均匀设计法优化超声波提取蜂胶精油工艺条件的研究

Ｌ ａｎ Ｈ ａ ｇ ｉ ｅ ＂ ｕｒ ｌ ｇ ｉ ｊ ｇ ｕｎ ｚ ｎ Ｈ ｕ ａ ￣ Ｙ ｉ ， Ｍｅ ｈ ， ｉ ｎ （． ｈｊ ｎ ｃｎｍｉ ａｄＴａｅＰｌ ｅｈ ｉ Ｈ ｎ ｚｏ， ｈｊ ｎ １０ ８ Ｃ ｉ ； １ Ｚ ｅａｇＥ ｏｏ ｃ ｎ ｒ ｏｙ ｃ ｎｃ ａｇｈｕ Ｚ ｅ ａｇ３０ １， ｈｎ ｉ ｄ ｔ ， ｉ ａ ２ Ｃ ｌｇ ｆ ｎｍ ｌ ｃ ｎｅ Ｚ ｅ ａｇＵ ｉ ｒ ｔ Ｈ ｎｚｏ， ｈｊ ｎ １０ ９ Ｃ ｉａ ． ｏ ｅｅｏ ｉ ａ Ｓｉ ｃ， ｈｊ ｎ ｅｓｙ ａｇｈ ｕ Ｚ ｅｉ ｇ３０ ２ ， ｈ ） ｌ Ａ ｅ ｉ ｎ ｖ ｉ， ａ ｎ
第 ２期 （ 第 ２ ５期） 总 ３
２１ ０ ２月 １年
农 产 品加 工 ‘ 刊 学
Ａ ａ ｅ ｃＰ ｒ ｄｃ ｌ ｆ ａｍ Ｐ ｏ ｕ ｔ Ｐ ｏ ｅｓ ｇ ｃ ｄ ｍｉ ｅｉ ｉａ ｏ ｒ ｒ ｃｓ ｒｃｓｉ ｏ Ｆ ｄ ｎ
Ｎ ． ｏ２ Ｅｅ ． ｂ
文章 编 号 ：１７ — ６ ６ ２ １ ） ２ ０ ６ — ２ ６ １９ ４ ｆ ０ １ ０ —０ １ ０
Ａｂ ｌａ ｔ ｈｅ ｕ ｆｒ ｄ ｓｇ ｓ ｕ ｅ ｏ ｏ ｔｍｉｅ ｓ ｅ ｏ ｉ ｘｒ ｃｉｎ ｐ ｏ ｅ ｓ ｏ ｒ ｐ ｌｓ ｅ ｓ ｎ ｉｌｏｌ ｓｒ ｃ：Ｔ ｎｉ ｍ ｅ ｉｎ ｉ ｓ ｄ ｔ ｐ ｉ ｚ ｕｐ ｒ ｎ ｃ ｅ ｔａ ｔｏ ｒ ｃ ｓ ｆｐ ｏ ｏｉ ｓｅ ｔａ ｉ．Ｔｈ ｅｓ ｌｓ ｓ ｏ ｔ ａ ｏ ｓ ｅ ｒ ｕｔ ｈ ｗ ｈ ｔ
采用 均匀 设计 法 ，探讨 超声 辅助 萃取 蜂胶 挥发 油 的萃取 工艺 ，以石 油醚 为溶 剂 ，选用 对提 取率 有影 响 的 ３个 因 素 ，即提 取 温度 （Ｏ ６ ３ ～ ０℃） ，石 油 醚加 入 的体 积 （０ １０ｍＬ （ 蜂 胶 １ 加 入 １ 计 ３～ ５ ） 按 次 ０ｇ 算） ，提 取 时 间 Ｃ （０ ７ ｎ 。 每 个 因 素各 取 ７个 １～ ０ｍｉ） 水平 ，按 均匀设 计 表 Ｕ ７（ ） ７ 确定 试验 方 案 。 均匀设 计 水平 与 因素编码 见 表 １ 。
０ 引 言
蜂胶产品主要为蜂胶水提物或醇提物制备的胶囊 、片 剂 或 酊 剂 ，而 关 于 蜂胶 挥 发 性 成分 （ 油 ）研 究 较 精 少 。其 中 ，Ｅｅｉ ｌ ，王小平 ，Ｂ ｎ ｏａ等人 研究 发现 ｎ ａ ｋｖ 蜂 胶 挥发性 成 分 中含 有 丰 富萜类 化 合 物 （／ ０一蒎烯 、 ． Ｂ一芳樟 醇 、桉 叶 醇） 、苯 乙酮 、大 黄 酚等 ，具 有 抑 菌 活性 。对 蜂胶精 油 的研究 主 要集 中在 成 分分 析上 ； 对蜂 胶精油 的提取 主要集 中在水蒸 气蒸馏法 和超 临界 二 氧化碳萃 取法 ２种工艺手 段 。水 蒸气蒸馏 法蜂胶 精 油得 率很低 ，不利 于蜂胶精 油产 品的开发 ；超 临界 二 氧化碳 萃取设备 昂贵且提取 出大量 非挥发性 成分 ，尚 少见有关 于蜂胶 精油超 声萃取 及工 艺研究 的报道 。
