远志对糖尿病周围神经病变大鼠尾部感觉神经传导速度和坐骨神经醛糖还原酶活性的影响

远志对糖尿病周围神经病变大鼠尾部感觉神经传导速度和坐骨神经醛糖还原酶活性的影响
赵晓丽
马洪伟
1
陈志宏
1
（承德医学院附属医院神经内科，河北承德067000）
〔摘
要〕目的
观察远志对糖尿病周围神经病变（DPN ）大鼠尾部感觉神经传导速度（SNCV ）和坐骨神经醛糖还原酶（AR ）活性的作用。

方
法36只雄性Wistar 大鼠随机分为3组（n =12）：正常对照组、
DPN 模型组和远志治疗组，DPN 模型组和远志治疗组大鼠均采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DPN 模型，以尾部SNCV ＜30m /s 作为DPN 成模标准；待DPN 模型成功建立后，DPN 模型组大鼠不再做任何处理，远志治疗组大鼠给予远志（2.7g 生药/kg /d ）灌胃6w 。

分别检测各组大鼠血糖、尾部SNCV 和坐骨神经AR 活性。

结果与正常对照组大鼠比较，
DPN 模型大鼠的血糖、坐骨神经AR 活性明显升高，尾部SNCV 明显降低（P ＜0.01）；与DPN 模型组大鼠比较，远志治疗组大鼠的血糖、坐骨神经AR 活性明显降低，尾
部SNCV 明显升高（P ＜0.01）。

结论远志可明显降低DPN 大鼠坐骨神经AR 活性、逆转DPN 大鼠尾部SNCV 减慢，对DPN 时周围神经损伤具有明
显的改善作用。

〔关键词〕远志；糖尿病周围神经病变；坐骨神经；感觉神经传导速度；醛糖还原酶〔中图分类号〕R587.2
〔文献标识码〕A
〔文章编号〕1005-9202（2012）21-4683-03；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.21.035
Effects of Polygala on Caudal sense nerve conduction velocity and aldose reductase activity of sciatic nerve of DPN rats
ZHAO Xiao-Li ，MA Hong-Wei ，CHEN Zhi-Hong.
Department of Neurology ，the Affiliated Hospital of Chengde Medical College ，Chengde 067000，Hebei ，China
【Abstract 】Objective To observe the effects of Polygala on caudal sense nerve conduction velocity （SNCV ）and aldose reductase （AR ）activity of sciatic nerve of diabetic peripheral neuropathy （DPN ）rats.Methods 36male Wistar rats were randomly divided into 3groups with 12rats in each group ：normal ，DPN model and Polygala treatment groups.The rats in DPN model and Polygala treatment groups were established DPN animal model by intraperitoneal injection of streptozotocin ，and SNCV ＜30m /s was taken as standard.After the DPN rats model were successfully established ，the rats in DPN model group were not given more handling ，the rats in Polygala treatment group were lavaged with Polygala （2.7g ·kg －1·d －1）for 6weeks.The blood glucose ，caudal SNCV and AR activity of sciatic nerve of rats in each group were respectively detected.Results Compared with rats in normal control group ，the blood glucose and AR activity of sciatic nerve of rats in DPN model group were increased obviously ，caudal SNCV decreased obviously （P ＜0.01）.Compared with rats in DPN mod-el group ，the blood glucose and AR activity of sciatic nerve of rats in Polygala treatment group were decreased obviously ，caudal SNCV in-creased obviously （P ＜0.01）.Conclusions Polygala can obviously decrease the AR activity of sciatic nerve of DPN rats and prevent de-scending of caudal SNCV of DPN rats.So Polygala could improve peripheral nerve injury apparently during DPN.
【Key words 】Polygala ；Peripheral nerve injury ；Sciatic nerve ；Sense nerve conduction velocity ；Aldose reductase
基金项目：河北省教育厅项目（2008407；2009404）1
承德医学院人体解剖学教研室
通讯作者：陈志宏（1971-），女，博士，教授，硕士生导师，主要从事解剖
学研究。

