蔬菜鸡蛋中铁含量的测定

山东轻工业学院化学综合设计实验论文

院系名称：食品与生物工程学院

专业班级：生物工程 09级1班

学生姓名：XXX

学号： XXX

同组人学号: XXX

指导教师：XXXX

时间： 2011年6月18日

目录：

一．摘要 (3)

二．关键词 (3)

三．目的 (3)

四．原理 (3)

五．主要仪器及试剂 (4)

六．实验内容 (4)

1：样品处理 (5)

2：条件实验 (5)

（1）最佳波长的测定 (5)

（2）邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性 (6)

（3）显色剂浓度试验 (7)

（4）还原剂的用量 (8)

（5）溶液酸度对配合物吸光度的影响 (9)

（6）缓冲溶液的用量 (10)

3：样品测定 (11)

4：回收实验及结果 (13)

七．参考文献 (14)

八．讨论心得 (15)

蔬菜、蛋黄中铁含量测定

一.摘要：

随着社会的发展，人们的生活水平有了很大的提高，营养成了一个普遍的话题。人体每天需要摄入多种营养物质，其中蔬菜是非常重要的一种。本实验采用邻二氮菲分光光度法直接对荠菜、菠菜、油菜、辣椒等几种蔬菜及蛋黄中铁的含量进行测定。实验表明辣椒、蛋黄含铁量高。试验中要分析测定邻二氮杂菲，盐酸羟胺等试剂以及PH对实验的影响，从而在实际生活生产中为指导人们合理食用蔬菜补铁及开发蔬菜等产品提供理论依据。

二．关键词：

分光光度法；邻二氮杂菲；盐酸羟胺；铁；蔬菜；蛋黄；标准曲线法。三．实验目的:

1.学习样品的预处理方法

2.用所学知识，用仪器分析法测定物质含量

3.学会对实验最佳条件选取的讨论

4.练习灵活运用各种基本操作的能力和查阅资料的能力

四．原理：

食品中的金属元素，由于常与蛋白质、维生素等有机物结合成难溶或难以解离的物质，因此在测定前需要破坏有机结合体，释放出被测组分。通常采用有机物破坏法，在高温条件下加入氧化剂，是有机物分解。其中碳、氧、氢等元素生成二氧化碳和水呈气体状态逸出，而被测的金属元素则会以氧化物或无机盐的形式残留下来。本实验采用干法灰化法来对样品去处理。

分光光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是显色反应的条件和测定吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂的用量，介质的酸度、显色时温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包括入射光波长的选择、吸光度范围和参比溶液等。

二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好的试剂。在pH=2～9的条件下Fe2+ 离子与邻二氮杂菲生成稳定的橘红色络合物。利用分光光度计测定其吸光度，再在对比曲线上找出相应的数量，从而达到测定的目的。

辣椒,蛋制品中含铁量丰富，在日常生活中，要注意多食用含铁量丰富的食品。牛奶中含铁量比较少，被称为贫铁食品。

本实验通过测定辣椒和蛋黄中铁的含量，从而指导人们合理的食用含铁丰富的食物。在此，感谢孙玉萍老师对实验的指导。

五.主要仪器及试剂：

722型分光光度计，容量瓶(50ml,100ml,500ml)，吸量管，马弗炉，电子天平，电磁炉，坩埚，移液管,烧杯,比色皿等。

新鲜的辣椒，蛋黄，400ug/mL的铁标准溶液,20ug/mL的铁标准溶液（由400ug/mL的铁标准溶液准确稀释20倍而成）,盐酸羟胺固体及其10%的溶液（因其不稳定，需临用时配置），0.2%的邻二氮杂菲溶液（新配置），1mol/L的NaAc溶液, 2mol/L和1:1的HCL，0.4mol/L的NaOH。

六．实验步骤：

1.样品处理

本实验采用干法灰化法，将新鲜的辣椒洗净晾干，用电子天平称取90g的辣椒，将煮熟的新鲜鸡蛋剥皮除去蛋清，在电子天平上称量蛋黄的质量14g。将辣椒和蛋黄分别放入坩埚中在电磁炉上加热，直到样品不冒黑烟为止。再将处理好的样品分别放入马弗炉中灰化，经一天一夜，灰化结束，取出样品。

向坩埚中加入2mol/L盐酸，溶解（溶解不完全，可加入少许硝酸），过滤，置于50mL容量瓶中，调节PH，定容至刻度。

2.条件实验

（1）最佳波长的测定

准确移取20μg/ml的铁标准溶液5ml于50ml容量瓶中，加入10%盐酸羟胺溶液2.0ml,摇匀,稍冷，加入1mol/ml的NaAc溶液5ml和0.2%的邻二氮杂菲溶液3ml，以水稀释至刻度，在722型分光光度计上，用1cm 比色皿，以蒸馏水为参比液，用不同的波长从570nm开始到450nm为止，

每隔20nm测定一次吸光度，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。

波长与吸光度的关系

由图可见，当波长为510nm时吸光度最大，所以最佳波长为510nm。（2）邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性

配制上述溶液，在510nm波长处测吸光度，分别测定其在加入显色剂的第1min、2min、3min、5min、8min、10min、15min、30min、60min、90min的吸光度。然后以时间（t）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制A-t 曲线。此曲线表示了该配合物的稳定性。

时间与吸光度的关系

由图可见其吸光度2min之后趋于稳定。

（3）显色剂浓度试验

取50容量瓶7个，编号。准确移取5 ml 20μg/ml的铁标准溶液5ml 于容量瓶中，加入2.0ml 10%的盐酸羟胺溶液，经 2 min后，再加入5ml1mol/l的NaAc溶液，然后分别加入0.2%的邻二氮杂菲溶液0.3ml、0.6ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、3.0ml和4.0ml，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上。在510nm波长下用1cm比色皿，水为参比液，测定上述各溶液的吸光度。然后以加入的邻二氮杂菲试剂的体积为横坐标，吸光度为纵坐标绘制曲线，从中找出显色剂最适宜加入的量。