多糖提取实验综述

综述

摘要：

一、什么是多糖

n表示。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。

二、多糖的结构

多糖（polysaccharide）是由多个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。

多糖

多糖在自然界分布极广，亦很重要。有的是构成动植物骨架结构的组成成分，如纤维素；有的是作为动植物储藏的养分，如糖原和淀粉；有的具有特殊的生物活性，像人体中的肝素有抗凝血作用，肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。多糖的结构单位是单糖，多糖相对

分子质量从几万到几千万。结构单位之间以苷键相连接，常见的苷键有α-1，4-、β-1，4-和α-1，6-苷键。结构单位可以连成直链，也可以形成支链，直链一般以α-1，4-苷键（如淀粉）和β-1，4-苷键9如纤维素）连成；支链中链与链的连接点常是α-1，6-苷键。

由一种类型的单糖组成的有葡萄糖、甘露聚糖、半乳聚糖等，由二种以上的单糖组成的杂多糖（hetero polysaccharide）有氨基糖的葡糖胺葡聚糖等，在化学结构上实属多种多样。就分子量而论，有从0.5万个分子组成的到超过106个的多糖。比10个少的短链的称为寡糖。不过，就糖链而论即使是寡糖，在寡糖上结合了蛋白质和脂类的，就整个分子而论，如果是属于高分子，则从广义上来看也属于多糖，因此特称为复合多糖（conjugated polysaccharide，complex poly －saccharide）或复合糖质（glycoconjugate）（糖蛋白、糖脂类、蛋白多糖）。[1]

三、多糖的功能

通常具有贮藏生物能和支持结构的作用。不均一多糖通过共价键与蛋白质构成蛋白聚糖发挥生物学功能，如作为机体润滑剂、识别外来组织的细胞、血型物质的基本成分等。

多糖类化合物广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中，是由醛基和酮基通过苷键连接的高分子聚合物，也是构成生命的四大基本物质之一。

细胞膜和细胞壁的多糖成份不仅是支持物质，而且还直接参与细胞的分裂过程，在许多情况下成为细胞和细胞，细胞和病毒，细胞和抗体等相互识别结构的活性部位。生物合成通常是由结合在细胞膜质（高尔基体、原生质膜、粗面内质网等）上的转糖基酶进行，利用各种糖苷作为前体。在细菌细胞壁和聚多糖的生物合成中，多萜醇衍生物（特别是称为细菌萜醇的）作为中间体参与反应。

另一方面，在分解过程中，有对糖链的糖排列次序和键的性质有特异性的多种糖苷酶参与。动物细胞中则多以溶酶体系统的酶存在。此外，常能看到因缺损这些酶中的某种所导致的遗传病。这是显示多糖代谢重要性的典型例子。[1]

20世纪50年代发现真菌多糖具有抗癌作用，后来又发现地衣、花粉及许多植物均含有多糖类化合物，并进行分离提纯，确定了其化学结构、物理化学性质、药理作用，尤其对多糖类化合物的抗肿瘤和免疫增强作用进行深入研究。

四、多糖的性质

五、多糖的提取方法（柚子皮）

1、试验目的

通过本试验，掌握多糖的性质，测定方法的基本原理，熟悉S54紫外可见分光光度计，KQ5200超声波清洗器的使用方法。

2、试验原理

植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg 范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，

3、设备

3.1试剂：葡萄糖，苯酚，碳酸氢钠，浓硫酸，乙醇等。3.2仪器：粉碎机、S54紫外可见分光光度计，电子分析天平，KQ5200超声波清洗器。

3.3提取：称曲=取粉碎饮片20.0027g,加入300ml蒸馏水浸泡4h,加热回流提取2次（300|次），1.5h|次。合并水提液，过滤减压浓缩至100ml，静置，离心，上清液减压浓缩至100ml，再向其中加入3倍量95%的乙醇，于4度冰箱中静置18h,离心弃上清液，收集白色沉淀物，冷冻干燥，得粗多糖。

4多糖含量的测定

4.1 5%苯酚试剂的配制

取苯酚100.0422g,加铝片0.1057g和NaHCO3 0.0499g,常压蒸馏，收集182度馏分，称取7.5g,加水150ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。

4.2葡萄糖标准液储备液的配制

精确称取150度干燥恒重的葡萄糖50.00mg，加适量水溶解，转移至50ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀配成浓度为1mg|ml葡萄糖标准储备液备用。

4.3标准曲线的制备

葡萄糖标准储备液1mg|ml，移取0,0.5,1.0,2.0，3.0,4.0,5.0,6.0ml分别定容于50ml容量瓶中，制备成标准使用溶液，分别取1ml标准使用溶液置试管中，加入1ml5%苯酚溶液，迅速加入5ml浓硫酸，振荡放置15min,置于沸水浴中加热30min，冷水冷却至室温。用紫外分光光度计测定吸光度A，以吸取光度对浓度做图校准曲线，计算回归方程。

4.4最大吸收波长的选择

精密移取1ml|ml,葡萄糖标准液3ml,加入1ml5%苯酚溶液，迅速加入5ml浓硫酸，振荡，放置15min,置于沸水浴中加热30min,冷却至室温，采用蒸馏水同法做空白参比溶液，分别在480,485,495,500nm处测定吸收光度，绘制曲线，找出最大吸收波长。

4.5换算因子的测定

取粗多糖样品10mg置100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释摇匀，精密吸取1ml于50ml的容量瓶中，加入1ml5%苯酚溶液，迅速加入5ml浓硫酸，振荡摇匀放置15min，置于沸水浴中加热30min，冷却至室温，采用水同法做空白参比溶液。于490nm处比色测定吸光度A,利用公式f=w|c*d计算换算因子（w为多糖含量mg,c为多糖稀释