２ 试验 方法
２１ 蜂胶精 油 的制备 ．
基 金项 目 ：浙 江 省供 销 社 科 学研 究 项 目 （９Ｓ ５ ；浙 江 省 自然 科 学 基 金 （３ ９ ３ ２ ：大 学 生创 新 项 目 （０９ １０ ） ０Ｓ０） Ｒ ００３） ２０ ０ ０ ３ 。
作者简 介：李雅晶 （９ ０ ） １８ 一 ，女 ，浙江人，讲师 ，博士研究生 ，研究方 向：天然产物有效成分。Ｅ ｍ ｉ ｊｙｙ ６ ． ｍ。 － ａｌ ｃｌ ：ｊ ＠１３ｃ ｏ
， ．
延长 提取 效果 反而 不会 提高 ，这是 由于 超声提 取法 是 利用 超声 波增 大物 质分 子运 动频率 和速 度 ，增 加溶 剂 的穿 透力 ，提 高药物 溶 出速度 和溶 出次数 ，从 而缩 短 提取 时 间。在 短时 间 内萃 取物 溶 出较 多 ，所 以提取 率 上升 较快 ，但 当溶解 度 达到饱 和 时 ，挥 发油分 子不再 被 溶解 ，提 取率 也就 不再 有 明显提 高 。且 随着超 声提 取 时 间 的延 长 ，挥 发性 成 分 向外 溢 出 的可 能性 增 加 。 同 时 ，从 回归 分 析 结 果 可 知 ，因 素 之 间存 在 交互 作 用 ，采用均 匀设 计法 可显 著减 少实 验次数 ，是 一种 很 好 的 寻优方 案 。
平 均值 。
２ １２ 提 取 工 艺设 计 ．．
得 到模 型方程 为 ：
Ｙ＝４ ９ ＋００６ ３ ． ０ ． ９ ． —０ ０ ０ ９
００ ．０２ ３ ３ ．
３ ０．０２ ２ Ｘ ｌ ２ ＋ ０ Ｘ —
模 型 的 复 相 关 系 数 Ｒ ０９ ８ ４ Ｆ值 ＝ ５ ．３ ＝ ．９ ， １３９ ，
油 提 取 工 艺 进 行 优 选 。 结 果 表 明 ，超 声 波 辅 助 蜂 胶 精 油 提 取 的最 佳 提 取 工 艺 条 件 为 ：提 取 温 度 ５ ９℃ ，料 液 比 为
ｌ： ５ １ ，提取时间 ６ ｉ，蜂胶精油得率达 ８８％。 ２ｍｎ ． ３ 关键词 ：蜂胶 ；精油 ；超声 波提取 ；均匀设计 中图 分 类号 ：Ｒ ８ ２４ 文 献 标 志码 ：Ａ ｄ ｉ １． ６ ／ｓｎ１７ — ６ ６Ｘ．０ １ ２ １ ｏ： ０３ ９ ｉ ． １ ９４ （） １． ． ７ ９ ｊｓ ６ ２ ００
Ｏｐｉ ｚ ｔ ｎ ｏ ｕ ｅｓ ｎｃ Ｅ ｔ ｃｉｎ Ｃ ｎ ｉ ｏ ｓｆｒＥ ｓ ｎｉｌＯｉ ｏ Ｐ ｏ ｏｉ ｔ ｍｉａｉ ｆＳ ｐ ｒ ｏ ｉ ｘｒ ｔ ｏ ｄｔ ｎ ｓ ｅ ｔ ｌ ｆ ｍ ｒｐ ｌ ｏ ａ ｏ ｉ ｏ ａ ｓｒ ｓ
ｂ ｉ ｒ Ｄｅ ｉｎ ｙ Ｕｎｆ ｍ ｓｇ ｏ
均 匀设计 法优 化 超声 波提 取蜂 胶精 油工 艺条 件 的研 究