第一作者：赵晓丽（1964-），女，副主任护师，主要从事神经电生理学
研究。

糖尿病周围神经病变（DPN ）是糖尿病最常见的慢性并发症之一，发病率高达47% 91%
〔1〕。

DPN 可累及感觉神经、运
动神经和自主神经，但以感觉神经最为常见〔2〕。

虽然治疗DPN
的药物种类繁多，但目前尚无确切有效的治疗药物，通常在控制饮食、应用降糖药的基础上对症治疗。

部分患者严格控制血糖并不能使神经功能完全改善，且短期内控制血糖与改善DPN 临床症状并不平行；同时，降糖药物在降低血糖的同时会产生较多的毒副作用
〔3，4〕。

为此，本研究观察了中药远志对DPN 大
鼠尾部感觉神经传导速度（SNCV ）和坐骨神经醛糖还原酶（AR ）活性的影响，为临床探寻有效、且毒副作用小的治疗DPN 的药物提供实验基础。

1材料与方法1.1
试剂与药品
远志水煎液，中药远志（Polygala ）浸泡、水
煎、浓缩获得，生药1g /ml 。

链脲佐菌素（STZ ），美国Sigma 公司；血糖检测试剂盒，保定长城临床试剂有限公司（批号：20090511）；BCA 蛋白定量试剂盒，北京索莱宝生物科技有限公司。

1.2
实验动物分组
成年雄性Wistar 大鼠36只，体重180
220g ，购自河北医科大学实验动物中心（合格证号：905075）。

大鼠随机分为3组（n =12）：正常对照组、
DPN 模型组和远志治疗组。

正常对照组大鼠常规饲养，不做任何处理。

DPN 模型组和远志治疗组大鼠连续腹腔注射2%STZ （25mg /kg ，3d ），1w 后以血糖≥16.7mmol /L 作为糖尿病成模标准。

成功建立糖尿病模型后，DPN 模型组和远志治疗组大鼠继续饲养6w ，以大鼠尾部SNCV ＜30m /s 作为DPN 成模标准；成功建立DPN 大鼠模型后，DPN 模型组大鼠不再做任何处理，远志治疗组大鼠给
予远志（2.7g 生药·kg －1·d －1
）灌胃6w 。

1.3检测血糖各组大鼠用药结束后禁食12h 以上，
4%水合氯醛腹腔注射麻醉，经内眦于眶后静脉丛采血，离心后收集
血清，采用葡萄糖氧化酶法检测血糖。

1.4检测大鼠尾部SNCV大鼠俯卧位固定，分别用温水、75%乙醇清洁大鼠尾部皮肤，电极放置方式为一对刺激电极（负极位于正极近心侧）插入大鼠尾部皮下，然后依次插入记录电极Ⅰ和记录电极Ⅱ，记录电极Ⅰ在刺激电极负极近心侧3cm 处，记录电极Ⅱ在记录电极Ⅰ近心侧4cm处，再将参考电极Ⅰ、Ⅱ分别插入距记录电极Ⅰ、Ⅱ近心侧0.5cm处皮下，最后将接地电极插入刺激电极负极与记录电极Ⅰ之间。

采用RM6240C型多道生理信号处理系统测定各组大鼠尾部SNCV，重复刺激3次，间隔30s，取平均值。

尾部SNCV（m/s）=两记录电极之间的距离/动作电位潜伏期时间差。

1.5测定坐骨神经AR活性大鼠断头处死，迅速分离双侧坐骨神经（膝关节上方坐骨神经干，约4cm），入液氮保存。

参照文献的方法检测坐骨神经AR活性。

1.6统计分析数据以xʃs表示，应用SPSS11.5软件，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。

2结果
2.1各组大鼠血糖水平各组大鼠血糖DPN模型组大鼠的血糖明显高于正常对照组（P＜0.01）；远志治疗组大鼠的血糖明显低于模型组（P＜0.01）。

见表1。

2.2各组大鼠尾部SNCV与正常对照组大鼠比较，DPN模型组大鼠尾部SNCV明显降低（P＜0.01）；与模型组大鼠比较，远志治疗组大鼠尾部SNCV明显升高（P＜0.01）。

见表1。

2.3各组大鼠坐骨神经AR活性与正常对照组大鼠比较，DPN模型组大鼠坐骨神经AR活性明显升高（P＜0.01）；与模型组大鼠比较，远志治疗组大鼠坐骨神经AR活性明显降低（P＜0.01）。

见表1。

表1各组大鼠血糖、尾部SNCV和坐骨神经
AR活性（xʃs，n=12）
组别血糖（mmol/L）SNCV（m/s）AR（U/mg）
正常对照组7.53ʃ1.311）36.57ʃ2.081）0.2645ʃ0.19131）DPN模型组25.40ʃ4.2227.45ʃ1.16 1.0695ʃ0.1811远志治疗组17.20ʃ4.561）33.20ʃ1.091）0.6266ʃ0.16331）与DPN模型组比较：1）P＜0.01
3讨论
随着糖尿病发病率的逐年上升，建立理想的动物模型对于深入研究DPN具有十分重要的意义。

