%。结论：该法简便快捷，结果准确，可用于金匮肾气丸 （大蜜丸）中丹皮酚的含量测定和质量控制[1]。 关键词：金匮肾气丸；丹皮酚；高效液相色谱法；含量测定
பைடு நூலகம்
中图分类号：R284.1
文献标识码：B
文章编号：1006-0979（2012）20-0028-01
金匮肾气丸[2]是由牡丹皮、茯苓等加工而成的大蜜丸，收载于 《中国药典》2005 版，但药典没有设立“含量”测定本文采用 HPLC 法测定其中主药金匮肾气丸中牡丹皮的含量，方法简便易行，结 果准确，重复性好，可用于金匮肾气丸的含量测定。 1 仪器、试剂与样品
药物薄层色谱鉴别概述
马 江*
摘 要：薄层色谱法，是指将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所 得的色谱图作对比，用以进行药物的鉴别、杂质检查或含量测定的方法[1]。本文介绍了薄层层析法的原理，操作方法，展开剂配置，注意 事项，应用优点及其在药物鉴别、杂质分析、质量控制等方面的局限性。 关键词：薄层色谱；原理；操作方法；展开剂配置
仪器：日立 L-2000 高效液相色谱仪 SHB-3 循环水多用真空 泵、BIO-TEK535 紫外可见检测器、HL-01 溶剂过滤器、真空泵 HS3120、超声清洗器 SVC-300 高精度全自动稳压电源 Anastar Elite LC Control 色谱工作站、NST-890-0203 L-2200Auto-sampler 自动进样器 phenomenex C18 色谱柱。
试剂：甲醇；色谱纯；无水乙醇，冰醋酸；其它试剂均为分析 纯。
样品：金匮肾气丸 （包头中药有限责任公司生产批号为 1004113） 对照品 丹皮酚 （中国药品生物制品检定所提供 批号 708-9704）。 2 实验与结果
进样 5 次，测定峰面积，计算其 RSD=0.9％（n=5）结果表明该法精 密度良好。 2.5 阴性对照试验：按卫生部药品标准“金匮肾气丸”项下制备不 含牡丹皮的阴性试液，按供试品制备方法制备，测定，结果表明处 方中其他药材和辅料不干扰丹皮酚的测定。 2.6 重复性实验：精密称取同一批样品（批号为 1004113）5 份，按 供试品制备方法制备，测定，结果表明测定重复性较好，RSD= 2.8%，n=5。 2.7 稳定性实验：取批号为 1004113 的样品溶液，每隔 1h 进样一 次，共进样 6 次，结果表明，丹皮酚峰面积值在 6h 之内稳定， RSD= 1.28%。 2.8 加样回收率实验：精密称取供试品 3 份（每个批号各取 3 份）， 每份约 0.5g，分别加入加入 0.1mg·ml-1、0.2mg·ml-1、0.3mg·ml-1 的 丹皮酚，按样品测定项下方法制备成供试品溶液并测定其含量， 计算回收率，RSD=1.28%，n=9。 3 结果与讨论
3.1 波长选用：丹皮酚对照液，在 200～400nm 波长范围内扫描测 定紫外吸收光谱。发现在 275nm 波长处有最大吸收，故本实验选 择在 275nm 处测定其含量。 3.2 溶剂提取方法的选择：通过大量实验考察了采用不同溶剂，不 同的提取方法对丹皮酚的提取无显著差别，但采用 70%乙醇超声 30min 的方法提取测得含量高。该方法操作简便，经济且节约资 源，故可选择此方法从金匮肾气丸中提取丹皮酚进行含量测定。 3.3 流动相的选择：参考文献所用流动相最初的比列为甲醇-水冰乙酸（80：20：1）。在与对照品出峰相同的时间内出现干扰，继 续调整流动相的比列为甲醇-水-冰乙酸（60：40：1），干扰仍未排 除。最后流动相的比列调整为甲醇-水-冰乙酸（50：50：1），此时无 干扰。最终选用此比例作为该实验的流动相。 参考文献 [1]寸时灿,等.HPLC 法测定金匮肾气丸中丹皮酚含量[J].中国中药 杂志,2004,24（4）：309-310. [2]中国药典[M].2005 版.化学工业出版社.492-493. [3]郭戎,狄留庆,谢辉,等.HPLC 法测定金匮肾气丸中丹皮酚的含 量[J].中国中药杂志,1998,23(3)：156-157.
