银耳多糖的提取及其清除自由基作用
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（2） 银耳多糖对 羟 自 由 基 的 清 除 作 用 明 显， 50% 清除量为 0. 112 mg / mI. 对邻苯三酚自氧化 有较好的抑制效果，对超氧自由基的清除能力随 着多糖浓度而升高，50% 清除量为 0. 264 mg / mI.
（3） 银耳多糖的油脂抗氧化作用明显，银耳 多糖的油脂的过氧化值变化曲线的变化率与加入 VC 的油脂的过氧化值变化曲线的变化率相近， 其油脂抗氧化性能介于 VE 和 VC 之间.
银耳多糖对油脂的抗氧化性能研究采用强制 实验法，即将 VC、VE、银耳多糖加入新炼制的 猪油中，置于 65C 的恒温烘箱中，定时取样检测 猪油的过氧化值（ POV 值）. 以 POV 值来表示油 脂的氧化速度，进而衡量抗氧化剂的活性. POV 值的测定方法按 GB5009. 37 - 96 标准执行.
0. 264 mg / mI，油脂抗氧化性能介于 VE 和 VC 之间. 关键词：银耳多糖；羟自由基；超氧阴离子；抗氧化
中图分类号：@53
文献标识码：A
0引言
银耳具有滋阴润肺，益胃生津等功效，常用 于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症. 通 江银耳是 四 川 通 江 地 区 的 特 产， 是 银 耳 中 的 上 品，有进一步开发利用的巨大潜力. 银耳多糖是 银耳的主要药效成分，银耳多糖能改善人体免疫 功能，增强巨噬细胞的巨噬功能，也具有提升白 细胞的功能. 长期服用银耳多糖能降低血压血 脂，防止动脉硬化，抑制肿瘤，增强机体免疫功 能，有延缓衰老和护肤之功效.
第 25 卷 第 1 期
2006 年 3 月
成都大学学报（ 自然科学版）
JOurnaI Of Chengdu University（ NaturaI Science）
文章编号：1004 - 5422（2006）01 - 0035 - 04
VOI. 25 NO. 1
Mar. 2006
银耳多糖的提取及其清除自由基作用
颜 军，郭晓强，邬晓勇，徐光域，苟小军
（ 成都大学 中药化学实验室，四川 成都 610106 ）
摘 要：讨论了采用热水提取、乙醇沉淀、sevag 法获得银耳多糖的方法. 并在体外化学模拟系统反应中，观
察该多糖消除羟自由基、超氧阴离子自由基以及防止油脂质氧化的性能. 试验表明：银耳多糖清除羟自由基
的作用明显，50% 清除量为 0. 112 mg / mI，对超氧自由基的清除能力随着多糖浓度而升高，50% 清除量为
每 100 克干银耳中大约含蛋白质（5 克）、脂肪
收稿日期：2005 - 11 - 26 基金项目：四川省中医药管理局重点及专项项目（2003A001，2003C001），成都大学校基金项目. 作者简介：颜 军（1971—），男，实验师，从事生物活性成分的提取及检测的研究.
·36·
成都大学学报（ 自然科学版）
银耳多糖经去除杂蛋白后，精制多糖得率为 9. 8% ，并且纯度进一步提高. 图 1 为银耳多糖 （0. 4g / mI） 的紫外扫描图谱.
4. 3 银耳多糖的抗氧化作用
通过银耳多糖对猪油的抗氧化性能研究表明 （ 见图 2）：银耳多糖的抗氧化作用明显，第五天
猪油的过氧化值开始出现较明显增加，加入银耳 多糖和 VE 的油脂的过氧化值在第八天开始出现 较大变化，加入 VC 的猪油的过氧化值在第十天 开始发生较大变化. 另外，加入银耳多糖的油脂 的过氧化值变化曲线的变化率与加入 VC 的油脂 的过氧化值变化曲线的变化率相近，而另外的变 化率较大. 因此，银耳多糖的油脂抗氧化性能介 于 VE 和 VC 之间.