目前尚无理想的DPN动物模型，研究DPN主要采用糖尿病动物模型。

已有实验证实，糖尿病大鼠成模后1 2个月就可观察到与人类DPN相似的改变〔5，6〕。

神经传导速度减慢是糖尿病出现神经病变的一个敏感指标，也是研究实验性DPN最常用的指标。

DPN时，一般感觉神经较运动神经先受累，因此SNCV减慢可作为DPN早期诊断的指标〔7〕。

有临床资料显示〔8〕，部分糖尿病患者虽然未出现DPN的临床表现，但电生理检查就可发现神经传导速度减慢。

DPN与胰岛素分泌不足及糖代谢紊乱密切相关，一般认为高血糖是DPN发病的首发因素，而葡萄糖多元醇代谢通路紊乱是DPN发生的重要发病机制之一。

多元醇代谢通路有两个关键酶，即AR和山梨醇脱氢酶，AR催化葡萄糖转化成山梨醇，山梨醇脱氢酶催化山梨醇转化为果糖。

糖尿病时，长期高血糖状态可使葡萄糖多元醇代谢通路紊乱，导致AR活性增强，致使神经细胞内山梨醇和果糖大量蓄积，继而引起神经细胞渗透压增高，Na+-K+-ATP酶活性下降，导致细胞肿胀、变性，生理功能受损，轴索萎缩，神经纤维节段性脱髓鞘〔9〕。

另外，AR过度活化导致其辅助因子NADPH大量消耗，从而抑制谷胱甘肽的产生，使细胞对自由基的易感性增加，导致周围神经氧化应激〔10〕；进而，导致神经纤维神经营养因子表达减少，影响轴浆运输，导致神经病变〔11〕。

有研究证实，不论是在体动物实验还是体外细胞培养，AR抑制剂不仅可以延缓SNCV的减慢，而且有助损伤神经纤维的修复甚至再生〔12〕。

植物远志为远志科远志属多年生草本植物，以干燥根入药，为我国常用的中草药。

现代研究发现，远志富含皂苷类、口山酮类、寡糖酯类等化合物，具有益智、抗抑郁、抗氧化衰老、抑菌抗炎、抗诱变等多方面的生物活性〔13 15〕。

有文献报道，从远志中提取分离出的酰化寡糖远志糖苷B可增强中枢胆碱能系统活性，增强认知功能，具有脑保护作用〔16〕。

但关于远志对糖尿病周围神经病变保护作用的研究，国内外报道甚少。

本研究发现，DPN模型大鼠尾部SNCV明显降低、坐骨神经AR活性明显升高，证实DPN时存在多元醇代谢通路的紊乱，进而引发模型大鼠周围神经发生病变；远志治疗组大鼠尾部SNCV明显高于DPN大鼠、坐骨神经AR活性明显低于DPN大鼠，表明远志治疗对DPN时多元醇代谢通路紊乱具有良性调节作用，可明显降低大鼠坐骨神经AR活性、逆转DPN大鼠尾部SNCV减慢，对DPN时周围神经损伤具有明显的改善作用。

远志为我国传统中草药，并且我国有丰富的远志资源，继续深入研究远志对糖尿病周围神经病变的保护作用具有重要的意义和良好的应用前景。

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〔2011-09-07收稿2011-10-12修回〕
（编辑曹梦园)
节旋藻藻胆蛋白对果蝇总抗氧化能力和丙二醛的影响
王塔娜
邰丽华
敖恩宝力格张二东县红霞（内蒙古师范大学，内蒙古呼和浩特010022）
〔摘
要〕目的
研究节旋藻藻胆蛋白对果蝇体内总抗氧化能力（T-
AOC ）和丙二醛（MDA ）含量的影响。

方法采用鄂尔多斯钝顶节旋藻藻
胆蛋白（P1）和Chad 湖钝顶节旋藻藻胆蛋白（P2）分别配制0.25%、0.50%和1.00%浓度的含蛋白培养基，以普通培养基为对照组、喂饲果蝇并测定各剂量组果蝇体内T-AOC 和MDA 含量。