李雅 晶 ，黄 美珍 胡福 良Fra Baidu bibliotek，
（． １ 浙江经 贸职业技术学院 ，浙江 杭州 ３ ０ １ ；２ 浙江大学 动物科学学院 ，浙江 杭州 ０８ ． １ ３０２） １０ ９ 摘要 ：优选了超声波提取蜂胶精油工艺参数。以蜂胶精油得率为评价指标 ，采用均匀设计试验对超声波提取蜂胶精
３２ 验证 试验 ． 根据 回归 分 析 ，再 用 非线 性 规 划方 法 进行 优 化 ，
２２ 蜂胶 精油 提取 率 的计 算 ．
提率童 取 ＝ 茎
３ 结果 与讨论
×０ ％ ０．
３１ 均 匀设 计试 验 ． 均匀 设计 用表 和试 验结 果见 表 ２ 。
其 最 优组 合 为 ：Ｘ。 ９ｏ ：１ ＝ Ｃ， ＝ ５ｍＬ （ 蜂胶 １ｇ的 ５ 按 比 例 ）， Ｘ＝ ２ ｍｎ 优 化 条 件 下 最 高 提 取 率 为 ６ ｉ， ９５ ％ ，比 ７组试 验 数据 都 高 ，说 明此优 化结 果 对试 ． ４ 验 指导 有一 定 的价值 。根据 均 匀设计所 确定 的最 佳工 艺 条件 ，取 粉碎 过筛 的蜂胶 样 品平行 实验 ３次 ，进行 蜂 胶精 油 的超声 萃取 ，平均 提取 率为 ８８ ％ ，相 对误 ． ３
ｔ ｅ ｏ ｔ ｌ ｘｒｃ ｉｇ ｐ ｏ ｅ ｕ ｅ ｉ ｓ ｆｌ ｗ ： ｘｒ ｃｉｎ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ９ ℃ ，ｆｅ ａｉ ：１ ，ｅ ｔ ｃ ｏ ｉ ２ ｒ ｉ，ｔ ｅ ｈ ｐｉ ｍａ ｅ ｔａ ｔ ｒ ｃ ｄ ｒ ｓ ａ ｏｌ ｓ ｅ ｔ ｔ ｅ ｅａｕ ｅ ５ ｎ ｏ ａ ｏ ｅ ｄ ｒｔ １ ｏ ５ ｘｒ ｔ ｎ ｔ ａｉ ｍｅ ６ ｎ ｈ ａ ｅ ｓ ｎ ｉｌ ｉ ｙｅｄ ｒ ａ ｈ ｓｔ ．３ ． ｓ ｅ ｔ ｌ ｉｌ ｅ ｃ ｅ ８ ８ ％ ａｏ ｏ Ｋｅ ｒＩ ８ Ｐ ｏ ｏｉ； ｓ ｅ ｔ ｌｏｌ ｓ ｐ ｒｏ ｉ ｘｒ ｃｉｎ ｕ ｉ ｒ ｄ ｓｇ ｙ ０ｄ ： ｒ ｐ ｌ Ｅ ｓ ｎｉ ｉ ｕ ｅ ｓ ｎ ｃｅ ｔ ｔ ； ｎ ｆ ｍ ｅ ｉ ｓ ａ ； ａ ｏ ｏ ｎ
鉴于超声萃取技术在挥发油提取中具有短时、高 效等优 势 ，因此 ，本 文利 用超声 提取技 术对蜂胶 精 油 蜂 胶是 蜜蜂 ｐｓｍ ｌ ｅａ ｉ ｅ ｉ ｒ）采 集植 物 树脂 ，并 成分进 行 了提 取 ，优 化 了超 声提取 制备蜂 胶精 油 的工 ｌ ｆ 混入其 唾液腺分 泌物及 蜂蜡 、花粉等 ，经 咀嚼加工 而 艺参数 ，对蜂 胶精油 的进一 步开发 提供参 考 。 成 的一种黏稠 物质 ，有令人 愉悦 的芳 香味 。蜂胶 的化 １ 试 验 材 料 学成分 复杂 ，生物活性 广泛 ，具有护 肝 、抗 肿瘤 、抑 菌 、抗 炎 、抗 氧化等 多种药理 学活性 ，在 民间医药 中 １１ 材料 ． 蜂胶 ，取 自山东省。将蜂胶在 一８℃冷冻数 日， ｌ 被广 泛 使 用 ，因 而 有 “ 色 黄 金 ” 之称 『］ 目前 ， 紫 ｌ。 ＿ ５
