抗人球蛋白试验

直接Coombs试验：是检查被检红细胞上 有无不完全抗体。
间接Coombs试验：是检查血清中游离的 不完全抗体。
直接抗人球蛋白试验
直接抗人球蛋白试验原理： 患者体内若有与红细胞抗原不相合的不完全抗
体存在，可与红细胞结合形成抗原抗体复合物 。 但因不完全抗体分子量小，不能有效地连接抗 原抗体复合物，仅使红细胞处于致敏状态。 加入抗球蛋白血清，与红细胞上吸咐的不完全 抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥，出现肉眼 可见的凝集。 这种直接检测体内被抗体或（和）补体致敏红 细胞的试验称之为直接抗球蛋白试验。
直接抗人球蛋白试验
直接抗人球蛋白试验操作：（65%凝胶， 35%抗人球蛋白试剂）
1.撕开检测卡的封膜于反应腔中加入待检 1%RBC生理盐水悬液50ul；
2.将检测卡于离心机1800r/min 1min, 2500r/min 1min离心；
3.取出，结果判读；
结果判读
致敏RBC
可见凝集

自身抗体
抗人球蛋白
2.将检测卡37℃孵育≧10 min，取出，置离心 机1800r/min 1min, 2500r/min 1min离心；
3.取出，结果判读；（方法同上）
同种异型抗体
抗人免疫球蛋白
间接Coombs试验
4.结果解释
阳性：待检血浆或血清中含有不完全抗体 IgG或完全抗体IgM ；
阴性：待检血浆或血清中不含不完全抗体 IgG或完全抗体IgM ；
抗人球蛋白试验意义
1.本试验是诊断自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的重 要依据，特别是IgG型引起的溶血性贫血，直接 反应常呈强阳性，间接反应大多阴性，但亦可阳 性。（血肾科有一病例）
2.新生儿同种免疫溶血病：因Rh血型不合所致溶血 病，直接及间接反应均强阳性，持续数周、换血 输血后数天内可变为阴性，由于“ABO”血型不合 引起 的溶血病，直接常为阴性或弱阳性，间接反 应为阳性.
5.红细胞血型不合引起的输血反应
6.ABO或Rh血型不合输血，供者的红细胞被受者的 血型抗体致敏，在供者被致敏的红细胞完全破坏 以前，直接反应阳性
7.Rh阴性者如过去不曾接受过Rh阳性者的血或曾没 有妊娠Rh阳性胎儿者，间接反应阳性，第一次输 血后（Rh阳性的血），数天之内间接反应也会变 为阳性
8.在传染性单核细胞增多症、SLE、恶性淋巴 瘤、慢性淋巴细胞白血病、癌肿、铅中毒 、结节性动脉周围炎、EVan氏综合征等， 病人直接反应亦可阳性
直接Coombs试验
4.结果解释
阳性：待检标本RBC已致敏IgG不完全抗体 或补体；
阴性：待检标本RBC未致敏不完全IgG抗体 。
间接抗人球蛋白试验
间接抗人球蛋白试验原理：
用已知抗原的红细胞检测受检者血清中相应的不 完全抗体；或用已知的不完全抗体检测红细胞上 相应的抗原。
在37℃条件下，若被检血清或红细胞有对应的不 完全抗体或抗原，则抗原抗体作用使红细胞致敏
3.药物诱发的免疫性溶血性贫血 ①α-甲基多巴型：直接及间接反应均阳性。 ②青霉素型：直接反应阳性，间接反应阴性 ③福阿亭型：（奎宁等药物）抗体通常为IgM，偶有IgG 型者，直接反应为阳性，间接反应阴性
4.冷凝集素综合征： 直接反应阳性，间接反应阴性（ 37℃）。由于本病红细 胞膜附着的是补体C4和C3而不是IgG或IgM，如果用抗 IgG或抗IgM抗血清做试验时则结果阴性，如以抗补体的 抗血清做试验则直接反应阳性。
9.阵发性寒冷性血红蛋白尿症患者中，急性 发作后用抗补体血清做试验直接反应常为 阳性。
我们科室Coombs试验已开展，报告方法： 1、接收标本； 2、完成试验； 3、免疫组中免疫手工中报告结果。
谢谢
再加抗人球蛋白试剂，与红细胞上不完全抗体结 合，出现肉眼可见凝集。
这种通过体外将红细胞致敏后，再检测红细胞有 无不完全抗体或抗原的试验称为间接抗人球蛋白 试验。
间接抗人球蛋白试验
间接抗人球蛋白试验操作：（65%凝胶，35% 抗人球蛋白试剂）
1.撕开检测卡的封膜于反应腔中依标记分别加入 相应的0.5%筛选细胞LIM悬液100ul，各管再 加入待检血浆或血清25ul；
抗人球蛋白试验
马强虎
1945年，英国免疫学家库姆斯（Coombs） 等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验
，即抗人球蛋白试验。别名： Coombs‘试验(库姆 斯试验) 。 Coombs试验是利用抗球蛋白抗体作为 第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗
体，使红细胞凝集。
抗人球法是检测不完全抗体的经典方法， 分为直接试验(直接反应)和间接试验(间 接反应)。