结果P1、P2不同剂量组的雄果蝇T-AOC 较对照组均显著提高（P ＜0.05），雌果蝇T-AOC 虽提高，但为达
到显著性水平。

与对照组相比，
P1组雌雄果蝇MDA 含量明显降低（P ＜0.05），P2组雄果蝇MDA 含量明显降低（P ＜0.05）。

结论节旋藻藻胆蛋白
具有增强雄果蝇T-
AOC 和降低果蝇体内MDA 含量的作用。

不同产地钝顶节旋藻的藻胆蛋白对果蝇T-AOC 和MDA 含量的影响不存在差异。

〔关键词〕节旋藻；藻胆蛋白；总抗氧化能力；丙二醛〔中图分类号〕R151.2
〔文献标识码〕A
〔文章编号〕1005-9202（2012）21-4685-02；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.21.036
Effects of phycobiliprotein on total antioxidant capacity and malondialdehyde content in Drosophila melanogaster
WANG Ta-Na ，TAI Li-Hua ，Ao-En-Bao-Li-Ge ，et al .
College of Life Science and Technology ，Inner Mongolia Normal University ，Hohhot 010022，
Inner Mongolia ，China 【Abstract 】Objective To explore effect of Phycobiliprotein on the total antioxidant capacity （T-AOC ）and malondialdehyde
（MDA ）in vivo of Drosophila melanogaster.Methods The two test groups were respectively fed with culture media contained different dose （0.25%，0.50%and 1.00%）of P1which was phycobiliprotein of Arthrospira platensis from alkaline lakes in the Ordos Plateau ，and P2which was phycobiliprotein of Arthrospira platensis from Chad lake.Culture media of control group was general culture media.T-AOC and
MDA were detected in Drosophila melanogaster.Results T-AOC activity in male Drosophila melanogaster of P1，P2groups was higher than
that of control group （P ＜0.05）and T-AOC in female Drosophila melanogaster was improved in P1，P2groups ，but there was no significant difference between P1，P2groups and control group.MDA in male and female Drosophila melanogaster in P1，P2groups were all decreased
compared with the control group （P ＜0.05）.Conclusions Phycobiliprotein has the effects of enhancing activity of T-AOC in male Dro-sophila melanogaster and lowering content of MDA in vivo Drosophila melanogaster.There is no difference of effect of phycobiliprotein from different production region on T-AOC and MDA in vivo of Drosophila melanogaster.
【Key words 】Arthrospira ；Phycobiliprotein ；Total antioxidant capacity ；Malondialdehyde
基金项目：内蒙古自然科学基金（2010BS0504）；内蒙古自治区高等学校
科学研究项目（NJzy 08025）
通讯作者：邰丽华（1955-），女，教授，硕士，主要从事遗传与分子生物学
研究。

第一作者：王塔娜（1984-），女，硕士，主要从事植物遗传与分子生物学
研究。

节旋藻含丰富蛋白质、维生素、不饱和脂肪酸及多糖等生物活性物质，已成为我国最大的微藻养殖产业〔1〕。

藻胆蛋白具有亮丽的天蓝色，是节旋藻中重要的捕光色素蛋白，占节旋藻
干重的20%左右〔2〕
，其营养丰富而均衡、具有抗氧化〔3，4〕
、抗肿
瘤
〔5，6〕
等多种生理活性。

近年来，随着抗衰老研究的兴起，寻找
高效低毒的抗氧化剂成为广大研究者的目标。

Pinero 〔7〕
、俞丽
君等
〔8〕
、陈美珍等〔9〕
均证实了藻胆蛋白具有体外清除自由基的
作用，而已果蝇为实验动物的研究藻胆蛋白抗氧化作用的文献鲜见报道。

本文通过测定果蝇体内总抗氧化能力（T-AOC ）和丙二醛（MDA ）的含量，进而探讨藻胆蛋白的抗衰老作用机制。

1材料与方法1.1
材料
试验生物：黑腹果蝇（Drosophila melanogaster ）由
内蒙古师范大学生命科学与技术学院遗传试验室提供。

普通培养基原料：琼脂粉、玉米粉、红糖、酵母粉和丙酸。

P1培养基：在普通培养基上添加鄂尔多斯高原碱湖钝顶节旋藻藻胆蛋白制成0.25%、
0.50%和1.00%浓度的加蛋白培养基。

P2培·
5864·王塔娜等节旋藻藻胆蛋白对果蝇总抗氧化能力和丙二醛的影响第21期。