第 25 卷
（0. 6 克）、色 素 等 物 质. 将 碾 细 的 银 耳 粉 末 用 80% 的乙醇浸泡 l2 小时（ 银耳粉末1 80% 的乙醇 = l1 2. 5），使大分子蛋白质变性、脂肪、色素 等物质溶解在乙醇溶液中. 因银耳多糖不溶于 80% 的乙醇，通过减压抽滤将乙醇浸出物除去， 再用适量的 80% 的乙醇洗涤滤渣. 2. 3 银耳多糖的浸提
羟基自由基的能力，50% 清除量为 0. 264 mg / mI.
表 2 清除自由基的测定
清除羟基自由基（ ·0H） 清除超氧阴离子自由基（02 - ）
编号 多糖浓度 清除率
Ec50
多糖浓度 清除率
Ec50
（ mg / mI）
（ mg / mI）（ mg / mI）
（ mg / mI）
1 0. 050 10. 3% 2 0. 075 25. 4%
将去除杂蛋白、色素的多糖溶液装入预先处 理好的透析袋，先用自来水透析 24 小时，再用 蒸馏水透析 l2 小时，然后醇析，干燥备用.
3 银耳多糖生理活性试验
3. l 银耳多糖清除羟自由基 按照 SmirnOff（l989） 的方法，利用 H2O2 与
FG2 + 混合产生·OH在体系内加入水杨酸捕捉·OH 并产生有色物质，该物质在 5l0nm 下有最大吸收.
取 4. 5mL，pH8. 2，50mmOI / L Tris-HCI 缓 冲 液，4. 2mI 蒸 馏 水. 混 匀 后 在 25C 水 浴 中 保 温 20min，取出后立即加入在 25C 预热过的 3mmOI 邻苯三酚 0. 3m（I 以 l0mmOI / L HCI 配制，空白管用 l0mmOI / L HCI 代替邻苯三酚的 HCI 溶液），迅速 摇匀后倒入比色杯，325nm 下每隔 l0s 测定吸光 度，计算线性范围内每分钟吸光度的增加. 3. 2. 2 样品活性测定
图 2 银耳多糖抗氧化作用的测定
图 1 银耳多糖的紫外扫描图谱
5结论
从紫外扫描图谱可看出：制备的银耳多糖在 260nm 和 280nm 波长处无明显吸收峰. 4. 2 银耳多糖清除自由基的能力
对银耳多糖清除自由基能力的测定分析可知 （ 见表 2），银耳多糖对羟基自由基和超氧阴离子 自由基都有清除能力，清除效果与多糖浓度成正 比. 表 2 数据显示：银耳多糖具有较好的清除羟 基自 由 基 的 活 性，50% 清 除 量 为 0. 112 mg / mI， 而清除超氧阴离子自由基（ 02 - ） 能力不如清除
（4） 自由基与衰老、心脑血管疾病、癌症等 疾病的发生发展密切相关. 因此，银耳多糖可以 保护细胞免受自由基的破坏，抑制组织脂质过氧 化，避免自由基过多对人体造成危害，并能有效 提高人体免疫力，延缓衰老. 因此，开发银耳多 糖类功能食品具有较现实的实际意义.
在加入邻苯三酚前，先加入一定体积的多糖 溶液，蒸馏水减少，然后按采用邻苯三酚自氧化 法测定的方法操作，并计算抑制率. 抑制率计算 公式为：
抑制率（% ）=［（AAO - AA）/ AAO］X l00% 式中：AAO 为邻苯三酚的自氧化速率；AA 为 加入多糖溶液后邻苯三酚的自氧化速率. 3. 3 银耳多糖的抗氧化作用
将浸出液浓缩至多糖接近饱和，加入无水乙 醇，搅拌. 随着乙醇加入量的增加，有白色丝状 物析出，即为多糖. 当乙醇的浓 度 达 到 80% 左 右，溶液中出现大量絮状物，表明多糖已基本全 部析出. 静置 2 小时后多糖沉于容器底部，离心 分离沉淀物，然后干燥，称重. 2. 5 银耳多糖的精制
将以上得到的银耳粗多糖加水溶解成接近饱 和状态，以 8000 转 / 分离心 30 分钟去除少量不 溶物. 再次醇析，可提高多糖的纯度. 也可分级 加入乙醇，既可纯化多糖又可使不同分子量和性 质的多糖达到进一步分离目的. 去除杂蛋白、色 素按表 l 步骤操作.