2.1 色谱条件：色谱柱 BDS（4.6×250mm）柱温 30℃；流动相甲醇水-冰乙酸（50：50：1）[3]，流速 1.0ml·min-1；检测波长 275；灵敏度 0.15AUFS，进样量 10ul。在此条件下样品色谱中丹皮酚的峰达到 基线分离，且阴性对照无干扰。 2.2 标准曲线的制备：精密称取丹皮酚对照品（真空减压干燥置恒 重）20mg，置 100ml 量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照 品储备溶液。精密量取对照品溶液 1ml 置 10ml 容量瓶中，用甲醇 定容至刻度。制得丹皮酚标准溶液，取上述标准溶液，按文中的色 谱条件分别进样 5ul，10ul，15ul，20ul，25ul 测定，取三次峰面积的 平均值作图，得一良好直线，数据经回归处理,方程为 Y=2E+07X+ 35087.r=0.9997，丹皮酚在 0.01～0.05mg·ml-1 线性关系良好。 2.3 供试品溶液的的制备：取重量差异项下的大蜜丸适量，剪碎， 取约 1.0g，精密称定，加硅藻土 1.0g，研匀。精密加入 70％乙醇 50ml，称定重量，置超声仪中超声 30min，放冷，称定重量，用 70％ 乙醇补充减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.4 进样精密度考察：取对照品溶液（浓度为 0.0242mg·ml-1），连续
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内蒙古中医药
药物定性与定量研究
ＨＰＬＣ 法测定金匮肾气丸中丹皮酚的含量
吕文龙 *
摘 要：目的：建立中成药金匮肾气丸（大蜜丸）中丹皮酚的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法（HPLC法）色谱柱：大连中汇达 科学仪器BDS（4.6×250mm）；流动相：甲醇-水-冰乙酸（50：50：1）；检测波长275nm，流速：1.0ml·min-1。结果：丹皮酚在0.01326mg·ml-1～ 0.05525mg·ml-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0.9995，回收率99.2%。结论：该法简便快捷，结果准确，可用于金匮肾气丸 （大蜜丸）中丹皮酚的含量测定和质量控制[1]。 关键词：金匮肾气丸；丹皮酚；高效液相色谱法；含量测定
பைடு நூலகம்
中图分类号：R284.1
文献标识码：B
文章编号：1006-0979（2012）20-0028-01
金匮肾气丸[2]是由牡丹皮、茯苓等加工而成的大蜜丸，收载于 《中国药典》2005 版，但药典没有设立“含量”测定本文采用 HPLC 法测定其中主药金匮肾气丸中牡丹皮的含量，方法简便易行，结 果准确，重复性好，可用于金匮肾气丸的含量测定。 1 仪器、试剂与样品
药物薄层色谱鉴别概述
马 江*
摘 要：薄层色谱法，是指将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所 得的色谱图作对比，用以进行药物的鉴别、杂质检查或含量测定的方法[1]。本文介绍了薄层层析法的原理，操作方法，展开剂配置，注意 事项，应用优点及其在药物鉴别、杂质分析、质量控制等方面的局限性。 关键词：薄层色谱；原理；操作方法；展开剂配置
仪器：日立 L-2000 高效液相色谱仪 SHB-3 循环水多用真空 泵、BIO-TEK535 紫外可见检测器、HL-01 溶剂过滤器、真空泵 HS3120、超声清洗器 SVC-300 高精度全自动稳压电源 Anastar Elite LC Control 色谱工作站、NST-890-0203 L-2200Auto-sampler 自动进样器 phenomenex C18 色谱柱。
试剂：甲醇；色谱纯；无水乙醇，冰醋酸；其它试剂均为分析 纯。
样品：金匮肾气丸 （包头中药有限责任公司生产批号为 1004113） 对照品 丹皮酚 （中国药品生物制品检定所提供 批号 708-9704）。 2 实验与结果
进样 5 次，测定峰面积，计算其 RSD=0.9％（n=5）结果表明该法精 密度良好。 2.5 阴性对照试验：按卫生部药品标准“金匮肾气丸”项下制备不 含牡丹皮的阴性试液，按供试品制备方法制备，测定，结果表明处 方中其他药材和辅料不干扰丹皮酚的测定。 2.6 重复性实验：精密称取同一批样品（批号为 1004113）5 份，按 供试品制备方法制备，测定，结果表明测定重复性较好，RSD= 2.8%，n=5。 2.7 稳定性实验：取批号为 1004113 的样品溶液，每隔 1h 进样一 次，共进样 6 次，结果表明，丹皮酚峰面积值在 6h 之内稳定， RSD= 1.28%。 2.8 加样回收率实验：精密称取供试品 3 份（每个批号各取 3 份）， 每份约 0.5g，分别加入加入 0.1mg·ml-1、0.2mg·ml-1、0.3mg·ml-1 的 丹皮酚，按样品测定项下方法制备成供试品溶液并测定其含量， 计算回收率，RSD=1.28%，n=9。 3 结果与讨论