表 １ 均 匀设 计 水 平 与 因素 编 码
Ｐ ００ ６５＜ ．５， 剩 余 标 准 差 Ｓ ０ ７ ，决 定 系 数 ＝ ． （００） ０ ＝． ５ ０ 尺 ＝ ． ６７ ，调整 后相 关 系数 Ｒ＝ ． ５ １ ０９ ６ ９ ａ０９ ，可 知模 型 ９ 与数 据 吻合 ，说 明此方 程能很 好 地拟合 超声 辅助 萃取 蜂胶 挥发 油 的过程 。 从 表 ３各 变 量 Ｐ值 的显 著 性 检 验 可 知 ，对 提 取 率 的 影 响 的大 小 为 ： ３ ＞ ３ ｌ２ ＞ ３ Ｘ ＞ Ｘ 。其 中 ， ３ ， 与 ｙ呈正 相 关 ， 。 与 ，呈 负 相 关 说 明 ， ， 影 响提取 率 的 ３因素并 非越大 提取 效果 越好 。如 时间
为 通 讯 作 者 ：胡 福 良 ，教授 ，博 导 ，研 究 方 向 ：天 然产 物 有 效 成 分 。
２１ 年第 ２ ０ １ 期
李雅 晶，等 ：均匀设计法优 化超声波提取蜂胶精油工艺条件的研究
・１ ６・
２１１ 蜂胶 精 油的提取 ．． 项式 逐步 回归 分析 ，并对 该模 型进 行显著 性检 验 。 蜂 胶 在 一 ０℃冷 冻 数 Ｅ ，粉 碎 ，过 ２ 目筛 备 ２ ｔ ０ 二 次 多项式 逐步 回归 法处理 的数 据结 果见 表 ３ 。 用 。 准 确 称 取 ２ ０ ｇ蜂 胶 粉 末 ，置 于 ２ ０ｍＬ三 角 瓶 ５ 表 ３ 二 次 多项 式 逐 步 回 归法 处 理 的 数 据 结 果 中，在设定 的条 件下 ，以石油 醚为溶 剂进 行 提取 ，过 滤 ，然 后 用 石 油 醚 洗 涤 残 渣 ，合 并 滤 液 减 压 浓 缩 至 １０ｍＬ左 右 ，置 于 一 ８℃ 冰柜 中 反 复 冷 冻 、过 滤 ， ０ ｌ 去除 析 出 的蜡质 。将脱 蜡 处理 的滤液 于 ４ ０℃旋 转 蒸 发脱溶 ，得 到蜂 胶精 油粗 提物 。将蜂 胶精 油粗 提物 与 无 水 乙醇 按 质 量 比 １： ５充 分 混 匀 ，于 一 ０ ｃ 复 １ ２ ｃ反 冷析过 滤 ，达到无 蜡质 析 出为止 。采 用旋 转蒸 发仪 去 除滤液 中的溶 剂得 到蜂 胶精 油 。 同一 条件 重复 ３ 取 次
收稿 日期 ：２ １ — １ １ ００ １ — ８
取 出后快 速粉碎 ，过 ２ ０目筛 。 １ 主要 试剂 ． ２ 石油 醚 、无 水 乙醇 、正 己烷等 ，均为分 析纯 。 １ 主要 仪器 与设备 ． ３ Ｒ 一５ Ａ Ｅ ２ Ａ型旋转蒸发仪 ，上海亚荣生化仪器厂 产品 ；ｓ Ｂ Ｉ型循环水式多用真空泵 ，郑州长城 Ｈ —Ｉ Ｉ 科工 贸有限公 司提供 ；Ｋ －３０ Ｅ型数控超声提取 Ｑ ０Ｄ 器 ，昆 山市 超声仪 器有 限公司 提供 。