微生物学检验重点

一、名词解释：

1、溶原性细菌：获得温和噬菌体核酸的细菌。

2、前噬菌体：温和噬菌体整合于细菌染色体（宿主基因组）中的核酸称为前噬菌体。

3、侵袭力：病原微生物能突破宿主的防御系统，在机体内定植、繁殖和扩散的能力。

4、正常菌群MIC（最低抑菌浓度）：在体外试验中，抗菌药物抑制培养基中某种细菌生长最低药物浓度，是药物抗菌活性指标，提示药物的抑菌能力（µg/ml）

5、MRSA：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

6、迁徙生长现象：变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长，形成以菌种接种部位为中心的，厚薄交替同心圆型的层层波状菌苔

7、菌丝：真菌在适宜的环境中，由孢子出芽形成芽管，逐渐延长呈丝状，称为菌丝。

8、二相性真菌：有些真菌在不同寄生环境和培养条件下可出现两种形态，称二相性真菌

9、病毒体：一个成熟有感染性的病毒颗粒称为病毒体

二、填空、判断、选择、问答部分

（一）革兰氏染色的三个原理，操作步骤与临床意义【选择题】

1、原理：

（1）渗透学说：革兰阳性菌细胞壁结构较紧密，肽聚糖层厚，含脂质少，脱色时乙醇不易渗入，反而使细胞壁脱水，通透性下降，胞内结晶紫与碘的复合物不易渗出。格兰阴性菌细胞壁结构较疏松，肽聚糖层薄，含脂质多，易被乙醇溶解，是细胞壁通透性增加，胞内结晶紫与碘的复合物易被乙醇溶解溢出而被脱色。【主要学说——细胞壁结构学说：G+菌和G-菌的细胞壁成分差异大，对脱色剂的反应不同】

（2）化学学说：革兰阳性菌含大量核糖核酸镁盐可与结晶紫、碘牢固结合，而不易被乙醇脱色。革兰阴性菌内所含核糖核酸镁盐少，故易被脱色。

（3）等电点学说：革兰阳性菌的等电点（pH2~3）比格兰阴性菌（pH4~5）低，在相同pH的条件下，革兰阳性菌比格兰阴性菌所带的负电荷多，与带正电荷的碱性染料结合较牢固，而不易脱色。

2、操作步骤：①细菌涂片、干燥，经火焰固定（菌膜>1cmX1cm）②结晶紫染色1min，水洗甩干③加碘液媒染1min，水洗甩干④加95%乙醇脱色30s，水洗甩干⑤用稀释复红或沙黄复染30s，水洗吸干后镜检

3、临床意义：①鉴别细菌②选择治疗用药③与细菌致病性有关

（二）细菌的基本结构及功能、细菌的特殊结构及功能、细菌的变异机理【选择题】

细菌蛋白质的合成场所：核糖体（同时也是药物作用的部分）

细菌内毒素的化学成分：脂多糖

1、细菌的基本结构

基本结构：由外向内依次为细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等。

（1）细胞壁

a.主要功能：①维持细菌固有形态②抵抗低渗作用③物质交换作用

2、化学组成和结构

a.肽聚糖：是细菌细胞壁的主要成分，也是原核细胞所特有的成分

革兰阳性菌的肽聚糖（多）：聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分构成的三维网架结构

革兰阴性菌的肽聚糖（少）：聚糖骨架、四肽侧链两部分构成的二维网架结构

b.磷壁酸：革兰阳性菌细胞壁特有。作用：调节、维护细菌细胞内离子平衡作用，是革兰阳性菌重要的表面抗原，与细菌致病性有关。

壁磷壁酸：由肽聚糖延伸；膜磷壁酸：由细胞膜延伸

c.外膜层：革兰阴性菌细胞壁特有。细胞壁肽聚糖外侧，由外向内依次为脂多糖、脂质双层、脂蛋白三部分①脂多糖：格兰阴性菌内毒素，脂质A为主要毒性成分

（2）细胞膜：一层柔软而富有弹性的半渗透性双层脂质生物膜结构，脂质双层中镶嵌有多种蛋白质。

中介体：细胞膜内陷折叠而成的囊状结构。

（3）细胞质

有质粒（是染色体外遗传物质）

包括：F质粒（至育性质粒）R质粒（耐药性质粒）Vi质粒（毒力质粒）

2、细菌的特殊结构（鞭毛、荚膜、芽孢和菌毛）

（1）鞭毛：附着在菌体上面胞壁外的细长呈波浪形弯曲的丝状物。

a.类型：周毛菌，单毛菌，双毛菌，丛毛菌。

b.作用和意义：①是细菌的运动器官②与细菌致病性有关③与细菌鉴定、分类及分型有关

（2）菌毛：是指菌体表面具有比鞭毛更细、短而直的丝状附属物。化学本质：蛋白质

a.普通菌毛：是细菌的黏附器官，与细菌致病性密切相关

b.性菌毛：F质粒控制，表面有性菌毛的称为雄性菌（F+），无性菌毛称为雌性菌（F-）

（3）荚膜：某些细菌在细胞壁外包绕的一层黏液性物质。化学本质：多糖类，少数为多肽

通常在机体内和营养丰富的培养基中易形成荚膜

a.作用：①抗吞噬②抗杀伤③抗干燥④与致病性有关⑤细菌鉴别和分型的依据⑥免疫原性

（4）芽孢：是某些细菌在一定条件下细胞质、核质浓缩脱水而形成的一个折光性很强，具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。

a.形成条件：缺乏营养物质，有害代谢产物的堆积

b.性质：休眠状态，非繁殖态。芽孢可脱离母体单独存活

c.特性：①保留原菌活性②细菌的休眠状态③可转变为繁殖体（不是繁殖方式）

d.作用和意义：①增强细菌抵抗力②判断灭菌效果的指标③鉴别细菌

（5）细菌的非典型形态与结构

细菌L型：即细菌细胞膜缺陷型，无细胞壁仍可存活

主要生物学特性：①多形性②大多数染成革兰阴性③普通培养不上涨（3%~5%高渗培养）④缓慢生长⑤荷包蛋样菌落（中间凸起，四周扁平）⑥可返祖

3、细菌变异的机制

（1）基因突变——点突变

突变：是指细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变，所致的变异现象可遗传给后代。

（2）基因转移及重组

a.基因转移：外源性遗传物质由供体菌转入受体菌细胞内的过程。

b.基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞，并在其中自行复制与表达，或与受体菌DNA整合在一起的过程。

c.基因转移及重组的方式：转化、接合、转导、溶原性转换、原生质融合等

①转化：受体菌直接摄取环境中供体菌游离的DNA片段，并将其整合至自身基因组中，从而获得供体菌的部分遗传性状。

②接合：通过性菌毛相互沟通，将遗传物质从供体菌直接转移给受体菌。

③转导：以噬菌体为载体。将供体菌的遗传物质转移到受体菌，经重组而使受体菌获得供体菌的某些遗传性状。