关于多糖的抗氧化作用已有诸多报道. 本文 对银耳多糖进行提取纯化，并对银耳多糖清除羟 自由基、超氧阴离子自由基和抑制油脂的氧化做 了研究，为银耳多糖的合理开发利用提供理论了 依据.
1 材料与设备
1. 1 药材和试剂 通江银耳取自四川省通江山霸王野生食品有
限公司，试剂均为国产分析纯. 1. 2 仪 器
反应 体 系 中 含 8. 8mmOI / LH2 O2lmI，9mmOI / LFGSO4lmI，9mmOI / L 水 杨 酸-乙 醇 lmI，不 同 浓 度的多糖溶液 lmI. 最后加 H2 O2 启动反应，37C 反应 0. 5 小时，以蒸馏水为参比，在 5l0nm 下测 量各浓度的吸光度.
0. 150 27. 8% 0. 200 35. 1%
3 0. 100 43. 0% 0. 112 0. 250 46. 3% 0. 264
4 0. 125 59. 7% 5 0. 150 66. 2%
0. 300 58. 9% 0. 350 67. 7%
（1） 经我们的方法改进，用水提醇析法提取 银耳多糖的方法简单、易操作，且提取的多糖色 白，纯度高. 银耳多糖的得率为 9. 8% .
银耳多糖不溶于冷水，可缓慢溶解于热水. 宜 采用多段溶出法以提高银耳多糖的得率. 将去除了 部分杂蛋白、色素、脂肪类物质的银耳粉加入 30 倍 的水，在 90 ~ l00C 的条件下浸提 2 小时，冷冻离 心，得一次浸提液，再加入适量水浸提，得二次浸 提液. 合并两次浸提的上清液备用. 2. 4 银耳粗多糖的醇析
表 l 去除杂蛋白、色素的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ骤
去除杂蛋白
容 器 多糖溶液1 氯仿1 正丁醇 振摇时间 离心速度 离心时间
分液漏斗
251 51 l
30min 8000rpm 30min
以上操作重复 l0 ~ l2 次，直至无沉淀为止
脱
色
容 器 多糖溶液1 30% 的 H2O2 振摇时间 温度
分液漏斗
l01 l
30min 30 ~ 40C
4 结果与讨论
4. l 银耳多糖的提取与精制 银耳多糖提取前先用醇浸提，这样可将色素
第1 期
颜 军，等：银耳多糖的提取及其清除自由基作用
·37·
等醇溶物先提取出来，而且使蛋白质变性. 通过 方法的改进，提取出的粗多糖色白.
银耳多糖醇析时，乙醇加入不宜过快，这样 可防止 胶 体 物 的 生 成. 若 乙 醇 的 浓 度 已 超 过 70% ，而溶液仍呈乳白浑浊状，可适当加热促使 银耳 多 糖 析 出，也 可 滴 入 少 量 的 酸（ pH 在 3 ~ 4）， 多 糖 即 可 较 快 地 析 出， 还 可 加 入 盐， 如 NaCI、Naac 或加入钙等 + 2 价盐效果更好. 引入 的杂质用透析法去除. 经浓缩、干燥后，粗多糖 得率为 23. 6% .
