莱菔硫烷诱导人肝癌HepG-2细胞G2／M期阻滞作用及机制研究

明 ，ｌｌ ｌＬ ０ｘ ｌＬ ０ｘ ｌＬ的 Ｓ Ｎ作 用 Ｈ ｐ Ｏ￣ ／ 、２ １ ／ 、４ ｔ ／ ｍｏ ｍｏ ｍｏ Ｆ ｅＧ一２细 胞 ４ ８ｈ后 ，均 可显 著 下 调 Ｃ Ｋ１ Ｄ 和 ｃｃｉＢ ｙｌ １的蛋 白表达 水平 ，同时显 著 上调 Ｐ—Ｃ ｋ （ ｈｌ 的表 达 ，与对 照 组 比较 差异 具 有 ｎ ｄ ｌ Ｔ ｒ４）
胞 的抑 制作 用 与其抑 制 Ｎ Ａ Ｔ活性 有一 定关 系 。
莱菔硫烷诱 导人肝癌 Ｈ ｐ ２细胞 Ｇ ／ ｅ Ｇ一 Ｍ期 阻滞作 用及 机制研究
季宇 彬 ‘ 薄文 伟 邹翔
哈尔滨 商业 大学 生命 科学 与 环境科 学 研究 中心
国家 教 育部抗 肿瘤 天然 药物 工程 研究 中心
发 展 的分 子靶 点 ，有 效地 预 防 肝 癌 、肺 癌 、前 列 腺 癌 等 多 种 癌症 ，是 一 种 潜 在 的肿 瘤 预 防和 治 疗 药 物 ，因此 近年来 受 到广泛 关 注 。近 年 来 相继 发 现 Ｓ Ｎ 可通 过 影 响 细胞 周期 及 诱 导肿 瘤 细 胞 Ｆ
的凋亡 发挥 抗肿 瘤作 用 。 因此 ，本论 文拟研 究 Ｓ Ｎ体 外诱 导 人 肝 癌 Ｈ ｐ ２细胞 Ｇ ／ 期 的阻 Ｆ ｅ Ｇ一 Ｍ
统计学意义 （ ００ 或 Ｐ＜ ．５ 。结论 ：Ｓ Ｎ对人肝癌 Ｈ ｐ ２细胞具有 Ｇ ／ Ｐ＜ ． １ ００ ） Ｆ ｅＧ一 Ｍ期阻滞作用；
Ｓ Ｎ可通 过下 调 Ｈ ｐ ２细胞 内 Ｃ ｋ Ｆ ｅ Ｇ一 ｄ ｌ和 Ｃ ｃ ｎ １蛋 白的 表达 、上 调 Ｐ—Ｃ ｋ （ ｈｌ ） 的蛋 白 ｙｌ Ｂ ｉ ｄ ｌ Ｔ ｒ４
期细胞 比例逐 渐升 高 ，同 时 Ｇ 期 比例 降低 ，且 呈一 定 的剂量 依赖 性 ；当 Ｓ Ｎ浓 度达 到 ４ ｍｏ Ｆ ０ｔ ｌ ｘ ／
Ｌ时 ，Ｇ ／ ： Ｍ期 细胞 比例 达 到 ３ ． ５ ，且 出现 凋 亡 峰 ，凋 亡 率 为 ７ ５ ％ 。Ｗｅｔ ｎ Ｂｏ 结 果 表 １９ ％ ．２ ｓ ｒ ｌ ｅ ｔ
哈尔滨
哈尔 滨
１０７ ５０ ６
１０ ７ ５ ０６
。 哈尔 滨商 业大 学药 物所 博 士后科 研 工作 站
哈尔 滨
１０７ ０６ ５
目的 ：莱 菔硫烷 （ｕｆｒｐ ａ ｅ Ｆ ｓｌ ａ ｈ ｎ ，Ｓ Ｎ） 是一 种异 硫氰 酸盐 类 物质 ，广 泛存 在 于十 字花 科植 物 ｏ 中 ，在西 兰花 芽及 西 兰 花 根 茎 中的 含 量 最 高 。研 究 表 明 ，Ｓ Ｎ 可 通 过 调 节 多 个 参 与 癌 症 发 生 、 Ｆ
