谷氨酸分子量及解离常数测定
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谷氨酸分子量及解离常数测定
一、实验目的和要求
1.掌握酸度计的基本结构及操作;
2.掌握玻璃电极的基本结构、保存和使用;
3.掌握标准缓冲溶液在测定溶液酸度上的应用;
4.掌握电位滴定曲线的绘制及滴定终点的确定方法;
5.掌握电位滴定在测定物质物质物理常数上的应用。
二、实验原理
本实验采用pH复合电极与被测溶液组成电池,利用酸度计测定溶液酸度值。谷氨酸是分子内含有两个羧基的二元酸,其分子式为C5H9O4N,分子量为147.3,其第二离解常数很小,采用一般滴定分析不容易观察到滴定突跃。在谷氨酸与NaOH溶液的滴定过程中,随着NaOH的不断加入,溶液中的H+浓度不断变化,由此引起溶液的酸度值(电池的电动势)也不断变化,达到滴定化学计量点附近时,将产生的H+浓度的突跃,从而可以根据溶液的酸度值变化确定滴定第一化
学计量点,以此为根据,可推算谷氨酸与NaOH溶液滴定的第二化学计量点(V
=2V终点1),并可根据反应摩尔比求出谷氨酸分子量。
终点2
三、实验仪器与试剂
1.pHS-3CW型酸度计
2.NaOH标准溶液(0.1000 mol/L)
3.谷氨酸标准溶液
4.pH复合电极一只
5.系列标准缓冲溶液(pH分别为
6.86和4.00)
6.磁力搅拌器一台
7.25ml移液管1只
8.100ml玻璃烧杯1个
四、实验步骤
1.滴定前准备
按照仪器要求,安装pHS-3CW型酸度计,接上pH复合电极,用中性缓冲溶液调节斜率至6.86,用蒸馏水冲洗干净pH复合电极后用酸性缓冲液将酸度计定位于4.00。然后再冲洗干净pH复合电极,对谷氨酸标准溶液进行测定。
2.滴定过程中pH测定
取1个洁净干燥100ml玻璃烧杯,用移液管准确移25.00ml谷氨酸标准溶液。将烧杯置于磁力搅拌器上,开动搅拌器,插入pH复合电极,按照下表滴加NaOH
五、实验数据处理
1.滴定曲线绘制
在坐标轴上以测定的pH值为纵坐标,滴加是NaOH标准溶液体积为横坐标制图,绘制滴定曲线。
2.采用作图法求出滴定终点
在绘制的滴定曲线上,通过滴定曲线是上、下两个拐点处画出两条为45°角的切线,在两切线之间作一垂线,再通过垂线的中点作一条与两切线平行的直线,该直线与滴定曲线的交点即为A点,A点在横坐标上对应的NaOH 标准溶液体积就是滴定终点。
3.谷氨酸的分子量计算
根据作图法得到的滴定终点体积值、NaOH标准溶液的浓度、谷氨酸的浓度和体积,采用下式计算谷氨酸分子量:
V终点= 12.20 ml W谷氨酸= 6.9536 mg/ml
谷氨酸分子量 =W谷氨酸(g/L)×25.00 ÷(C NaOH×V终点)= 142.49 4.结果比较
在于滴定操作、读数、谷氨酸溶液移取过程中。因此需多次的重复进行实验来减小误差。
六、讨论
1.pH复合电极在测定完成后,应及时清洗并置于3mol/L KCl溶液中保存。
2.调节酸度计的系列标准缓冲溶液可反复使用,不能随意倒掉。
3.在读数时要等数字稳定了才能进行记录
4.要正确的使用碱式滴定管,读数时必须要平视滴定管,否则会影响实验结果。
5.滴定开始之前,要用标准系列缓冲溶液调节仪器的斜率。