考 虑 到 多 糖 本 身 的 吸 收 光 值， 以 9mmOI / LFGSO4lmI，9mmOI / L 水 杨 酸-乙 醇 lmI， 不同浓度的多糖溶液 lmI 和 lmI 蒸馏水作为多糖 的本底吸收值. 清除率计算公式为：
清除率（% ）=［（A0 -（AX - AXO））/ A0］ X l00% 式中：A0 为空白对照液的吸光度；AX 为加入多 糖溶液后的吸光度；AXO为不加显色剂 H2 O2 多糖 溶液本底的吸光度. 3. 2 银耳多糖清除超氧阴离子自由基（ O2 - ） 3. 2. l 采用邻苯三酚自氧化法的测定
实验 所 用 仪 器 包 括：7200 型 分 光 光 度 计 （ UNICO），UV2S02PC 紫外—可见扫描分光光度
仪（ UNICO），LG20A 全自动高速冷冻离心机，减 压抽滤器，高压锅.
2 银耳多糖的提取
2. 1 银耳的烘干及碾磨 为提高银耳多糖的溶出率或多糖含量测定的
准确度，将银耳置于电热鼓风干燥箱中在 70 ~ S0C 的温度下烘干 2 ~ 3 小时. 待银耳子实体干 燥到可用手就压碎的程度，随即趁热碾磨，碾磨 粒度，要求 60 目以上的大于 60% . 2. 2 去除色素、脂肪、杂蛋白等
目前，自由基的致病机理引起了人们的极大 关注. 已有研究［1］表明，自由基在生物体内不断 地通过非酶反应与酶反应产生活性氧自由基，但 在抗氧化酶及外源性和内源性抗氧化剂的协同作 用下，活性氧自由基不断地被清除. 在正常生理 情况下，活性氧自由基可维持于有利无害的极低 水平，并保持稳衡性动态. 平衡浓度的活性氧自 由基中一部分可履行生理作用，而另一部分可损 伤生物分子. 生物体的细胞不时受到活性氧自由 基的攻击而发生损伤，不过损伤分子可以得到修 复、置换、降解、代谢和重新合成. 在衰老、应 激及某些病理情况下自由基产生增多或清除能力 减弱，使得自由基对肌体造成严重损伤.
（3） 银耳多糖的油脂抗氧化作用明显，银耳 多糖的油脂的过氧化值变化曲线的变化率与加入 VC 的油脂的过氧化值变化曲线的变化率相近， 其油脂抗氧化性能介于 VE 和 VC 之间.
银耳多糖对油脂的抗氧化性能研究采用强制 实验法，即将 VC、VE、银耳多糖加入新炼制的 猪油中，置于 65C 的恒温烘箱中，定时取样检测 猪油的过氧化值（ POV 值）. 以 POV 值来表示油 脂的氧化速度，进而衡量抗氧化剂的活性. POV 值的测定方法按 GB5009. 37 - 96 标准执行.
0. 264 mg / mI，油脂抗氧化性能介于 VE 和 VC 之间. 关键词：银耳多糖；羟自由基；超氧阴离子；抗氧化
中图分类号：@53
文献标识码：A
0引言
银耳具有滋阴润肺，益胃生津等功效，常用 于治疗虚劳咳嗽、阴伤燥咳、虚热口渴等症. 通 江银耳是 四 川 通 江 地 区 的 特 产， 是 银 耳 中 的 上 品，有进一步开发利用的巨大潜力. 银耳多糖是 银耳的主要药效成分，银耳多糖能改善人体免疫 功能，增强巨噬细胞的巨噬功能，也具有提升白 细胞的功能. 长期服用银耳多糖能降低血压血 脂，防止动脉硬化，抑制肿瘤，增强机体免疫功 能，有延缓衰老和护肤之功效.