表达 水 平 ，进 而 抑 制 Ｃ ｋ —ｙｌ Ｂ ｄ ｌＣ ｃｉ １复 合 物 的形 成 和 活 化 使 人 肝 癌 Ｈ ｐ 一２细 胞 阻 滞 在 Ｇ／ ｎ ｅＧ
Ｍ 期
滞 作用 ，并 探讨 其分 子作 用机 制 。方法 ：采 用 Ｓ Ｂ法 测 定 Ｓ Ｎ对 Ｈ ｐ ２细胞 增 殖 的影 响 ，采 Ｒ Ｆ ｅＧ一
用 流式 细胞 仪检测 Ｓ Ｎ对 人肝 癌 Ｈ ｐ Ｆ ｅ Ｇ一２细胞 的周 期 及 凋亡 的影 响 ，采用 Ｗｅｔ ｎ Ｂｏ 法 检 测 ｓ ｒ ｌ ｅ ｔ Ｓ Ｎ对 人 肝癌 Ｈ ｐ ２细胞 Ｇ ／ Ｆ ｅ Ｇ一 ： Ｍ期 相 关蛋 白 Ｃ Ｋ 、ｐＣ ｋ （ ｈｌ ） 和 ｃｃｉＢ Ｄ １ － ｄ ｌ Ｔ ｒ４ ｙｌ １表达 的影 响 。 ｎ 结果 ：Ｓ Ｎ作用 Ｈ ｐ ２细胞 ４ ｈ后 ，能 显著 抑制 Ｈ ｐ ２细 胞 的增 殖 ，并 且 呈 一定 的剂 量依 Ｆ ｅ Ｇ一 ８ ｅ Ｇ～ 赖性 ，Ｇ ５ Ｉ０为 ｌ ． ０￣ ｏ Ｌ Ｆ ９ ４ ４ ８ｈ后 ，随 着 Ｓ Ｎ浓 度 的增 大 ，Ｇ ／ Ｆ Ｍ
量 ，并 且 随 着 龙 葵 碱 浓 度 的 增 大 ，Ａ —Ａ Ａ 的 生 成 量 逐 渐 降 低 ，阴 性 对 照 组 为 １ １ ｃＰ Ｂ ． １× １ 一 ｎ ｏ ，龙葵 碱 组 分 别 为 １０ ０ ｍｌ ．７×１ ０～ ｎ ｌ ．４×１ ｎ ｌ ． ９×１ ｍｏ，１０ ０～ ｍｏ，０ ９ ０～ ｎ ｏ，０ ８ ｍ ｌ ． ６× １ ～ ｎ ｏ ，０ ７ ０ ｍ ｌ ． ６×１ ｎ ｏ ，空 白组不 加 Ａ Ｃ Ａ无 Ａ —Ｐ Ｂ ０～ ｍ ！ ｃｏ ｃ Ａ Ａ生成 。结论 ：龙 葵碱 对 Ｈ ｐ ２完 ｅＧ 整 细胞 和细 胞质 内 Ｎ Ｔ 酶 都有一 定 的影 响 ，龙 葵 碱是 一种 Ｎ Ｔ Ａ １ Ａ １的抑 制剂 ，龙 葵碱 对 Ｈｅ Ｇ ｐ ２细
中国药理通 讯 ２ １ ００年第 二十七卷第二期
１２ ６ ｔ ｌ ． ７ ２ｎ ｌ ． ０ ４ｎ ｏ，１ ５ ５ ｍｏ。龙葵 碱作 用 Ｈ ｐ ２细 胞质 中 Ｎ Ｔ活 性 的影 响 中 ，不 同浓度 的龙 葵 ｏ ｅ Ｇ一 Ａ
碱 作用 于 Ｈ ｐ ２细胞 细胞 质 ，与 阴性 对 照 组 比较 ，龙 葵 碱 组 能够 显 著 降低 Ａ —Ａ Ａ 的生 成 ｅＧ一 ｃＰ Ｂ