第 25 卷 第 1 期
2006 年 3 月
成都大学学报（ 自然科学版）
JOurnaI Of Chengdu University（ NaturaI Science）
文章编号：1004 - 5422（2006）01 - 0035 - 04
VOI. 25 NO. 1
Mar. 2006
银耳多糖的提取及其清除自由基作用
颜 军，郭晓强，邬晓勇，徐光域，苟小军
（ 成都大学 中药化学实验室，四川 成都 610106 ）
摘 要：讨论了采用热水提取、乙醇沉淀、sevag 法获得银耳多糖的方法. 并在体外化学模拟系统反应中，观
察该多糖消除羟自由基、超氧阴离子自由基以及防止油脂质氧化的性能. 试验表明：银耳多糖清除羟自由基
的作用明显，50% 清除量为 0. 112 mg / mI，对超氧自由基的清除能力随着多糖浓度而升高，50% 清除量为
每 100 克干银耳中大约含蛋白质（5 克）、脂肪
收稿日期：2005 - 11 - 26 基金项目：四川省中医药管理局重点及专项项目（2003A001，2003C001），成都大学校基金项目. 作者简介：颜 军（1971—），男，实验师，从事生物活性成分的提取及检测的研究.
·36·
成都大学学报（ 自然科学版）
银耳多糖经去除杂蛋白后，精制多糖得率为 9. 8% ，并且纯度进一步提高. 图 1 为银耳多糖 （0. 4g / mI） 的紫外扫描图谱.
4. 3 银耳多糖的抗氧化作用
通过银耳多糖对猪油的抗氧化性能研究表明 （ 见图 2）：银耳多糖的抗氧化作用明显，第五天
猪油的过氧化值开始出现较明显增加，加入银耳 多糖和 VE 的油脂的过氧化值在第八天开始出现 较大变化，加入 VC 的猪油的过氧化值在第十天 开始发生较大变化. 另外，加入银耳多糖的油脂 的过氧化值变化曲线的变化率与加入 VC 的油脂 的过氧化值变化曲线的变化率相近，而另外的变 化率较大. 因此，银耳多糖的油脂抗氧化性能介 于 VE 和 VC 之间.
第 25 卷
（0. 6 克）、色 素 等 物 质. 将 碾 细 的 银 耳 粉 末 用 80% 的乙醇浸泡 l2 小时（ 银耳粉末1 80% 的乙醇 = l1 2. 5），使大分子蛋白质变性、脂肪、色素 等物质溶解在乙醇溶液中. 因银耳多糖不溶于 80% 的乙醇，通过减压抽滤将乙醇浸出物除去， 再用适量的 80% 的乙醇洗涤滤渣. 2. 3 银耳多糖的浸提
羟基自由基的能力，50% 清除量为 0. 264 mg / mI.
表 2 清除自由基的测定
清除羟基自由基（ ·0H） 清除超氧阴离子自由基（02 - ）
编号 多糖浓度 清除率
Ec50
多糖浓度 清除率
Ec50
（ mg / mI）
（ mg / mI）（ mg / mI）
（ mg / mI）
1 0. 050 10. 3% 2 0. 075 25. 4%
将去除杂蛋白、色素的多糖溶液装入预先处 理好的透析袋，先用自来水透析 24 小时，再用 蒸馏水透析 l2 小时，然后醇析，干燥备用.
3 银耳多糖生理活性试验
3. l 银耳多糖清除羟自由基 按照 SmirnOff（l989） 的方法，利用 H2O2 与
FG2 + 混合产生·OH在体系内加入水杨酸捕捉·OH 并产生有色物质，该物质在 5l0nm 下有最大吸收.
取 4. 5mL，pH8. 2，50mmOI / L Tris-HCI 缓 冲 液，4. 2mI 蒸 馏 水. 混 匀 后 在 25C 水 浴 中 保 温 20min，取出后立即加入在 25C 预热过的 3mmOI 邻苯三酚 0. 3m（I 以 l0mmOI / L HCI 配制，空白管用 l0mmOI / L HCI 代替邻苯三酚的 HCI 溶液），迅速 摇匀后倒入比色杯，325nm 下每隔 l0s 测定吸光 度，计算线性范围内每分钟吸光度的增加. 3. 2. 2 样品活性测定
图 2 银耳多糖抗氧化作用的测定
图 1 银耳多糖的紫外扫描图谱
5结论
从紫外扫描图谱可看出：制备的银耳多糖在 260nm 和 280nm 波长处无明显吸收峰. 4. 2 银耳多糖清除自由基的能力
对银耳多糖清除自由基能力的测定分析可知 （ 见表 2），银耳多糖对羟基自由基和超氧阴离子 自由基都有清除能力，清除效果与多糖浓度成正 比. 表 2 数据显示：银耳多糖具有较好的清除羟 基自 由 基 的 活 性，50% 清 除 量 为 0. 112 mg / mI， 而清除超氧阴离子自由基（ 02 - ） 能力不如清除
（4） 自由基与衰老、心脑血管疾病、癌症等 疾病的发生发展密切相关. 因此，银耳多糖可以 保护细胞免受自由基的破坏，抑制组织脂质过氧 化，避免自由基过多对人体造成危害，并能有效 提高人体免疫力，延缓衰老. 因此，开发银耳多 糖类功能食品具有较现实的实际意义.
在加入邻苯三酚前，先加入一定体积的多糖 溶液，蒸馏水减少，然后按采用邻苯三酚自氧化 法测定的方法操作，并计算抑制率. 抑制率计算 公式为：
抑制率（% ）=［（AAO - AA）/ AAO］X l00% 式中：AAO 为邻苯三酚的自氧化速率；AA 为 加入多糖溶液后邻苯三酚的自氧化速率. 3. 3 银耳多糖的抗氧化作用
将浸出液浓缩至多糖接近饱和，加入无水乙 醇，搅拌. 随着乙醇加入量的增加，有白色丝状 物析出，即为多糖. 当乙醇的浓 度 达 到 80% 左 右，溶液中出现大量絮状物，表明多糖已基本全 部析出. 静置 2 小时后多糖沉于容器底部，离心 分离沉淀物，然后干燥，称重. 2. 5 银耳多糖的精制
将以上得到的银耳粗多糖加水溶解成接近饱 和状态，以 8000 转 / 分离心 30 分钟去除少量不 溶物. 再次醇析，可提高多糖的纯度. 也可分级 加入乙醇，既可纯化多糖又可使不同分子量和性 质的多糖达到进一步分离目的. 去除杂蛋白、色 素按表 l 步骤操作.
关于多糖的抗氧化作用已有诸多报道. 本文 对银耳多糖进行提取纯化，并对银耳多糖清除羟 自由基、超氧阴离子自由基和抑制油脂的氧化做 了研究，为银耳多糖的合理开发利用提供理论了 依据.
1 材料与设备
1. 1 药材和试剂 通江银耳取自四川省通江山霸王野生食品有
限公司，试剂均为国产分析纯. 1. 2 仪 器
反应 体 系 中 含 8. 8mmOI / LH2 O2lmI，9mmOI / LFGSO4lmI，9mmOI / L 水 杨 酸-乙 醇 lmI，不 同 浓 度的多糖溶液 lmI. 最后加 H2 O2 启动反应，37C 反应 0. 5 小时，以蒸馏水为参比，在 5l0nm 下测 量各浓度的吸光度.
0. 150 27. 8% 0. 200 35. 1%
3 0. 100 43. 0% 0. 112 0. 250 46. 3% 0. 264
4 0. 125 59. 7% 5 0. 150 66. 2%
0. 300 58. 9% 0. 350 67. 7%
（1） 经我们的方法改进，用水提醇析法提取 银耳多糖的方法简单、易操作，且提取的多糖色 白，纯度高. 银耳多糖的得率为 9. 8% .
银耳多糖不溶于冷水，可缓慢溶解于热水. 宜 采用多段溶出法以提高银耳多糖的得率. 将去除了 部分杂蛋白、色素、脂肪类物质的银耳粉加入 30 倍 的水，在 90 ~ l00C 的条件下浸提 2 小时，冷冻离 心，得一次浸提液，再加入适量水浸提，得二次浸 提液. 合并两次浸提的上清液备用. 2. 4 银耳粗多糖的醇析
表 l 去除杂蛋白、色素的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ骤
去除杂蛋白
容 器 多糖溶液1 氯仿1 正丁醇 振摇时间 离心速度 离心时间
分液漏斗
251 51 l
30min 8000rpm 30min
以上操作重复 l0 ~ l2 次，直至无沉淀为止
脱
色
容 器 多糖溶液1 30% 的 H2O2 振摇时间 温度
分液漏斗
l01 l
30min 30 ~ 40C
4 结果与讨论
4. l 银耳多糖的提取与精制 银耳多糖提取前先用醇浸提，这样可将色素
第1 期
颜 军，等：银耳多糖的提取及其清除自由基作用
·37·
等醇溶物先提取出来，而且使蛋白质变性. 通过 方法的改进，提取出的粗多糖色白.
银耳多糖醇析时，乙醇加入不宜过快，这样 可防止 胶 体 物 的 生 成. 若 乙 醇 的 浓 度 已 超 过 70% ，而溶液仍呈乳白浑浊状，可适当加热促使 银耳 多 糖 析 出，也 可 滴 入 少 量 的 酸（ pH 在 3 ~ 4）， 多 糖 即 可 较 快 地 析 出， 还 可 加 入 盐， 如 NaCI、Naac 或加入钙等 + 2 价盐效果更好. 引入 的杂质用透析法去除. 经浓缩、干燥后，粗多糖 得率为 23. 6% .
考 虑 到 多 糖 本 身 的 吸 收 光 值， 以 9mmOI / LFGSO4lmI，9mmOI / L 水 杨 酸-乙 醇 lmI， 不同浓度的多糖溶液 lmI 和 lmI 蒸馏水作为多糖 的本底吸收值. 清除率计算公式为：
清除率（% ）=［（A0 -（AX - AXO））/ A0］ X l00% 式中：A0 为空白对照液的吸光度；AX 为加入多 糖溶液后的吸光度；AXO为不加显色剂 H2 O2 多糖 溶液本底的吸光度. 3. 2 银耳多糖清除超氧阴离子自由基（ O2 - ） 3. 2. l 采用邻苯三酚自氧化法的测定
实验 所 用 仪 器 包 括：7200 型 分 光 光 度 计 （ UNICO），UV2S02PC 紫外—可见扫描分光光度
仪（ UNICO），LG20A 全自动高速冷冻离心机，减 压抽滤器，高压锅.
2 银耳多糖的提取
2. 1 银耳的烘干及碾磨 为提高银耳多糖的溶出率或多糖含量测定的
准确度，将银耳置于电热鼓风干燥箱中在 70 ~ S0C 的温度下烘干 2 ~ 3 小时. 待银耳子实体干 燥到可用手就压碎的程度，随即趁热碾磨，碾磨 粒度，要求 60 目以上的大于 60% . 2. 2 去除色素、脂肪、杂蛋白等
目前，自由基的致病机理引起了人们的极大 关注. 已有研究［1］表明，自由基在生物体内不断 地通过非酶反应与酶反应产生活性氧自由基，但 在抗氧化酶及外源性和内源性抗氧化剂的协同作 用下，活性氧自由基不断地被清除. 在正常生理 情况下，活性氧自由基可维持于有利无害的极低 水平，并保持稳衡性动态. 平衡浓度的活性氧自 由基中一部分可履行生理作用，而另一部分可损 伤生物分子. 生物体的细胞不时受到活性氧自由 基的攻击而发生损伤，不过损伤分子可以得到修 复、置换、降解、代谢和重新合成. 在衰老、应 激及某些病理情况下自由基产生增多或清除能力 减弱，使得自由基对肌体造成严重损伤.